时间:2022-10-27 17:13:38
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中图分类号:G623.5 文献标志码:A 文章编号:1674-9324(2013)23-0089-02
《数学课程标准》指出:教师是学生学习的组织者、合作者和引导者。数学知识是人类文明的重要组成部分,是人类千百年来智慧的结晶。人类浩瀚的知识之河,决定人类的学习离不开接受,决定学生学习离不开教师引导。有效发挥教师在课堂教学中的引导作用,能唤起学生的积极思维,激发他们的求知欲望,能诱发他们全身心地投入学习。因此,教师要根据不同的教学内容,选择恰当的教学手段和方法,做到既激发学生的学习兴趣,又促使自主参与学习得到提高,从而达到提高课堂教学质量,进而使教学活动更精彩。
一、培养迁移能力,“导”在以旧引新
巴甫洛夫指出:“任何一个新的问题的解决都是利用主体经验中已有的旧工具实现的。”数学知识前后联系紧密,逻辑性强,新的数学知识往往是旧知识的延伸或发展。教学时,必须注意新旧知识的联系,引导学生从已有的旧知识出发,瞄准知识的“生长点”“膨化处”,为引进新知搭桥铺路,形成正迁移。因此,教学中重视新知识的铺垫工作,注重孕伏,这既是构建良好认知结构的必要前提,也是提高学生学习的自信心和迁移能力的重要方法。学生一旦能够运用已有认知结构通过迁移去获取新的知识,就能掌握了“举一反三”“触类旁通”的本领。这样将会极大地激励学生学习的积极性。例如:在教学“乘法交换律”这一概念时,通过复习加法交换律,再列出几组每一个因数与另一个因数互换位置的式题让学生计算并找出规律,这时学生就自然而然地获取“乘法交换律”这一规律。这样通过类比迁移出新概念。
二、浓厚学习氛围,“导”在设疑激趣
兴趣是最好的老师,是入门的向导,是学生探索知识的直接动力。心理学家鲁宾斯坦说过:“思维通常开始于疑问或问题,开始于矛盾。”课堂教学中教师要巧设疑难,让学生在争论、辨析中激活思维,激发兴趣,培养学生质疑、解疑的能力。如:在教学三角形的内角和时,我首先组织了一次别开生面的师生“竞猜”活动:要求每个学生在练习本上用直尺画一个三角形。量得每一个角的度数,写在图上。然后,依次由学生报出自己所画的三角形的两个内角的度数,看谁能很快猜出第三个角的度数。结果每次老师都脱口而出。这时学生心想,老师既没有量,甚至连我画的三角形都没有看见,怎么就知道第三个角的度数呢?这里边一定有什么奥妙呢?好奇心促使他们迫不及待地要知道老师的“妙法”,这时,老师顺势引导,让学生讨论、交流,尝试解决问题。
三、培养自主能力,“导”在学法提示
《数学课程标准》强调:“要重视引导学生自主探索,培养学生自主学习能力。”学生是学习的主人,在教学中应千方百计地引导他们主动地参与到各种学习活动中去。让学生自己去看书、去思考、去发现问题、分析问题、解决问题。从而掌握自学方法,探索知识的规律。因此,教学中要有目的、有意识、有计划地指导学生在学习过程中领悟相应的学习方法,使他们逐步由“学会”到“会学”,不断提高自主学习能力。在课堂教学中,常用“导学提纲”引路,提示自学方法和重点。让学生学会根据“导学提纲”提示的问题、要求、方法、步骤去自学:做到一看(看课本,包括插图),二理(理思路),三找(找难点),四抓(抓重点),五想(想疑点)。例如:教学“倍数问题”,这样拟定以下“导学提纲”:(1)看例题,想谁是1倍数?(2)用已学过的方法解答。(3)看解题的过程,想解决问题的步骤关键是什么?(4)你还能根据什么的数量关系列出别的算式?学生通过看,弄清了思路;通过想,找出了解题的关键是利用1倍数、倍数、几倍数之间的数量关系列式;通过做,掌握解决这类问题的“思维模式”和方法。使学生的思维能力得到了发展。用“导学提纲”引路,指导学生自学方法是一个慢长的过程,要经历从教师拟定“导学提纲”、师生共同拟定“导学提纲”,到最后由学生自己独立自学课本这三个阶段。同时在拟导学提纲时必须注意:(1)符合学生的认识水平。(2)符合新教材的知识结构。(3)符合数学学科特点。从而培养了学生的自主学习能力。
自从参加工作以来,我首先在师德上严格要求自己,要做一个合格的人民教师!认真学习和领会党的十六大精神和“三个代表”重要思想,与时俱进,爱岗敬业,为人师表,热爱学生,尊重学生,争取让每个学生都能享受到最好的教育,都能有不同程度的发展。
基于以上认识,我在工作上兢兢业业,不敢有丝毫马虎,备好每一节课,上好每一堂课,批好每一份作业,教育好每一个学生,努力去做一个深受学生尊重和信赖的老师。
一、做一个科研型教师
教师的从教之日,正是重新学习之时。新时代要求教师具备的不只是操作技巧,还要有直面新情况、分析新问题、解决新矛盾的本领。在学校领导的指引下,我积极投身于学校教科研,被学校聘为教科员,协助教科室开展教学研究工作。在朱玉棣老师的指点下,成功申请了市级课题《综合实践活动设计模式的研究》,由我执笔撰写了《东莱中心小学综合实践活动课程方案》,我的活动方案《奔向二00八》也被选送苏州。2003年4月,在学校领导和市教研室傅强老师的指导下,综合实践活动课题组研讨活动在我校顺利开展,并取得听课老师的一致好评。去年4月,我参加了全国首届智慧学术研讨活动,论文《大成智慧学与教育信息化》获准大会交流,并入选学术研讨会论文集,现被张家港市智慧研究所聘为研究员,参与了国家级课题《智慧学理论在教育中应用研究》方案的撰写。
二、做一个富有爱心的教师
爱学生,就必须善于走进学生的情感世界,就必须把学生当作朋友,去感受他们的喜怒哀乐。爱学生,要以尊重和依赖为前提,要做做到严中有爱、严中有章、严中有信、严中有度。我经常从小处着手,从学生关心的事寻求最佳教育时机,给学生春风沐浴般的教育。我的工作随笔《教育,从尊重学生的个性开始》《实施“心情教育”培养健康心理》《一瓶钢笔水引起的思考》《再富也不能富孩子》在张家港日报《家庭教育》月刊上相继发表。其次,我和家长也积极共同探讨教育孩子的方法,使家长的教育更具理性。我的实践《别开生面的家长会》在《关心下一代周报》上发表,并在该社当年上半年好稿件评选中获二等奖。我的思考《家庭教育中的素质教育》在张家港日报《家庭教育》月刊刊登。
三、做一个理念新的教师
目前,新一轮的基础教育改革已经在张家港市全面推开,在认真学习新课程理念的基础上,结合自己所教的学科,积极探索有效的教学方法。在数学课上,我把数学知识与学生的生活相结合,为学生创设一个富有生活气息的学习情境,同时注重学生的探究发现,引导学生在学习中学会合作交流,提高学习能力。在信息技术课上,我一改以往教师演示、学生模仿的传统教学方式,在学生中开展探究式学习,使学生的知识来源不只是老师,更多的是来自对书本的理解和与同伴的交流,促使学生在学习中学会学习。我在实践的同时,也不忘时刻反思自己的教学行为。教学设计《展现变化规律 激发主动发现》在市小学数学教学案例论文评比中获一等奖,论文《小学数学教学探例》《“圆柱的认识”教学案例对比分析》《中小学信息技术课堂教学初探》《小学信息技术文字处理单元教学设计》《论新课程标准下的信息技术教育》《当教学设计面对新课标》相继发表。2002年12月,在市小学信息技术教师基本功竞赛中获一等奖。
四、做一个信息时代的教师
1、打造一流商业银行,关键是要树立精品服务的观念
商业银行作为“窗口”服务单位,服务质量的好坏,直接关系着银行的生存和发展。完善服务功能、提升服务水平既是商业银行赢得市场竞争力的关键,也是商业银行落实科学发展观要求、打造现代精品银行的重要举措。
