时间:2023-03-08 15:40:48
导言:作为写作爱好者,不可错过为您精心挑选的10篇营养管理论文,它们将为您的写作提供全新的视角,我们衷心期待您的阅读,并希望这些内容能为您提供灵感和参考。
StudyoftheexpressionofTNF-α,oxygenfreeradicalandtheeffectsofearly
enteralnutritioninterventioninratswithsereveburninjury
LIZhihua1,LIXiangnong2
(1.DepartmentofBurnsandPlasticSurgery,AffiliatedHospitalofXuzhouMedicalCollege,Xuzhou,
Jiangsu221002,China;2.DepartmentofGeneralSurgery,AffiliatedHospitalofXuzhouMedicalCollege)
Abstract:ObjectiveToinvestigatetheeffectofenteralfeedingatearlystageontheexpressionofTNF-αandoxygenfreeradical(OFR)andtheprotectiveeffectsontheorganism,soastoprovidetheexperimentalbasisofclinicaltherapyofenteralfeedinginpatientswithsevereburns.MethodsThesevereburnmodelwasestablishedwithWistarrats.BurnedWistarratswererandomlydevidedintofastinggroup(n=10)andearlyenteralnutritiongroup(n=10)tocomparewiththecontrolgroup(n=10).Theratsinthefastinggroupandearlynutritiongroupweregivenintraperitonealinjectionofbalanceliquidandgastricclysisofnourishmentproductrespectively,30mlevery6hwithin48hafterburninjury.Subsequently,theratswereallowedaccesstofoodadlibitumuntil7thdayandthemortalitiesofthethreegroupswerecalculated.TheexpressionofbloodTNF-αandOFRofthethreegroupsat6,12,24,48,72handon7dweredetected.ThefibroblastsinthewoundwereobservedundertheelectronmicroscopeandthedenaturalizationofhepatocyteswasobservedbyH-Estainingunderthelightmicroscope.ResultsThemortalityoffastinggroup,earlynutritiongroupandcontrolgroupwas80%,30%and0,paredwiththecontrolgroup,thelevelofTNF-αandmalonaldehyde(MDA)obviouslyascended,whilethelevelofsuperoxidedismutase(SOD)obviouslydescendedinthefastinggroup(P<0.05).Comparedwiththefastinggroup,thelevelofTNF-αandMDAdescended,whileSODlevelobviouslyascendedinearlynutritiongroup(P<0.05).Theultrastructureoffibroblastcellsinthewoundofearlyenteralnutritiongroupwaslessseverelydamagedthaninthefastinggroup,accompaniedbyvisibleapoptoticfibroblasts.Thedegreeofhepaticsteatosisintheearlyenteralnutritiongroupwaslowerthaninthefastinggroup.ConclusionEarlyenteralnourishmentcouldreducetheexpressionofTNF-αandOFRonthewhole,andhelphealthelocalwoundsrelieveinjuriestotheviscera.
Keywords:burn;oxygenfreeradical;tumornecrosisfactor-α;entericnutrition
本实验应用重度烧伤大鼠模型,探讨早期肠内营养对肿瘤坏死因子α(TNF-α)表达和氧自由基产生的影响以及早期肠内营养对重度烧伤机体的保护作用,为临床重度烧伤患者的早期肠内营养(EN)治疗提供理论依据。
