三氟拉嗪与八肋游仆虫中心蛋白N端半分子的结合及对蛋白功能的影响

叶旭文; 张文龙; 王志军; 赵亚琴; 杨斌盛 山西大学分子科学研究所; 化学生物学与分子工程教育部重点实验室; 太原030006

关键词:三氟拉嗪 光谱分析 

摘要:采用荧光光谱、圆二色光谱(CD)、等温滴定量热分析(ITC)、电泳及分子对接等分析技术,研究了三氟拉嗪(TFP)与八肋游仆虫中心蛋白N端半分子(apoN-EoCen)的结合,考察了TFP对apoN-EoCen性质的影响.结果表明,在室温下10 mmol/L Hepes缓冲溶液(pH=7.4)中,TFP与apoN-EoCen以摩尔比1∶1结合于apoN-EoCen的第二个EF-手的E,F螺旋之间,条件结合常数约为10^3L/mol;TFP的结合导致蛋白质二级结构发生改变,α螺旋含量减小,Tb^3+敏化荧光强度降低83%,apoN-EoCen切割DNA的类核酸酶活性明显受到抑制;Tb^3+仍可占据复合物apoN-EoCen-TFP中蛋白质的2个金属离子结合位置,条件结合常数约为7.0×10^5L/mol,TFP的结合不抑制金属离子诱导的蛋白质聚集.

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