2、打造一流商业银行,关键是努力营造和谐的内外部发展环境
在营造和谐的外部发展环境方面,要密切银政关系,牢记地方银行宗旨,全力服务于地方经济。合理增加信贷资金投入,通过积极支持城市基础设施和重点项目建设,大力促进县域经济繁荣发展,推动全市经济社会又好又快发展,用实际行动赢得政府的重视和信任。
3、打造一流商业银行,关键是科学规划发展目标加快做大做强商业银行步伐
科学发展观的第一要义是发展。科学发展观要求的发展,是好中求快、又好又快的发展,是速度与结构、质量、效益相统一的发展,是长期、稳定、协调、可持续的发展。
二、以客户为本,提高全员对服务工作的重要性认识与服务质量的差异对客户忠诚度的影响。
1.以客户为本,提高全员对服务工作的重要性认识
近年来,我行为客户的服务已逐步从单一片面走向整体、全局,并进一步向多元、一体化发展,为我行的各项业务发展起到了极大的促进作用。但面临金融业面临的挑战和加强银行同业竞争力的需要,我行的服务工作还存在一些欠缺,服务流程大多停留在内部管理和柜台服务上,服务还不够规范,并缺乏活力,以客户为中心的理念还没有真正落到实处。在银行业竞争日益激烈的今天,如何向客户提供真正的个性化服务和规范化服务,如何在瞬息万变的市场中留住老客户、争取新客户,已成为我们服务工作中必须面对的问题。对此,我们首先要认识到客户资源将是未来市场竞争至关重要的资源,目前和今后很长一段时间内,市场激烈竞争使得许多金融产品的品质区别越来越小,产品的同质化倾向越来越强,已很难找出差异,更难分出高低,因而要转向争取客户,进入以客户为中心的服务,将服务作为发展和稳定客户、增强客户忠诚度和依存度的重要手段。
2.服务质量的差异对客户忠诚度的影响
顾客忠诚度是银行获利能力的决定性因素。近**年来,国际银行业的发展证明,顾客忠诚度对利润的影响较市场份额更为举足轻重。忠诚顾客的多少在很大程度上决定了市场份额的“质量”顾客满意度的提高能促进顾客忠诚度的提高。顾客的忠诚源于他们对银行的满意。银行只有令顾客满意,才能获得顾客忠诚,减少顾客流失。顾客满意度是顾客对其质量和预期质量进行主观比较的结果。
三、构建企业服务文化的方法、手段与如何做到以心换得心,以情换得情。
随着国内金融市场进一步放开,银行业改革逐步深化,在对服务业要求越来越高的今天,如何赢得客户的青睐和口碑,各家商业银行法宝使尽,可归根到底都离不开“服务”二字。在长期的经营管理中,商业银行深刻认识到,现代商业银行盈利能力的强弱,取决于银行为客户创造价值的能力大小,即客户的满意度和忠诚度;要真正做好服务工作,首先要把浅层的服务礼仪,升华为深层的服务文化,惟有文化才能使企业生生不息。坚持完善服务措施、健全制度建设。近年来,制定实施了一系列文明优质服务规章制度,明确了服务标准、操作规程和评价体系,初步形成激励约束机制;规定了开展服务的工作方法和具体措施,规范了处理客户投诉的工作程序。上述规章制度的建立,统一了服务程序,规范了员工操作行为,明确了服务评价标准,促进了文明优质服务的规范化、标准化。
四、在构建企业文化中如何提升员工服务素质与支撑员工真情服务客户的源动力。
全面提升营业厅服务形象,由内而外的提升营业厅服务品质,课程从四个方面出发:
1.端正一线服务人员的服务态度与服务意识,了解服务的价值与意义
2.掌握标准的服务礼仪与标准的服务礼貌用语
3.学习与客户沟通的技巧、很多一线的投诉是由于沟通不畅造成的
4.投诉处理的基本方法及面对不同客户需求时的应对方式。
五、对提升银行服务工作的建议,服务是一项具有长期性的系统工程,作为县支行,如何丰富服务内涵,让客户有宾至如归的感受。
我们要将服务作为全行的基础性工作和战略性任务来抓,以“三个代表”重要思想为指导,以人为本,以满足为客户、企业提供个性化、简便的金融服务为准则,以客户的“满意度”为标尺来进行,不断提升服务水平和服务艺术,追求超值服务,提升服务档次,形成系统服务的品牌,逐步实现由“银行的服务”向“服务的银行”转变,以客户满意度最大化为目标,塑造我行良好的现代商业银行形象。
1.是要把规章制度的执行做真做实。规章制度的执行是提高优质文明服务的基础,要把规章制度的执行做真做实,就必须在实际工作中把规章制度传达到位、落实到位、执行到位,要确保办理的每一笔业务严格按照规章制度,业务流程操作。
2.是要把业务技能的学习做深做久。业务技能是办好每一笔业务的基础,是决定客户等待时间长短的主要因素之一。所以每一位员工必须在业务技能的学习上要做到不断更新,坚持长久,持之以恒。
如何跨越整合理念、技术以及策略的高门槛,并在新课程教学实践中,不断开拓创新,实现有效整合与高效整合,真正惠及各学科的教育教学,促进信息化背景下师生的同步发展,我校在整合理念、技术应用以及资源建设等方面引进了概念图这一先进的工具。
概念图是上世纪60年代美国康奈儿大学诺瓦克教授等人,根据奥苏贝尔学习理论提出的一种教学工具和思维工具。在西方国家,概念图在中小学教学中运用非常普遍,有着很好的教学效果。目前随着建构主义、认知主义学习理论的发展,尤其是以Inspiration为代表的,一批功能强大的概念图绘制软件的普及与推广,概念图的时代特征更为明显,在教育教学领域的运用更加广泛,它不仅可以用来评价学习,建构知识,进行头脑风暴,合作交流,促进意义学习,还可以用来进行网络课程开发、信息化教学设计及整合教学课件制作等,作为指导师生整合教学的实用性工具化平台的价值日益显现。
概念的界定
概念图是一种用节点代表概念、连线表示概念间相互关系的图示方法,是一种崭新的教学工具和思维工具。“以概念图为支架的整合教学”是指以概念图基础理论为指导,以概念图应用软件为基础性整合平台,并可实现与信息化媒体资源,以及Blog、Moodle等信息化专家平台多元整合的教学形式。
理论与实践基础
主要理论基础是认知主义学习理论和建构主义学习理论以及信息技术和脑科学现论。
研究的主要内容
(一)运用概念图提升整合教学能力的师训研究
课题组从概念图在整合教学中的应用实践出发,通过报告、示范、展示、研讨、评优竞赛与网络研习等活动,结合自我反思、同伴互助与专家引领等行动研究,进行有针对性的培训;并辅助以考核、激励等策略,点面结合,分层递进,整体提升教师运用现代教育技术的能力。
(二)概念图在整合教学中的应用策略研究
深化概念图的理论研究,从教与学两方面梳理概念图与教学的内在联系,发掘并拓展概念图在整合教学环境中的功能与应用方式。按学科分类下设11个二级子课题,通过概念图在不同学段与不同学科中的运用,探索和形成可推而广之的应用策略,指导和优化以概念图为支架的整合教学实践。
(三)概念图在整合教学中应用模式的建构
以概念图软件Inspiration为整合教学实践的基础平台,积极探索这一软件与信息化教学资源的整合方式,同时重点研究概念图Inspiration与Blog、Moodle等信息化专家平台的有效融合。
研究的主要成果
(一)探索并总结了概念图及其软件Inspiration在教学中的六大应用功能
鉴于概念图绘制软件Inspiration良好的易用性和功能性,课题组在深入实践的基础上,结合教与学中的各种典型案例,提出并总结出了概念图及其软件Inspiration在整合教学中的六大功能:知识可视化的表征功能、高级思维的发展功能、合作交流的媒介功能、促进教学的评价功能、一体化的教学设计与课件开发功能,以及构建网络课程的设计功能等。
