PI3K/Akt信号与吴茱萸碱抑制人结肠癌细胞增殖的关系研究

陈振华 任春美 万仁圣 潘月 伍秋香 袁霜雪 王东旭 黄军 何百成 孙文娟 大学药学院药理学教研室 重庆市生物化学与分子药理学重点实验室 重庆400016

关键词:吴茱萸碱 细胞增殖 结肠癌 细胞凋亡 

摘要:目的研究吴茱萸碱(Evodiamine,Evo)对结肠癌LoVo细胞增殖的抑制作用及可能的分子机制。方法采用结晶紫染色分析Evo(0、0.5、1、2、4 μmol/L)对LoVo细胞的增殖抑制作用;应用流式细胞术分析Evo(0、0.5、1、2 μmol/L)对LoVo细胞凋亡的促进作用;Western blot法分析Evo(0、0.5、1 μmol/L)对LoVo细胞中增殖细胞核抗原(proliferating cell nuclear antigen, PCNA)及 Caspase-3蛋白表达水平的影响;利用缺氧诱导因子-1α(hypoxia inducible factor 1-alpha, HIF-1α)荧光素酶报告质粒检测Evo(0、0.5、1、2 μmol/L)对HIF-1α转录活性的影响。采用Western blot法分析Evo(0、0.5、1、2 μmol/L)对LoVo细胞中HIF-1α、Akt1/2和磷酸化Akt1/2蛋白水平的影响。结果与对照组相比,Evo明显抑制LoVo细胞增殖,下调PCNA蛋白水平,促进LoVo细胞凋亡;报告质粒统计结果显示,Evo呈浓度依赖性降低HIF-1α荧光素酶报告质粒活性(Evo为0.5 μmol/L时,P〈0.05;Evo为1 μmol/L或2 μmol/L时,P〈0.01);Western blot检测结果显示,Evo能够明显降低HIF-1α蛋白水平,下调Akt1/2磷酸化水平。结论Evo能够抑制LoVo细胞增殖并促进凋亡,其机制可能与Evo下调HIF-1α蛋白表达,抑制PI3K/Akt信号转导相关。

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第三军医大学学报

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