第三军医大学学报杂志

长期接触贫铀对大鼠遗传毒性的初步研究

关键词: 贫铀  精子  微核  毒性  

目的 研究贫铀植入／摄入3个月后对大鼠的毒性作用。方法 观察大鼠精子畸形率，骨髓微核率的改变．睾丸的超微结构和病理形态学改变以及采用显性致死突变试验观察贫铀对大鼠的生殖毒性。结果 植入／摄入贫铀后大鼠精子畸形率和微核率均有增加，睾丸超微结构均有不同程度的改变，而病理形态学观察则未见显著影响。植入组大鼠受孕率明显低于对照组...

SSX基因家族HLA-A2．1限制性CTL表位预测及其MHC-I亲和力分析

关键词: ssx肿瘤基因  表位预测  结合亲和力  

目的 通过对肿瘤基因SSX家族不同成员进行CTL表位预测，并对其与MHC-I亲和力进行分析，为探索基于SSX肿瘤基因家族的免疫治疗奠定基础。方法 利用基于超基序结合量化基序方案开发的HLA-A2．1限制性CTL表位预测软件，对SSX基因家族不同成员进行CTL表位预测，然后合成SSX相关待测表位肽P1（AMTKLGFKA）、P4（AMT-KLGFNV）、P5（AMTKLGFKV）和P6（V...

佛波酯等3种促癌物诱导BALB／c 3T3细胞骨桥素基因表达升高

关键词: 骨桥素基因  促癌物  佛波酯  岗田酸  氯化镉  

目的 探讨促癌物佛波酯（12-O-tetradecanoylphorbol-13-acetate，TPA），岗田酸（okadaic acid，OA）和氯化镉（cadmium chloride，CdCl2）在促进BALB／c 313细胞转化过程中对骨桥素基因（OPN）转录表达的影响。方法 以N-甲基-N‘-硝基-N-亚硝基胍（MNNG）为启动剂，TPA，OA和CdCl2分别为促癌剂，建立BALB／c 313细胞转化模型。采用小鼠毒理基...

国产奥沙利铂联合氟尿嘧啶及亚叶酸钙治疗晚期大肠癌疗效观察

关键词: 结肠直肠肿瘤  药物联合疗法  

大肠癌是最常见的恶性肿瘤之一。近年来，我国大肠癌发病率呈上升趋势，病死率也不断上升。晚期大肠预愈后差，复发转移和化疗不理想，我们应用奥沙利铂（L-OHP，商品名艾恒，江苏恒瑞制药有限公司生产），联合氟尿嘧啶（5-Fu）、亚叶酸钙（CF）治疗复发转移大肠癌取得较好疗效，现报告如下。

大鼠微管相关蛋白4重组腺病毒载体的构建及在细胞中的表达鉴定

关键词: map4  腺病毒  cdna  微管相关蛋白  

目的 构建大鼠微管相关蛋白4（microtubule-ossociated protein4，MAP4）重组腺病毒载体，并转染新生大鼠体外培养的心肌细胞进行表达和鉴定，为真核表达及有关实验研究提供基础。方法 设计1对引物，应用逆转录多聚酶链式反应（RT-PCR）技术，从大鼠心肌细胞总mRNA中扩增出MAP4 cDNA，并将MAP4 cDNA克隆到腺病毒穿梭质粒pShuttle2中，构建pShutt...

内皮抑素重组腺病毒表达载体的构建及其对血管内皮细胞增殖特性的影响

关键词: 内皮抑素  腺病毒载体  内皮细胞  增殖  

目的 构建含有人内皮抑素（endostatin，ES）基因的重组腺病毒Ad／hEnd，并探讨与感染该病毒的角朊细胞共培养时内皮细胞增殖特性的改变。方法以人胎肝组织mRNA为模板，通过RT-PCR及PCR获得ES基因序列，插入到腺病毒穿梭质粒pAdTrack-CMV中，获得重组质粒pAdTrack-ES。经鉴定后将阳性重组子转化至pAdeasy1受体菌，筛选阳性克隆。脂质体介导转染2...