传统的概念图通常是用手工绘制的,只要有纸和笔,即可绘出教学需要的各种概念图。随着课题研究的推进,目前手绘概念图已逐步成为师生常态的思维工具与研习策略。实践表明:师生共绘概念图不仅仅可以促进教,而且同样可以有效地促进学,它既可以充当教的平台,也可以作为学的工具;既可以建构知识与思维路径,也可以同步发展认知与思维能力。
以概念图为支架的整合教学实践表明:作为一款集整合技术、功能、理念与应用策略为一体的信息化专家平台,概念图Inspiration软件的推广与普及,能够有效促进信息化背景下师生的快速成长,符合教育信息化建设与发展的现实需求。
(二)总结并提出了概念图及其软件Inspiration与课程整合的两大操作策略
策略一:“放眼网络、内外整合”的信息化教育资源建构策略
课题组积极地引导教师把目光投向网络,重点依托互联网免费性、共享性资源,以及学科软件平台,提升信息化资源建构的针对性和实用性,引导把教师有限的时间放在资源的合理选择,以及与课程的有效整合的设计上,从而极大地解放了教师的劳动,有力保证了整合教学的质量和效益。
如生物教学中引入的Flasteethwise,不仅可以帮助学生通过互动探究认识牙齿、组装牙齿,而且还可以练习如何正确刷牙等,很有趣味性;如在数学图形教学中引入的七巧板Java动画资源软件,可以让学生自主选择多样化的造型,尝试各种拼接技巧,同时还提供涂色美化的功能,学生非常喜欢;再如在物理光的色散教学中引入的Shockwave动画资源,不仅可以定性地比照各种色光透过棱镜后的偏折情况,而且还提供了偏折角度的测量工具,帮助学生进行定量研究;他们在弥补学生直接经验和生活体验不足的同时,也丰富了教学互动过程,有力支撑了新课标各学科的教与学。
策略二:多元教育信息化专家平台整合策略。
同概念图软件Inspiration一样,博客、魔灯以及一些学科类的教育软件,功能强大且简单易学,是实实在在的教育信息化专家平台。但是这些平台往往各具优势与不足,多元教育信息化专家平台整合策略旨在通过以概念图为支架的多元平台整合,取长补短,弥补概念图单一平台在整合教学中可能存在的功能不足,拓展优化概念图的资源开发功能、网络互动功能与课程开发功能。
(三)基于Inspiration等信息化专家平台与课程整合的模式初步形成
本课题组在探索与实践的过程中,并没有一味地纠缠于空泛的理念、策略以及纯粹的技术培训与灌输,而是独辟蹊径,通过引入技术零障碍,但又饱涵当今先进教育理念与策略的概念图Inspiration、博客Blog、摩灯Moodle等信息化专家平台,帮助广大一线教师又一次快速成功地跨越了整合技术、理念以及策略的“高门槛”。
Blog具有很好的互动特征,但由于本身技术的限制,它的页面结构和呈现方式,则明显逊色于Inspiration的表现。鉴于此,课题组在网络教学实践中成功引入整合策略,实现了Inspiration和Blog两个零障碍专家平台的优势互补。借助于Inspiration与Blog的课外整合,有效打破了时空等因素的制约,实现了隐性课堂显性化,封闭课堂网络化,静态课堂动态化,交互形式多样化,教师同行之间也可以通过网络课件与Blog进行深度研习和交流反思,有效推进教师网络教研共同体建设,促进教师隐性知识显性化,最大限度地提升课堂教学的共享度。
相对于Blog而言,Moodle在教育教学领域则显得更为专业,功能也更为强大。不仅在信息管理方面支持的类型更为丰富,而且最为突出的是,互动形式不再仅仅是简单的回复,还可以是投票、讨论、测验、评价、问卷调查等,既可以很好地满足网络课堂教学的需要,又可以在远程网络教学与管理方面游刃有余。而且概念图Inspiration与Moodle的整合也有利于改变Moodle课程界面过于线性化、单一化的不足,课题组相信随着教育信息化建设的持续推进,Inspiration 和 Moodle 与网络教学的整合可能会成为一个新的亮点,值得期待。
当然随着整合教学的发展和需要,网络互动平台也会不完全局限于Blog和Moodle,教学中教师们可以结合整合的理念加以发展和充实,但是就现阶段而言,这两个平台应该是当下乃至今后较长一段时间内的网络互动平台的首选,因为它们既不需要额外的经费,也没有高难度的技术培训,但是确功能强大,非常适合整合教学的现实需要。
(四)以概念图为支架的整合教学师训策略与模式日趋完善
课题研究与发展的过程,也就是教师培训与发展的过程,在启动阶段,课题组主要围绕与概念图有关的理论专题研习、技术培训展开工作。整理了《概念图参考文献专辑》,涉及国内外核心期刊发表的数十篇文章,供教师学习参考,有效更新了教师的教育理念,深化了对概念图理论的认识和理解,学校每学期均组织2次以上的专题学习,有效推进了以概念图为支架的整合教学逐步走向深入。
在手术室进行术前准备时,发现患者呼知不应,触摸颈动脉没有搏动,呼吸停止,血压测不出。立即行胸外心脏按压,同时给予气管插管,手控挤压呼吸囊。静注1mg肾上腺素。快速输注晶体液,2U浓缩红细胞,静输多巴胺和间羟胺。2分钟后心肺复苏成功,心率116次/分,呼吸25次/分,血氧87%。马上进行手术,加压输入浓缩红细胞,接呼吸机,使用安氟醚、芬太尼、维库溴铵行全身麻醉,使患者处于浅麻醉状态。开腹后发现肠系膜破裂,肠破裂,先结扎出血的血管再行肠破裂修补术。术中继续抗休克治疗,给予生理盐水2000毫升,羟乙基淀粉130 1500毫升,浓缩红细胞1600毫升,氟美松20毫克,碳酸氢钠200毫升。术中维持血压95/60mmHg,心率89次/分,血氧饱和度100%。手术顺利,历时1.5小时。术毕患者自主呼吸恢复后带气管导管送麻醉恢复室。约1小时后患者清醒,拔除气管导管送回病房。
术后第1天回访,患者输注1000毫升血浆及1000毫升浓缩红细胞后,血压100/60mmHg,心率76次/分,血氧饱和度98%,呼吸18次/分。血红蛋白89g/l。无麻醉并发症。10天后患者痊愈出院。
讨论 该患者怀疑脏器破裂,出血性休克,在手术前突然出现心脏骤停,研究表明:4分钟内开展初期复苏,8分钟内后期复苏,病人存活率为43%;8-16分钟内开始后期复苏,存活率仅为10%;8-12分钟内开始初期复苏,存活率为6%。[1]该患者心肺复苏成功,不仅没有出现任何脏器功能障碍,而且患者术后生活质量没有任何影响。能有此结果,完全得益于抢救及时,心跳和呼吸只停止2分钟,“时间就是生命”在此患者身上得到充分的体现。该患者因为伤及大血管出血迅猛,这种情况下行胸外心脏按压,必须保证给予充足的液体,尤其血液供给。胸外心脏按压,称之为胸腔泵的机制,按压主要引起胸内压力增高,胸内动脉,静脉,以及胸腔外的动脉压亦相应增高,但周围静脉压力仍然是低的,从而形成周围动静脉的压力梯度,使血液自动脉流向静脉,形成回流。[3]如果血管里没有血液,那么心脏按压是徒劳的,必须补足液体量。对情况紧急的大失血病人,只有手术止血才能挽救生命者,需在休克状态下手术,此时不宜过多强调术前准备,与家属做好充分的沟通,要在手术的同时继续抗休克治疗。绝大部分全麻药都有或轻或重的抑制循环功能,因此全麻维持期间,由于休克病人不能耐受深麻醉,全麻药物的用量应减少,维持在浅麻醉水平,借助肌松药的作用,以满足手术要求。[1、2]
参考文献:
二、调查的具体目标、调查对象及操作方式
本次对我校高年级学生,语文学科喜欢程度性别差异的调查,目的是通过对我校高年级学生对语文学科的学习态度、情感、行为进行调查,了解我校高年级学生对语文学科喜欢程度的真实情况,找到形成学生差异性的原因,为今后语文教师更有效地提高学生学习语文的兴趣,让每个学生都学好语文学科提供有效的依据。
(一)具体目标:
