关键词:脊髓钳夹伤
摘要:目的探讨IL-17参与脊髓损伤后免疫炎症反应的作用机制,在细胞因子水平为临床治疗脊髓损伤提供新的靶点。方法雄性C57BL/6小鼠随机分为4组:模型组制作小鼠脊髓钳夹模型,假手术组只剪开硬脊膜不伤及脊髓,IL-17中和抗体组在脊髓钳夹1 h即刻尾静脉给予IL-17中和抗体,溶剂对照组在脊髓钳夹1 h尾静脉给予0.01μmol/L无菌PBS。小鼠后肢的行为学评分(mouse scale for locomotion,BMS)观察各组小鼠1~7 d后肢行为学变化,免疫组织化学技术观察各组小鼠脊髓损伤第7天脊髓Neu N神经元的形态学变化,实时荧光定量PCR检测脊髓损伤区第7天IL-1β、IL-6、TNF-αm RNA的表达变化。结果小鼠脊髓损伤后,行为学检测结果显示:假手术组小鼠BMS评分1~7 d均为9分,模型组、IL-17中和抗体组、溶剂对照组小鼠脊髓损伤第1天BMS评分为0分,随着时间的延长,各组小鼠的后肢运动功能均有改善,且IL-17中和抗体组小鼠后肢运动功能改善情况呈优于假手术组以外其他各组趋势。免疫组织化学染色显示:脊髓损伤后第7天,假手术组脊髓灰质内可见大量结构完整的Neu N染色阳性细胞;模型组和溶剂对照组小鼠脊髓灰质中,Neu N染色阳性细胞明显皱缩、突起消失,大量Neu N神经元呈细胞空泡状,数量大幅度减少;IL-17中和抗体组可见部分神经元细胞形态正常,具有完整的Neu N神经元胞体和分支的突触,且Neu N神经元染色阳性细胞数量回升。脊髓损伤后第7天实时荧光定量PCR显示:与假手术组相比,模型组、PBS溶剂对照组IL-1βm RNA显著升高(P〈0.01);与模型组、PBS溶剂组相比,IL-17中和抗体组IL-1βm RNA明显下降(P〈0.05);与假手术组相比,模型组TNF-αm RNA显著升高(P〈0.01);与假手术组相比,PBS溶剂对照组TNF-αm RNA明显升高(P〈0.05);与模型组相比,IL-17中和抗体组TNF-αm RNA表达明显下降(P〈0.05);IL-17中和抗体组IL-6 m RNA水
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