人脑星形细胞肿瘤微血管组织芯片的构建

关键词: 星形细胞肿瘤  组织芯片  血管生成  

目的 制作含有不同微血管形态的人脑星形细胞肿瘤组织芯片，并探讨其在血管生成研究中的应用价值。方法 从200例人脑胶质瘤组织标本中选择含有不同类型微血管形态组织36例作为供体组织，经打孔、取样、点样等步骤，制作AstMV组织芯片，并进行CD34、FVi-RAg和CD105免疫组化标记，观察微血管形态特点和血管生成活性。结果 成功制作出了含有不同微...

雄激素受体在大鼠触须毛囊干细胞中的表达研究

关键词: 雄激素受体  毛囊干细胞  毛囊周期  细胞分化  

目的 探讨在毛囊周期的3个不同时期（生长期、退化期和静止期）中大鼠毛囊干细胞中以及体外培养的毛囊干细胞中雄激素受体（androgen receptor，AR）的表达规律及其意义。方法 采用免疫组织化学方法检测AR表达，采用总RNA提取法及-RT-PCR检测AR mRNA的表达情况。结果 ①在体情况下，生长期、退化期和静止期毛囊干细胞中均有AR的表达，AR mRNA在...

体外培养条件下毛囊bulge细胞分泌的β神经生长因子的检测

关键词: 毛囊  bulge细胞  

目的 定性定量地检测毛囊bulge细胞体外培养条件下分泌的β-神经生长因子（β-nerve growth factor，β-NGF）及其与bulge细胞生长状态的关系。方法 首先使用显微操作技术剥离出原代组织，然后培养原代细胞，使用超薄切片和透射电镜技术来观察原代细胞超微结构，使用酶联免疫吸附（enzyme linked immunosorbent assay。ELISA）方法测定原代bulge细...

1例肾移植术后对硝普钠耐受并氰化物中毒患者护理

关键词: 肾移植术  硝普钠  氰化物中毒  护理  

硝普钠（sodium nitroprusside，SNP）作为一种速效的血管扩张药物，广泛用于临床，其常见副作用是血压急剧下降，而其代谢产物如氰化物等的毒副作用较少见。本研究就1例肾移植术后患者对硝普钠耐受并氰化物中毒的护理进行探讨。

IFN-β基因启动子调控区域的分析及IRF-3报告基因的构建

关键词: 启动子  调控元件  报告基因  

目的 对IRF-3的主要靶基因——小鼠IFN-β基因启动子区域进行分析并构建IRF-3报告基因载体。方法 将小鼠IFN-β基因启动子全序列以及不同截短片段克隆到无启动子的pGF3basic／enhancer质粒中，以EGFP为报告基因，转染小鼠Raw264．7巨噬细胞系后观察细胞对LPS刺激的反应。结果 IFN-β启动子PRD调控区域上游序列、PRDI区，PRDII区和PRDIV区缺失后，LP...

iASPP特异性RNAi表达载体的构建及其干扰效果鉴定

关键词: aspp  质粒  rnai  

目的 构建iASPP基因的RNAi真核表达载体PGCsilencer^TM H1／Neo／GFP／RNAi，并观察其转染白血病细胞株Jurkat前后iASPP的表达变化以及其对细胞凋亡的影响。方法 根据GenBank中iASPP的序列，设计特异性siRNA序列，将模板序列克隆至PGCsilencer^TM H1／Neo／GFP质粒中，测序鉴定后，用脂质体将重组子转染至Jurkat细胞中．用RT-PCR方法检测iASPP的...