1、小学高年级学生对语文学科喜欢程度的性别差异。
2、小学高年级学生对语文学科喜欢程度性别差异形成的原因及对策。
(二)调查方法
此次调查采用了问卷调查和访谈法。
1、问卷内容涵盖学习情感、学习态度、学习行为三个方面,问卷共出题20个,对其中16个小题进行了赋值,每个小题三个答案,分为三级水平,一级为5分,二级为3分,三级为1分,共计80分。共发出问卷489份,最后收回480份。(问卷略)
2、座谈会采用个案调查、整体调查,共召开八次教师座谈,八次学生座谈,这些座谈会不仅为我们提供了大量生动的典型材料,而且为理性分析提供了基础。
(三)用一学期语文期末考试成绩做语文学科成绩与性别的相关分析。
三、问卷结果分析
1、学生对语文学科的情感:调查显示,学习语文学科给学生带来的愉悦感,小学高年级男同学明显不如女生。女生有73%的学生对语文学科的有关训练能够很感兴趣,有强烈的愿望,愿意学习,能够达到很喜欢,而男生只有45%的学生达到一级水平,还有4%的男生为三级水平,他们对语文学科的有关训练不喜欢,是被动的。
2、学生对语文学科的学习态度;调查结果表明,在对语文的学习态度上,男女生差异更大。从一级水平来看,男生达到一级水平的为37.7%,而女生一级水平则为80.3%,女生对语文学科的学习热情高,作业做到认真,上课积极回答问题,并经常补充课外知识,,值得注意的是男生14.9%的学生为三级水平,他们对语文学科的学习有更多的无奈,没有积极性、主动性,害怕语文学习的男生占相当份额,而女生却没有三级水平。
3、学生对语文学科的学习行为;调查结果显示,在语文学科采取的行为上,男女生也有明显的差异,男生达到一级水平的为59.6%,而女生则为69.3%,有5.55%的男生为三级水平,而女生仍旧没有三级水平。一部分男生由于没有良好的预习、复习、作业习惯,对于语文有关知识的学习就不能较好地掌握,不能顺利地、按质按量地完成相应的作业,甚至有时会在无奈的情况下抄袭别人的作业,长此以往,这些男生对语文学科的学习则会慢慢产生厌烦的心理。
四、对调查结果的思考:
通过此次调查结果分析,发现小学高年级学生对语文学科的喜欢程度有明显的性别差异,即男生明显不如女生喜欢需文学科,其成因有以下几点:
1、男女生性格差异是造成部分男生语文知识掌握不牢固,从而影响学生学习语文的兴趣的原因之一。男同学喜欢灵活多变、动手能力强的作业,而对于抄写、读、识记等类型的作业则不喜欢做,从而造成他们在低年级的识字过程中,对知识掌握不牢固而落伍,也就给今后的语文学习造成了一定的障碍。
2、教师教学方式的滞后,也是造成学生不喜欢语文学科的原因之一。活动好动是儿童的儿童天性,他们喜欢玩、喜欢笑,男同学更是喜欢生动有趣的课堂,开放而有乐趣的作业,可语文教师却还一味地站在讲台上,无休止地讲解着,学生被动地接受着填鸭给的知识,一遍又一遍低抄写着枯燥无味的生词,他们觉得语文课是一个乏味的课堂,因此,他们失去了学习语文的兴趣,对语文学科的学习更多的是逃避。
3、教学内容离学生生活较远,不易理解,使学生不愿意学习语文。教材内容离学生生活较远,学生理解起来很困难,使学生们学起来很困难,尤其是男生,反应更加强烈,在学生座谈中反映突出。久而久之,男同学,也就失去了对语文学科的学习兴趣。
五、办法与对策:
1、要求教师要努力学习教育学、心理学的有关知识,了解儿童心理特征及性别差异,从而达到所选用的教学方法遵循教育规律,提高教学效果。
2、要求教师要努力进行教育教学改革,采用灵活多样的教学方法,激发学生的学习兴趣,培养学生良好的学习习惯,努力创设良好的自主学习情境,尊重学生个体差异,鼓励学生选择适合自己的学习方式,让学生真正成为学习的主人。
3、要求教师加强教学理论的学习与研究,提高自己的理论水平,从而更好地指导自己的教学。
4、加强对教师的教育,让教师摆脱过去形成的被动性,扭转教师在改革中的消极等待态度,让教师主动参与教学改革。
5、关注男同学中的那部分特殊学生,多关心他们的思想和学习,经常同他们平等交谈,了解其思想上、学习上存在的问题,帮助其分析原因,制定学习计划,鼓励他们“敢想”“敢问”,激发他们学习的兴趣。
6、努力研究语文家庭作业的形式,把自主设计在家庭作业中,让学生根据自己的实际情况选择适合自己的作业形式、数量、实践方法,可以让学生与爸爸、妈妈、同学合作完成;把生活设计在家庭作业里中,用生活丰富家庭作业;把兴趣设计在家庭作业中,如:画一画、坐一坐、颜一烟、查一查等。
关键词:问题解决方法;学习者自主性;行动研究
Abstract
The ultimate aim of action research on learner autonomy is how to help learners to become more autonomous and better in language learning. The article reports an action research on fostering the students’ learner autonomy by using the problem-solving method in the English classroom. Through a questionnaire survey, an interview and theclassroom observations, it is found that the students’ strategies such as task-awareness, attribution, input and output, motivation, analysis and deduction, self-belief, motivation and self-concept are quite strong, but their risk-orientation, self-awareness, asking questions, self-monitor, self-evaluation, self-monitor, reinforcement and co-operation are quite weak. It is also found that society; cultural psychology, language competence, teaching management and language learning materials influence the students’ learner autonomy. In order to foster the students’ learner autonomy, a series of class scaffolding activities are designed and used in the English classroom for one and half a year according to Howard Gardner’s theory and Dr. Bilash’s Success-based Language Instruction Model. The major results show that the students’ learner autonomy is greatly improved and their language knowledge and skills are enhanced.
Keywords: problem-solving method, learner autonomy, action research
1. 引言
外语教学的成功与否不只是一个教的问题,在很大程度上取决于学生的学习态度和方法
。近年来,外语教学研究的发展趋势从客体转移到了主体,人们越来越重视学习者在外语学 习中的主观能动性和创造性。学习者在语言学习过程中的积极主动作用已得到母语习得研究 和外语学习研究的证实。在贯彻“以人为本”和“终生教育”理论的大背景下,我国越来越多的 外语教育工作者意识到培养“学习者自主性”(learner autonomy)的重要性。此外,不少研究 表明,由于受传统教育模式的影响,我国许多学生自主学习能力较差。因此,如何促进外语 学习者自主性以提高外语教学质量,已经成为了国内外外语教育界研究的热点,也是今后外 语教学的新趋势。
在国外,著名学者Benson(2001:111)围绕两个关键问题,即“与学习者自主性有关的实 践是如何促进学习者自主和如何提高语言学习的?”,把促进学习者自主性的方法归纳为以 下六种:第一种是基于学习材料的方法(resource-based approaches);第二种是基于教育技术 的方法(technology-based approaches);第三种是基于学习者的方法(learner-based approaches)
;第四种是 基于课堂的 方法 (classroom-based approaches) ; 第五种是基 于课程的方 法 (curriculum-based approaches);第六种是基于教师的方法(teacher-based approaches)。他同时 指出,到目前为止,许多与学习者自主性有关的研究大多基于反思和推理,很少有基于对数 据的系统分析的研究。因此,基于数据的行动研究是以后研究的重点。
国内学者对“学习者自主性”的讨论始于20世纪80年代中后期(徐锦芬等,2004),所 有学者都肯定了培养“学习者自主性”在英语教学中的积极意义,并从不同角度探讨了自主学 习能力的培养途径。目前,国内对“学习者自主性”的研究主要介绍国外的有关理论知识,只 有一些研究者如:王笃勤(2002)、徐锦芬等(2004)开始探讨一些教学模式,并进行实证研 究。何晓东(2004)认为,今后关于外语“学习者自主性”(LA)的研究应过渡到以实证研 究为主,同时,应紧密结合国内大学英语教学的实际开展研究、讨论。综观国内外学者的研
究成果发现,对如何促进“学习者自主性”的方法和手段主要有:大纲和课程设置、课堂教学
、外语学习环境、专门的策略培训、自主学习中心、多媒体辅助教学、远程教学等。 许多研究表明,“学习者自主性”与学习策略密切相关。“问题解决”是学习策略的一种形
式,是近年来国际教育界发展起来的一种教学方法和教育思想。“问题解决”要求教师为学生 创造具体环境,启发和激发学生独立提出探索性及求证性问题,形成多向思维的意识,寻找 在不同的条件下的多种解决问题的途径,探索可能出现的多种答案。因此,“问题解决”是培 养和发展学生创造性思维能力的重要教学方法和教育思想。
那么,学生在课堂学习英语的过程中,遇到什么问题呢?任课教师如何发现这些问题 并找出解决这些问题的办法呢?本文采用行动研究方法在英语课堂教学中探索学生英语学 习过程中遇到的问题以及解决问题的办法,目的是促进外语学生的“学习者自主性”,最终的 目的就是大幅度地提高英语教学质量。
行动研究法是一种适应小范围内教育改革的探索性的研究方法,是针对教育活动和教 育实践中的问题,在行动研究中不断地探索、改进和解决教育实际问题。行动研究将改革行 动与研究工作相结合,与教育实践的具体改革行动紧密相连。行动研究法产生以来,人们除 了公认行动研究法是一种扩展的螺旋式结构外,对于实施的具体步骤提出了各自不同的看法
,本人主要采用六步骤模式。六步骤模式具体步骤为:预诊——收集资料初步研究——拟定 总体计划——制定具体计划——行动——总结评价。
1、预诊:这一阶段的任务是发现问题。对学校工作中的问题,进行反思发现问题,并 根据实际情况进行诊断,得出行动改变的最初设想。在各步骤中,预诊占有十分重要的地位
。
2、收集资料初步研究:这一阶段成立由教研人员、教师和教育行政人员组成的研究小 组对问题进行初步讨论和研究,查找解决问题的有关理论、文献,充分占有资料,参与研究 的人员共同讨论,听取各方意见,以便为总体计划的拟定做好诊断性评价。
3、拟定总体计划:这是最初设想的一个系统化计划。行动研究法是一个动态的开放系 统,所以总体计划是可以修订更改的。
4、制定具体计划:这是实现总体计划的具体措施,它以实际问题解决的需要为前提, 有了它,才会导致旨在改变现状的干预行动的出现。
5、行动:是整个研究工作成败的关键。这一阶段的特点是边执行、边评价、边修改。 在实施计划的行动中,注意收集每一步行动的反馈信息,可行的,则可以进入下一步计划和 行动。反之,则总体计划甚至基本设想都可能需要作出调整或修改。这里行动的目的,不是 为了检验某一设想或计划,而是为了解决实际问题。
6、总结评价:这是对整个研究工作的总结和评价。这一阶段除了要对研究中获得的数 据、资料进行科学处理,得到研究所需要的结论外,还应对产生这一课题的实际问题作出解 释和评价。
从上述行动研究法的六个步骤中可以发现三个明显的特征:一是具有动态性,所有的 设想、计划,都处于一个开放的动态系统中,都是可修改的;二是较强的联合性与参与性, 研究者、教师、行政人员的全体小组成员参与行动研究法实施的全过程。三是在整个研究过 程中,诊断性评价、形成性评价、总结性评价贯穿于行动研究法工作流程的始终。
2. 研究方法
2.1 研究背景
南宁师范高等专科学校2006级英语教育专业三个班级共91名学生,课程为《综合英语 课》,行动环境为实际课堂教学,使用的教材为高等教育出版社出版的《综合英语教程》第 一、二册。执行者为本人。项目时间:2006年9月至2008年1月。
2.2 预诊
在2006年秋季学期初的课堂教学实践中发现学生虽然对综合英语教学很感兴趣,但是绝 大部分学生不能主动地预习和复习功课,不主动参与教师组织的课堂活动,不能按时提交作 业且正确率很低,没有什么学习计划,合作学习的能力差。根据学生的表现提出了一下假设
:绝大部分学生自主学习能力差。 为了验证提出的假设,本研究采取问卷调查、访问与课堂观察相结合的方法。问卷调
查和访问使用了张立新和李霄翔(2004)设计调查问卷和问题,抽样调查了26名学生。通过 问卷调查、访问和课堂观察,试图发现本项目研究者所教的学生在哪些方面自主能力欠缺, 哪些方面较强,发现其中的原因。课堂观察主要观察学生的学习表现,包括语言表现、对提 问的反应、参与活动的积极程度、课堂讨论的情况等等。
表1问卷调查结果(按照均值从小到大排列)
对问卷调查结果进行分析,得出以下结论:
(1)整体能力较强项 学生在以下几方面较强(接近或超过4分):任务评价、归因、输入输出、分析推理等、自
我信念、动机,自我信念,自我效能。
(2)整体能力较弱项 从问卷调查的数据来看,学生在以下几方面有待加强(低于3分):冒险,自主意识,提问
,自我监察,自我评价,加强,合作。
(3)课堂观察和访问结果 为了探索以上问卷调查初步发现的自主能力差异的原因,我们进行了课堂观察和访问
,结果发现,社会、文化心理、语言能力、教学管理等因素会影响自主学习能力。
(4)确认问题:大部分学生自主学习能力差的主要原因之一是受社会、文化心理、语言 能力、教学管理、语言学习材料等因素的影响,学生的学习策略没有得到全面均衡发展。
2.3 拟定总体计划
为了提高学生的自主学习能力,项目研究者基于美国学者霍华德 加德纳(Howard Gardner)博士的多元智能理论和加拿大Bilash博士的“成功语言教学模式”,并根据英语教育 专业的特点,从备课、可理解性语言输入、语言吸收和巩固、语言的输出、形成性评价和终 结性评价等五个方面,按照由浅入深、循序渐进的原则,根据学生的实际情况,分级设计了 一系列的旨在提高学生自主学习能力的课堂活动,吸引学生积极参与,培养学生合作学习的 能力,使每个学生都有成就感。
2.4 制定具体行动计划