胚胎干细胞向胰岛素分泌细胞分化的体外诱导

关键词: 胚胎干细胞  分化  胰岛素分泌细胞  糖尿病  

目的 探讨胚胎干细胞向胰岛素分泌细胞分化诱导的途径和方法，为阐明胰岛β-细胞的发育机制和糖尿病的细胞移植治疗奠定基础。方法 将传统的多步诱导法改良为两步诱导法，将胚胎干细胞诱导为胰岛素分泌细胞，并与传统的多步法进行比较。结果 经过两步诱导，胚胎干细胞被诱导成了胰岛素分泌细胞，越过了先将胚胎干细胞诱导为神经前体细胞，再进一...

人胎盘微血管内皮细胞体外原代培养及鉴定方法

关键词: 胎盘  微血管内皮细胞  原代培养  鉴定  

目的 探索人胎盘微血管内皮细胞的体外培养方法，并对其进行鉴定，为构建体外人胎盘屏障极性模型奠定基础。方法 采用酶消化法，获取组织及细胞悬液，经密度梯度离心后，获得较高产量微血管内皮细胞，并进行体外培养。进一步对人胎盘微血管内皮细胞进行免疫细胞化学法的Ⅷ因子相关抗原及CD34鉴定，用透射电镜观察细胞质Weibel-Palade小体。结果 ...

新型漏声表面波生物传感器液相检测条件的实验研究

关键词: 漏声表面波  传感器  延迟线  相位  

目的 探讨漏声表面波生物传感器液相检测系统的影响因素。方法 构建检测和参比双路延迟线，并观察在不同影响因素如离子浓度、缓冲液pH值及不同粘度的甘油PBS溶液中两路延迟线的相位变化规律。结果 检测延迟线声表面波信号的相位值随溶液粘度、离子浓度、pH值的增大而发生明显的变化，而参比通道的相位曲线变化不明显。结论 成功构建了漏声表面...

大鼠生长期触须毛囊干细胞中FGF-13的表达研究

关键词: 毛囊  干细胞  

目的 探讨大鼠生长期触须毛囊中以及体外培养的毛囊隆突部细胞即毛囊干细胞中FGF-13的表达分布及其意义。方法 分别采用免疫组织化学方法和免疫细胞化学方法检测FGF-13的表达。结果 体外和在体两种情况下，毛囊隆突部细胞都有FGF-13的表达，在体情况下毛囊Bulge区以下毛球部以上的外根鞘细胞中亦有干细胞标记和FGF-13的表达。结论 提示FGF-13参...

显微手术治疗颅-眶沟通瘤的护理

关键词: 护理  

颅-眶沟通瘤是较少见肿瘤。本研究对我科1997-2003年18例颅-眶沟通瘤患者资料进行回顾性总结研究，制定出新的护理方案，以期提高该型肿瘤的疗效，减少术后并发症。

阿司匹林对大鼠缺血心肌血管生成及内皮祖细胞动员的影响

关键词: 心肌缺血  阿司匹林  血管生成  内皮祖细胞  大鼠  

目的 观察阿司匹林对大鼠缺血心肌血管生成和内皮祖细胞（endothelial progenitor cells，EPCs）动员的影响和可能机制。方法 实验大鼠分为正常对照组、假手术组、心肌缺血加大剂量阿司匹林组、心肌缺血加小剂量阿司匹林组和单纯心肌缺血组。心肌缺血组和假手术组于术后一周从心腔内取血测血管内皮生长因子（VEGF），外周血分离单个核细胞培养计...

γ干扰素诱导蛋白30基因在系统性红斑狼疮CD4^＋T细胞中的表达分析

关键词: 系统性红斑狼疮  

目的 探讨系统性红斑狼疮（systemic lupus erythematosus，SLE）患者CD4^＋T细胞mRNA中干扰素诱导蛋白30基因（IP-30）的表达水平与SLE疾病活动度的相关性。方法 收集23例SLE患者和10例正常对照人群的临床资料。取外周血用免疫磁珠法分离出CD4^＋T细胞，抽提RNA并逆转录合成cDNA，运用GLGI方法从LongSAGE标签库中筛选出IP-30，比较该基因在系统...