第一步:建立个人档案,通过个人档案获得学生信息和对学生做出评价已经成为重要 的趋势。教师通过观察学生学习过程,了解每个学生的学习特点、学习风格及其策略和方法 等情况,不断调整教学方法。同时,学生在其档案中可以进行比较,了解自身发展的进程。 为了了解和掌握所教班级学生的英语水平、英语学习经历,项目研究者参照《多语和多元文 化的欧洲》(1997-2000)和《欧洲语言档案手册》(European Language Portfolio-Junior version)
,制定了每个学生的个人档案,主要包括语言通行证(Language Passport),语言传记(Language Biography),和语言档案(Language Dossier),主要用于让学生自我了解各阶段学习情况 和记录学生语言技能发展,供下一阶段学习或教学参考。
第二步:根据学生的英语水平和Gardner的多元智能理论,项目研究者分四个等级(初 级:elementary, 中下级:lower intermediate, 中级:intermediate和高级:advanced)设计了语 言文字智能(Linguistic intelligence )、数学逻辑智能(Logical-Mathematical intelligence)、视觉 空间智能(Spatial intelligence)、身体运动智能( Bodily-Kinesthetic intelligence)、音乐旋律智能
( Musical intelligence )、人际关系智能( Interpersonal intelligence)和自我认知智能(Intrapersonal intelligence)等七大类的课堂教学活动, 如:Getting to know one another, Biographical, Bingo, Idioms, Noticing, Roll the dice,A fun reading comprehension activity,English songs, Teaching
activities, Dictation activities, Spring festival, The year of 12 animal signs, Jigsaw reading activities, Self-study in the computer center, Matching pairs activities, Home reading and retell
activities,Posters, Advertisements等。每个具体的课堂活动都有一系列的步骤构成。
第三步:在课堂教学过程中,交替实施具体的七大类课堂活动,使学生从教师完全控 制逐步向学生自主地完成所有的课堂活动过渡,最终实现学生完全自主的完成任务。
3. 结论与讨论
我们运用以下几种方法收集经过三个学期的行动研究教学效果,并得出以下结论:
3.1 个人档案
通过分析所教班级学生的三个学期的个人档案,得出以下结论:第一、从学生语言通 行证中的学习进步表格的填写上看,有44%的学生听、说、读、写等水平从A1-Grade 2 升到
B1-Grade 8, 有31%的学生听、说、读、写等水平从A1-Grade 1 升到B1-Grade 7, 有25%的学 生听、说、读、写等水平从A1-Grade 3 升到B1-Grade 9。这些数据表明,经过三个学期的课 堂教学活动,绝大多数学生的英语水平得到了很大的提高。第二、从学生语言通行证中的学 生跨文化的经历看,大多数学生从原来的不敢、不愿意与外国人面对面、E-mail、信件、贺 卡交流等方式交流转变到了愿意、敢与不同文化的外国人进行交流活动。第三、从学生的语 言传记来看,大多数学生的英语学习方式、方法和策略得到了极大的转变,在语言学习方面 的进步也非常显著。第四、从学生的语言档案来看,学生不仅积极参与具体的七大类课堂活 动,而且在课内外都能够组织和运用这些课堂活动,学生的知识面不断扩展。
3.2 课堂学习记录
从课堂学习记录可以看出,从第一个学期的第三周开始,85%以上的同学能按时预习和 复习功课,并积极参与老师组织的课堂活动,合作学习的能力有了很大的提高,79%的学生 能按时提交作业。
3.3 考试成绩
从三个学期的期末考试成绩看,所教的三个班级综合英语成绩平均分比同级别同类专 业的班级高了7分。
3.4 调查问卷
从三个学期问卷调查的数据来看,学生在冒险,自主意识,提问,自我监察,自我评 价,加强,合作等方面得到了加强,自主学习能力得到了进一步强化。
3.5 反馈练习结果
从每次上课后的反馈或反思的练习结果看,87%的学生成绩都达到良好以上,对课堂 活动的评价和任课教师的评价也比较好。
3.6 存在问题
通过收集到的数据,可以看出我们的行动研究方案取得了一定的效果。由于计划周密、 教学设计合理,这在一定程度上激发了学生的语言学习动机和学习兴趣,同时培养了学生自主 学习能力,大部分同学的语言知识和语言技能有了一定程度的提高,专业技能得到了训练和 加强。对教师来说,行动研究中学与教、教与研的互动,提高了教师对教学过程的理解和认识, 进一步提高了教学水平。
但我们也发现了一些问题,如:在“男女授受不亲”思想的影响下,如何使男女学生融入 到同一个课堂活动中?组织小组活动过程中如何监督学生的参与程度?如何检测设计的课 堂活动的难度?仍有 7%左右的同学各方面进步不大,这些同学大都性格内向,语言能力和自 控能力差,大多不愿意参加教师组织的课堂活动,不积极主动完成教师所布置的课内外作业,
如何培养这些同学的自主学习能力等。这些问题为我们下一步的行动研究提供了方向。
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2南阳医学高等专科学校及档案室基本情况
南阳医学高等专科学校位于河南南阳卧龙岗上,是我国医圣张仲景的故里,也是我国三国时期著名军事家诸葛事家诸葛亮的躬耕地。于2004年经国家教育部批准升格为南阳医学高等专科学校,是一所培养医疗、卫生、保健、医药制造及医技的技术型的高职高专院校,主要面向农村、县级医院及各个药品制造企业培养合格使用人才。学校档案室负责收集整理学校各类文书和各类有价值的资料,包括学校上级来文来稿和各处室及附属部门的上报材料及原始资料。
3重视不够,资金投入不足
高职高专院校档案室是高职高专院校的辅助部门,在南阳医学高等专科学校管理中,连学校二级处室也算不上,隶属于学校二级部门校党委办的下辖科室。长期以来得不到相应的重视,更谈不上现代化建设。甚至连对档案室的工作职责、工作内容、工作方法、工作性质等最基本知识都不了解,更谈不上档案室对学校的发展作用的认识有多深。学校领导重视不够,资金投入不足是上述困境的主要原因,在此情况下,档案室信息化建设举步维艰:截至目前,南阳医学高等专科学校档案室各类档案集中在一个屋子里,无论是分门别类还是通风防潮等各方面均不合格;管理上还停留在上世纪八十年代手工登录,虽然才建设自动化管理,仅仅是单机自建电子表格形式管理,连一个自动化管理软件也没有,特别是在上级来检查财务工作时,财务档案中的凭证查找真如大海捞针,费时费工,严重影响工作效率。这些都严重影响了高职高专院校档案信息化建设进程。不切实际,信息化建设不科学科学性是高职高专院校培养人才的最基本要求,所以科学性应贯穿于学校的各项工作中,就是高职高专院校的档案室建设也应遵循科学性,保证档案室建设的科学、合理、远见等要求,保证档案室建设50年不落后。南阳医学高等专科学校档案室建设之处没有征询学校各部门,特别是校两办的意见,没有根据实际工作需要进行可行性报告,最终导致目前档案室位置偏僻、空间狭小、管理落后、信息不畅等困境。馆藏内容匮乏,信息化资源结构残缺作为高职高专院校历史资料的收藏家,档案室理应在科学的管理体系下,按照规范、科学的架构体系下,对高职高专院校发生的各项业务和开展的各项工作进行全面、完整、系统、规则地记录和保存,从而保证对高职高专院校历史的还原。南阳医学高等专科学校档案室由于种种原因,致使档案管理体制和管理机制不科学,档案信息收集不全,各年度还有零散于部门间,特别是一些教学宝贵资料流落于各系,随着各系领导班子的更替,个别教学档案资料丢失时有发生。目前南阳医学高等专科学校档案室红头文件较多,财务档案资料齐全,教学文件、学生管理文件、重点建设档案、科学研究资料等专门档案较少;传统纸质档案多,现代电子档案少;原始档案多,加工整理的档案少,这些严重影响了档案信息化建设步伐。
Effect of Astragalus membranaceus on proliferation and migration of vascular smooth muscle cells induced by high glucose
GAO Hui-juan JIANG Hai-hong
Department of Endocrinology,Daqing Oilfield General Hospital;
Abstract:Objective To investigate the role of Astragalus in the proliferation and migration of vascular smooth muscle cells (VSMCs)induced by high glucose and its mechanism.Methods VSMCs were randomly divided into control group (normal culture),high glucose group(25 mmol·L-1D-glucose),experimental group (25 mmol·L-1 D-glucose+40μg·mL-1 astragalus),transfection group 1 (transfection of negative control oligonucleotide+25 mmol·L-1 D-glucose+40μg·mL-1 astragalus),transfection group 2 (transfected with miR-18a-5p mimic+25 mmol·L-1D-glucose+40μg·mL-1 astragalus).Cell counting kit-8 (CCK-8) assay was used to detect cell proliferation;scratch assay was used to detect cell migration;real-time quantitative reverse transcription polymerase chain reaction(qRT-PCR)analysis was used to detect the expression of miR-18a-5p;Western blot was used to detect mitochondrial fusion protein 2 (MFN2) protein expression.Results The inhibition rates of VSMCs proliferation in control group,high glucose group and experimental group were (100.00±10.00)%,(188.24±18.17)%and (123.52±12.66)%,respectively;the migration rates of VSMCs were (15.16±1.64)%,(53.63±5.27)%and (34.46±3.58)%,respectively;the expressions of miR-18a-5p were 1.03±0.09,1.63±0.15 and 1.36±0.02,respectively;MFN2 protein expression were 1.05±0.12,0.34±0.07 and0.73±0.09.For the above data,there was statistically significant difference between control group and high glucose group,between high glucose group and experimental group (all P<0.05).In addition,the expression of MFN2protein in transfection group 1 and transfection group 2 groups were 0.69±0.08 and 0.43±0.06,and the difference was statistically significant (P<0.05).Conclusion Astragalus inhibits high-glucose induced proliferation and migration of VSMCs by regulating the miR-18a-5p/MFN2 axis.
Keyword:Astragalus; microRNA-18a-5p; mitochondrial fusion protein 2; high glucose; vascular smooth muscle cells; proliferation;
糖尿病患者常见的并发症是血管病变,这也是造成患者死亡或残疾的重要因素[1]。成人血管平滑肌细胞(VSMCs)主要是维持血管收缩并调控血管管腔直径,以此调节血压的血流分布。在持续高糖状态下,可促进细胞增殖和迁移,迁移至血管内膜的VSMCs使血管内膜增厚、官腔狭窄,从而导致动脉粥样硬化的病变[2]。黄芪具有益气活血、利水消肿的功效,对高血压伴水肿、心肌缺血及糖尿病均有良好的治疗效果[3]。本文旨在研究黄芪对高糖诱导VSMCs增殖和迁移的影响,并分析其作用机制。
材料与方法
1 材料
细胞人VSMCs,购自美国模式菌种收集中心。
药品与试剂黄芪注射液,规格:每支10 mL(相当于原药材20 g),批号:180527B2,批准文号:国药准字Z13020999,购自神威药业集团有限公司。细胞计数试剂盒(CCK-8),购自上海碧云天有限公司;胎牛血清和DMEM培养基,均购自美国Gibco公司;实时定量反转录聚合酶链反应(qRT-PCR)试剂盒,购自美国Applied biosystems公司;聚氰基丙烯酸正丁酯(BCA)蛋白试剂盒,购自美国Thermo Fisher公司;抗线粒体融合蛋白2 (MFN2)抗体、抗β肌动蛋白(β-actin)抗体及蛋白质印迹检测试剂盒,均购自英国Abcam公司。
仪器ABI7500实时PCR仪,购自美国Applied Biosystems公司;Multiskan FC酶标仪,购自美国Thermo Fisher scientific公司;BX53荧光显微镜,购自日本Olympus公司。
2 实验方法
2.1 细胞培养
细胞放置于含10%胎牛血清的培养基中,并在37℃、5%CO2的培养箱中培养,培养24 h后,收集细胞用于实验。
2.2 细胞转染前分组及干预[4]
取对数生长期的细胞随机分为对照组、高糖组和实验组。对照组不用药物处理,高糖组用25 mmol·L-1的葡萄糖刺激24 h,实验组先用40μg·m L-1的黄芪孵育2 h再用25 mmol·L-1的葡萄糖刺激24 h,然后收集各组细胞进行后续实验。
2.3 细胞转染及转染后分组
按照参考文献[5]方法,将阴性对照寡核苷酸和miR-18a-5p模拟物分别转染至细胞中,随后使用40μg·m L-1黄芪及25 mmol·L-1葡萄糖处理,分别命名为第1转染组、第2转染组。
2.4 以CCK-8法检测VSMCs的增殖[6]
将各组VSMCs细胞接种于96孔板中,设置阴性对照组和空白对照组,待细胞贴壁后,加入黄芪进行处理。与细胞共培养48,72 h后,每孔加入CCK-8试剂10μL,并放置于37℃恒温培养箱中,继续培养4 h,之后使用酶标仪检测波长为450 nm处的光密度(OD)值。细胞存活率为实验组与对照组OD值的比值。
2.5 以划痕实验检测VSMCs的迁移情况[7]
细胞处理24 h后,用胰蛋白酶消化细胞,在6孔培养板背面每隔0.5 cm处画线,分别向每孔加入5×105个细胞,培养过夜,用移液器枪头垂直划痕,PBS溶液冲洗划下的细胞,置于37℃、5%CO2环境下培养,在0,24 h取样拍照,用Image J软件测量记录划痕宽度的变化。细胞迁移率(%)=(0 h划痕宽度-24 h划痕宽度)/0 h划痕宽度×100%。