光化学作用增强阳离子聚合物介导EGFP转染结肠癌

关键词: 光敏剂  光动力疗法  阳离子聚合物  转染  

目的 观察光化学基因转染技术对阳离子聚合物介导目的DNA转染结肠癌细胞效率的影响。方法 以结肠癌细胞SW480、HT29为靶细胞，激光共聚焦显微镜观察光敏剂TPPS2a的胞内分布，MTT法观察基于TPPS2a的光化学作用对结肠癌细胞的生长抑制作用，同时以阳离子聚合物PEI为DNA载体，EGFP质粒为目的DNA，通过流式细胞技术对比观察光化学作用对阳离子聚合物...

大鼠骨髓间充质干细胞体外诱导分化的心肌样细胞内Ca^2＋和CaMKⅡ的变化

关键词: 骨髓问充质干细胞  大鼠  激光共聚焦  western  blot  

目的 探讨大鼠骨髓间充质干细胞（rat bone marrow mesenchymal stem cells，MSCs）体外诱导分化为心肌样细胞内游离钙浓度（[Ca^2＋]．）及钙调蛋白依赖性蛋白激酶Ⅱ（CaMKⅡ）的表达变化。方法 取健康SD大鼠骨髓，用5-氮杂胞苷体外诱导培养。取诱导培养2、3、4周的MSCs为Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ组，另取急性分离的心肌细胞为对照组，分别用激光共聚焦技术...

参考文献类型及标识

反义波形蛋白逆转录病毒对损伤的星形胶质细胞的作用

关键词: 星形胶质细胞  波形蛋白  western  blot  

目的 探讨重组反义波形蛋白cDNA逆转录病毒重组质粒对体外培养损伤的星形胶质细胞（astrocyte，AST）波形蛋白（vimentin）表达的影响。方法 采用体外培养AST划伤模型，设实验组及对照组，通过免疫荧光、RT-PCR、Westem blot等方法，研究反义波形蛋白逆转录病毒感染对损伤AST波形蛋白表达的影响。结果 反义波形蛋白逆转录病毒使损伤AST生长抑制...

C5a反义肽对实验性脓毒症小鼠肺损伤的作用研究

关键词: 过敏毒素c5a  反义肽  脓毒症  肺  

目的 研究CSa反义肽（NH2-EARLQRVFLYVNPS-COOH）对盲肠结扎穿孔（cecal ligation and puncture，CLP）致脓毒症小鼠发生肺损伤的保护性作用。方法 实验组小鼠CLP后即经尾静脉注射反义肽R4 1、2、4、8ms／kg，浓度0．5ms／m1），观察不同剂量R4对小鼠96h生存率的影响，并对肺组织进行病理观察，检测肺髓过氧化物酶（MPO）活性，检测动脉血氧分压...

关于数字的用法

外源性高胰岛素血症对血管内皮细胞sICAM-1表达的影响

关键词: 高胰岛素血症  黏附分子  动脉粥样硬化  

目的 通过观察高胰岛素血症对血管内皮细胞可溶性细胞间黏附分子-1（sICAM-1）表达的影响，探讨其在动脉粥样硬化（atherosclemsis，AS）形成和发展中的作用。方法 新西兰白兔40只，随机分为4组：正常对照组、高胰岛素血症组、高糖高胆固醇组、联合组。每日皮下注射胰岛素，建立外源性高胰岛素血症。通过放射免疫法测血清胰岛素水平，酶联免疫吸...