2.6 以实时定量反转录聚合酶链反应(qRT-PCR)法检测miR-18a-5p的表达[8]
用Trizol试剂从培养的细胞中提取总RNA,根据说明书,使用第一链cDNA合成试剂盒(日本Takara)进行反转录以合成第一链cDNA。通过实时Qprusing SYBR预混料Ex-Taq试剂盒(日本Takara)检测基因表达。从MicroRNA RT-qPCR试剂盒中得知miR-18a-5p和U6引物,以GAPDH作为内参,用2-CT法计算相对表达量。miR-18a-5p引物序列为上游:5'-ACCGACCTTGAGGCATACTT-3',下游:5'-GC-1CTACAGCCTCCTAGTACA-3';GAPDH引物为上游:5'CGACCACTTTGTCAAGCTCA 3',下游:5'AGGGGTCTACATGGCAACTG 3'。反应条件:95℃进行预变性10 min,95℃进行变性20 s,60℃进行退火30 s,循环40次。每组分别设置5个复孔。
2.7 以蛋白质印迹(Western blot)法检测抗线粒体融合蛋白2(MFN2)蛋白的表达[9]
取对数生长期VSMCs细胞以2×106个/瓶接种于培养皿中,培养至传代时,使用预冷的PBS洗涤3次,向每组加入RIPA裂解液150μL,对细胞进行均匀吹打,放置于4℃摇床上进行裂解15 min,之后将细胞刮下,经超声振荡离心后提取总蛋白,用BCA蛋白测定试剂盒进行定量,对上样缓冲液均匀混合后,取蛋白40μg进行上样后,经5%浓缩胶和10%的分离胶进行SDS-PAGE电泳(1.5 h,250 m A),于室温下封闭1 h。加入一抗抗体(1∶2 000),经TBST冲洗3次后,加入HRP标记的羊抗兔IgG二抗(1∶5 000),室温下孵育1.5 h,进行ECL显影。用目的蛋白条带和内参的比值表示目的蛋白水平。
3 统计学处理
用spss 22.0软件进行统计分析。数据用表示,多组间比较用单因素方差分析,组间有差异使用LSD t检验进行两两比较。
结果
1黄芪对VSMCs增殖、存活和迁移的影响
与对照组比较,高糖组VSMCs细胞增殖能力、存活率和迁移能力显著增加,差异有统计学意义(P<0.01);与高糖组相比,实验组VSMCs增殖能力、存活率和迁移能力显著降低,差异有统计学意义(P<0.05,P<0.01),见表1。
2黄芪对miR-18a-5p表达水平的影响
对照组,高糖组和实验组miR-18a-5p的相对表达量分别为1.03±0.09,1.63±0.15和1.36±0.02。与对照组相比,高糖组中miR-18a-5p表达显著升高,差异有统计学意义(P<0.01);与高糖组相比,实验组miR-18a-5p表达显著降低,差异有统计学意义(P<0.05)。
3 各组MFN2蛋白表达的比较
Western blot结果显示,对照组,高糖组和实验组MFN2蛋白相对表达水平为1.05±0.12,0.34±0.07和0.73±0.09。对照组和高糖组相比,高糖组和实验组相比,差异有统计学意义(P<0.01和P<0.05)。此外,第1转染组和第2转染组中MFN2蛋白的表达量为0.69±0.08和0.43±0.06,差异有统计学意义(P<0.05)。结果见图1。
讨论
近来研究表明,糖尿病及其血管并发症等疾病正威胁着人类的健康,因此改善此类疾病的发生及减轻疾病的症状对筛选和评价针对此类疾病的药物有着非常重要的意义[10]。
血管平滑肌细胞在调节血管功能、维持体内稳态环境起着重要的作用,血管平滑肌细胞的增殖与迁移是糖尿病心血管并发症如动脉粥样硬化及术后再狭窄的关键因素之一[11]。高糖作为糖尿病和高糖血症的独立的最直接的病因,影响着血管平滑肌细胞的功能[12]。VSMCs是血管壁的主要组成部分,病理状态下,VSMCs异常增殖可致动脉粥样硬化,因此,抑制VSMCs增殖和迁移是心血管疾病治疗的重点。
本研究显示,黄芪可显著降低高糖诱导的VSMCs增殖和迁移。进一步研究发现,黄芪可降低VSMCs中miR-18a-5p的表达从而上调MFN2的表达。
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[9]晁荣,胡晓燕,朱生东,等.苦参碱联合化疗药物对人急性髓系白血病HL-60细胞增殖及侵袭力的影响[J].世界中医药,2019,14(11):2910-2913.
专题1、实验动物比较、相关标准研究领域
研究目标:对常用啮齿类实验动物进行比较研究并建立数据库;制定填补国内空白的若干实验动物地方标准;凡涉及本专题项目需将有关研究成果纳入*实验动物资源中心统一管理。
研究内容:
1、对常用大、小鼠、豚鼠和地鼠进行比较生物学和比较医学系统研究,提出各自在生物医学等主要研究领域应用和回避的依据、选择原则、运用方法;
2、对常用实验动物组织器官超微形态学结构进行比较研究并建立数据库;
3、建立兔、犬、猴心血管和心电图数据库并进行分析评价;
4、制定实验用羊标准、啮齿类实验动物垫料标准,大、小鼠运输标准(鼓励多家单位联合申报)。
进度要求:年9月30日前完成
专题2、实验动物新技术的建立及应用研究
研究目标:建立若干种实验动物质量检测、遗传工程和保种育种新技术;建立斑马鱼主要脏器三维电子图像。
研究内容:
1、从病原学、血清学以及分子生物学领域研究实验动物中支原体、泰泽氏菌、螺杆菌、CAR杆菌的特性,确立先进、可靠的检测方法;
2、以DNA和RNA各一种病毒的主要抗原基因进行真核表达,结合单克隆抗体技术建立诊断技术平台,提升实验动物质量控制水平;
3、选择4-6个品系作为供体和受体,构建2-5个染色体替换的小鼠新品系,初步建立PCR-LDR小鼠基因分型技术平台;
4、建立新的小鼠内源基因修饰技术,实现对小鼠内源基因的即时可逆调节,提高小鼠遗传操作的效率,完善小鼠遗传操作生物技术平台的建设;
5、在组织学研究的基础上,采用IT技术初步建立斑马鱼的某种三维电子脏器;
6、建立大鼠体外授精技术、冷冻技术、辅助体外受精技术(人工授精、ICSI);
7、建立2-4种实验动物人工哺乳和无菌技术,并培育2-4种无菌动物。
进度要求:年9月30日前完成
专题3、动物模型及其效果评价体系的建立与应用研究
研究目标:建立若干种人类重要疾病的动物模型,并要求对每一种模型建立效果评价体系;凡涉及本专题项目需将有关研究成果纳入*实验动物资源中心统一管理。
研究内容:
1、建立若干种人类重要疾病的动物模型,重点建立不育大鼠模型、大、小鼠脑卒中模型、前列腺疾病模型、小型猪腹壁拉链模型、原位大肠癌模型等,并要求对以上模型建立效果评价体系;
2、建立和完善肿瘤高转移动物模型筛选技术。
进度要求:年9月30日前完成
二、申请方式
1)本指南公开。凡符合课题制要求、有意承担研究任务的法人、自然人均可以从“*科技”网站上进入“在线受理科研计划项目课题可行性方案”,并下载相关表格《*市科学技术委员会科研计划项目课题可行性方案(*版)》,按照要求认真填写。书面可行性报告要求同时附上相应的知识产权状况查新报告。鼓励多家单位联合申报,实行资源共享,并在申请材料中明确各自承担的工作和职责,并附上合作协议或合同。
2)课题责任人年龄不限。鼓励通过课题培养优秀的中青年学术骨干。作为课题责任人和主要科研人员,不得同期参与承担的863、973、国家科技攻关和*市重大、重点科研课题数超过三项。
3)每一课题的申请人可以提出不超过2名的拟回避自己课题评审的同行专家名单(名单可以随课题可行性方案一同提交)。
4)本专项课题的申请起始日年7月4日,截止日期为年7月25日。课题申报时需提交书面可行性方案一式8份,并通过“*科技”网站提交可行性方案和所有表格。书面可行性方案集中受理时间为*年7月21日至7月25日,每个工作日上午9:00—下午4:30。所有书面文件请采用A4纸双面印刷,普通纸质材料作为封面,不采用胶圈、文件夹等带有突出棱边的装订方式。
5)网上填报备注:
1)登陆“*科技”网,进入网上办事专栏;
2)点击《科研计划项目课题可行性方案》受理并进入申报页面:
-【初次填写】转入申报指南页面,点击"专题名称"中相应的指南专题后开始申报项目(需要设置“项目名称”、“依托单位”、“登录密码”);