重组小鼠高迁移率族蛋白B1抗菌活性研究

关键词: 原核表达  抗菌活性  

目的：制备具有功能活性的重组小鼠高迁移率族蛋白B1（recombinant mouse high-mobility group box-1，rmHMGBI）并观察其抗菌活性，为深入研究HMGBI抗菌功能创造条件。方法 提取BALB／c小鼠脾脏总RNA，经RT-PCR扩增得到编码小鼠HMGBI的cDN段，序列测定正确后，构建于原核表达载体pQE-80L，转化于大肠杆菌DH5α，经IPTG诱导表达目的蛋白，再经Ni^...

家兔非经胸深低温低流量体外循环模型的建立

关键词: 深低温低流量  体外循环  模型  动物  

目的 建立家兔非经胸深低温低流量（deep hypothermic low flow，DHLF）体外循环（cardiopulmonary bypass，CPB）模型。方法 选取体质量2．0～2．5kg家兔36只，18只供血，18只用于建立模型，采用单侧股动脉灌注，双侧股静脉引流建立CPB，体表冰浴结合血液降温，肛温最低降至18℃保持低流量灌注30min，随后复温至35℃脱离体外循环，监测血液动力...

关于医学符号的使用

大豆低聚糖及大豆多肽对大鼠血脂代谢的影响

关键词: 大豆低聚糖  大豆多肽  高脂血症  血脂  载脂蛋白  

目的 探讨大豆低聚糖及大豆多肽单独和联合应用对大鼠血脂水平的影响。方法 60只健康成年SD大鼠随机分为5组：分别饲喂正常饲料（正常对照组ND），高脂饲料（高血脂模型组HFD），高脂饲料＋2％大豆低聚糖（SO组）、高脂饲料＋3％大豆多肽（sP组）、高脂饲料＋2％大豆低聚糖＋3％大豆多肽（SOP组）8周，测定血脂及载脂蛋白含量。结果 与HFD组比较...

人牙髓干细胞体外二维和三维培养的实验研究

关键词: 牙髓干细胞  三维培养  

目的 分离人牙髓干细胞并在体外进行二维和三维培养。方法 从健康成人拔除的第二前磨牙获得牙髓，酶消化法分离获得牙髓干细胞，并进行鉴定。体外对牙髓干细胞在二维和三维空间里进行培养，并比较其增殖效率。结果 人牙髓干细胞在体外呈克隆样生长，诱导条件下可向肌细胞和成牙本质细胞方向分化。在二维空间里培养，细胞密度提高了4．12倍，而在...

犬可复性胆总管不全梗阻对Oddi括约肌功能的影响

关键词: 胆总管  不全梗阻  oddi括约肌  动物模型  

目的 建立可复性胆总管不全梗阻的动物模型，研究胆总管不全梗阻对Oddi括约肌（sphincter of Oddi，SO）运动的影响。方法 将成年杂种犬麻醉后，暴露并游离胆总管中段，不全梗阻（PO）组以丝线将胆总管和一直径1mm的导管一同结扎后拔除导管，正常对照（NC）组不结扎胆总管。术后不同时间点获取血液和肝脏的标本分别检测肝功及肝脏的病理变化；术...

附加二氮嗪与1，6-二磷酸果糖心麻痹液对冷保存大鼠心脏能量代谢的作用

关键词: 二氮嗪  1  心脏保存  能量代谢  

目的 观察附加二氮嗪（DZ）与1，6-二磷酸果糖（FDP）心麻痹液对冷保存大鼠心肌能量代谢的作用。方法 42只SD大鼠随机分为4组，正常对照组6只；其余各组每组12只，分别为STH组（单纯St．Thomas Ⅱ号液），DF组（St．Thomas Ⅱ号液＋DZ50μmol／L＋FDP5mmol／L），DF＋5-HD组（St．Thomas Ⅱ号液＋DZS0μmol／L＋FDP5mmol／L＋5-羟基葵酸盐100μmol...

重组人SMAC及SMAC-PTD的制备

关键词: smac  蛋白转导域  凋亡  

目的 制备重组人SMAC及SMAC-PTD。方法 经RT-PCR从人HeLa细胞中扩增人野生型SMAC及SMAC-PTD cDNA，分别构建于原核表达质粒pET28a（＋），测序正确后，将重组质粒转化大肠杆菌BL21（DE3），IPTG诱导表达，Ni^2＋-NTA层析纯化，SDS-PAGE和Western blot鉴定目的蛋白。结果 RT-PCR扩增分别得到编码人SMAC及SMAC-PTD cDN断，测序结果正确，重组蛋白...

PTTG1基因上调表达对A549细胞增殖和凋亡的影响

关键词: 垂体瘤转化基因1  真核表达载体  a549细胞  增殖  凋亡  

目的 研究人垂体瘤转化基因1（human pituitary tumor transforming gene 1，PTTG1）上调表达对肺腺癌细胞株（A549）增殖和凋亡的影响。方法 构建含PTTG1基因的真核表达载体，脂质体法转染A549细胞并用G418筛选出高表达的阳性克隆株，实时荧光定量PCR（real-time fluorescent quantitation PCR）和免疫细胞化学（immunocytochemical assay．ICA...

腺病毒介导CTLA4Ig对舍格伦综合征小鼠涎腺分泌功能的影响

关键词: 舍格伦综合征  

目的 检测CTLA4Ig-重组腺病毒载体（Ad-CTLA4Ig）在小鼠舍格伦综合征中的治疗作用。方法 采用完全弗氏佐剂＋同种鼠颌下腺抗原激发诱导小鼠舍格伦综合征。实验组在激发后2h予以Ad-CTLA4Ig腹腔注射，对照组激发后注射胸腺肽。比较各组动物颌下腺形态学改变，每周饮水量、静态唾液总流率的变化。结果 CTLA4Ig-重组腺病毒实验组颌下腺病理学改变不...

周期性牵张诱导逼尿肌细胞高表达Cx43的实验研究

关键词: 周期性牵张  逼尿肌  cx43  

目的 探讨周期性牵张对膀胱逼尿肌细胞表达连接蛋白43（Connexin43，Cx43）的诱导作用。方法 运用牵张膀胱逼尿肌细胞体外模型，给予逼尿肌细胞周期性20％拉伸度的牵张，持续6h；采用Western blotting、RT-PCR在蛋白和mRNA水平测定逼尿肌细胞Cx43表达。结果 正常对照组Cx43表达量为（11．3775±0．4251），Cx43mRNA相对表达量为（0.4233±0．1875...

关于修回稿件附软盘的说明

钙调神经磷酸酶在逼尿肌肥大发生中的作用研究

关键词: 钙调神经磷酸酶  亚型  逼尿肌  肥大  

目的 观察钙调神经磷酸酶（CaN）催化亚单位α、β、γ（CnAα、CnAβ、CnAγ）3种亚型在肥大逼尿肌的表达变化，探讨其在逼尿肌肥大发生中的作用。方法 选用10周龄雌性Wistar大鼠实行膀胱出口部分梗阻手术。手术分别于2、4、6周取下大鼠膀胱。以RT-PCR检测3种亚型mRNA表达，Western blot测定亚型蛋白表达量的变化。肥大标志物肌球蛋白重链（MHC）表达...

急性尿潴留大鼠膀胱组织黄嘌呤氧化还原酶活性变化及其意义

关键词: 急性尿潴留  逼尿肌不稳定  黄嘌呤氧化还原酶  丙二醛  活性氧  

目的 探讨在急性尿潴留时大鼠膀胱组织黄嘌呤氧化还原酶（xanthine oxidoreductase，XOD）活性变化的意义。方法 以2倍于正常膀胱容量充盈膀胱2h建立大鼠急性尿潴留模型。分别于充盈2h及排空后1、2、3、4h检测膀胱功能及膀胱组织中XOD活性及脂质过氧化产物丙二醛（malondialdehyde，MDA）含量；并观察超氧化物歧化酶（supemxide dismutase，SOD...