1材料和方法
1.1实验动物及试剂Wistar大鼠30只,雌雄不拘,体重(220±20)g,购于徐州医学院实验动物中心。大鼠饲养于恒温(22~25℃)、恒湿的SPF(specificpathogenfreecondition)层流罩中,经高压灭菌的标准饲料和水供动物自由饮食。动物实验根据NIH实验动物的护理和使用指导说明实施。
主要试剂包括TNF-αELASA试剂盒(北京帮定泰克公司),超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)试剂盒(南京建成生物工程研究所)。主要仪器及设备有普通光学显微镜(Olympus公司)、TGL-16B台式离心机(上海安亭科学仪器厂)、H-600型透射电镜(日立公司)、Spectrumlab22pc型分光光度计(上海棱光技术有限公司)及BIO-RAD550型酶标仪(美国BIO-RAD公司)。
1.2模型制备大鼠术前一天禁食过夜。2.5%戊巴比妥钠35mg/kg腹腔注射麻醉,将大鼠固定于操作板上,8%硫化钠制剂背部脱毛。3%凝固汽油涂抹背部燃烧18s致约30%烧伤体表总面积(TBSA)深Ⅱ度烧伤(病理证实)。拟烧伤面积按下列公式计算:烧伤面积(cm2)=体表面积(cm2)×拟烧伤面积百分比(%),体表面积(cm2)=K×体重(kg)×2/3,K≈0.1)。烧伤后立即予腹腔注射平衡液50ml/kg复苏。更换垫料,单笼饲养。
1.3动物分组及处理将20只烧伤大鼠随机分为禁食组(n=10)及早期肠内营养组(早期营养组,n=10)。禁食组伤后2h开始腹腔注射5%葡萄糖盐液30ml/(kg•次),每6h一次。早期营养组伤后2h开始胃灌注,30ml/(kg•次),每6h一次,所灌注的肠内营养制剂为能全力〔荷兰Nutricia公司产品:4.18×103kJ/L,总热量752.4kJ/(kg•d),非蛋白热量∶氮(NPC∶N)为133∶1〕。上述2组于伤后48h停止腹腔注射平衡液或胃灌注,自由进食。另设未烧伤大鼠10只为对照组,该组于整个实验期间均自由进食。3组共喂养7天,7天后颈椎脱臼法处死取样本。
1.4观察指标
1.4.1大鼠死亡情况记录各组死亡大鼠死亡时间及数量。
1.4.2血清TNF-α及氧自由基检测各组大鼠在伤后6、12、24、48h及7天时内眦静脉取血0.5ml,1000r/min离心5min,取上清,-20℃保存,试剂盒检测。中途死亡大鼠的标本弃之不用。
1.4.3肝组织切片苏木精-伊红染色检查分别于第7天末,肝脏活体取材,利刃楔形切取少许肝组织固定于40g/L甲醛中,石蜡包埋,切片厚4μm,行苏木精-伊红染色,切片经二甲苯脱蜡、梯度乙醇脱水等处理后中性树胶封片,显微镜下观察。
肝脏脂肪变性的严重程度评估:根据肝细胞脂肪变性在肝脏的累及范围将脂肪肝分为轻、中、重度。轻度:光镜下(×400)每视野见1/3~1/2的肝细胞内含有脂滴。中度:每视野见1/2~2/3肝细胞有脂肪变性。重度:每视野2/3以上肝细胞发生脂肪变。
1.4.4创面组织电镜观察动物处死后剪取小块烧伤创面组织放于下置有冰块的蜡板上,其表面滴4℃预冷的3%戊二醛,用双面刀片常规双向切割创面组织成1.0mm×1.0mm×1.0mm大小的组织块;浸入4℃预冷的3%戊二醛固定2h后过夜;然后脱水、包埋、超薄切片,醋酸双氧铀和枸橼酸双重染色。上透射电镜观察,拍照。
1.5统计学处理SPSS11.0统计软件进行数据处理,计量资料以±s表示,组间比较分别用用单因素方差分析(ANOVA)检验、秩和检验和Fisher′s确切概率法。P<0.05认为差异有统计学意义。
2结果
2.1动物模型和动物死亡率动物模型的烧伤面积为(30±1)%TBSA。经病理证实,均为深Ⅱ度烧伤。
对照组大鼠麻醉清醒后活动正常。禁食组及早期营养组均出现较为明显的感染症状,包括创面毁损、出血和脓性分泌物,大鼠的毛发无光泽并且有不同程度的脱落。对照组无死亡,禁食组于制模24h后4例死亡,早期营养组制模24h后1例死亡。7天后禁食组总死亡为8只,早期营养组总死亡为3只。见表1。表1各组大鼠死亡情况
2.2血清TNF-α变化模型制成后6h,禁食组及早期营养组血清TNF-α较对照组明显升高,12h达到高峰,之后开始下降,但第7天时TNF-α水平仍高于制模后6h。早期营养组各时间点TNF-α水平均低于禁食组(P<0.05),且于伤后12h差异最大(P<0.05)。见表2。
2.3血清自由基的检测模型制成后6h,禁食组及早期营养组血清SOD较对照组显著降低,至第7天2组血清SOD水平仍维持在较低水平;禁食组各时间点的SOD水平均显著低于早期肠内营养组(P<0.05)。上述2组血清MDA水平于伤后6h显著升高,至24h达到高峰,随后开始下降;禁食组血清MDA水平在48h、7天时明显高于早期营养组(P<0.05)。见表3、4。表2各组大鼠血清TNF-α水平的变化与对照组比较:*P<0.05;与禁食组比较:#P<0.05表3各组大鼠血清SOD水平的变化与对照组比较:*P<0.05;与禁食组比较:#P<0.05表4各组大鼠血清MDA水平的变化与对照组比较:*P<0.05;与禁食组比较:#P<0.05
2.4肝组织光镜检查见图1。禁食组大多数见广泛且较严重的肝细胞混浊肿胀、胞质疏松、气球样变、嗜酸性变及脂肪变性;部分肝细胞有坏死。肝细胞脂肪变性以小泡性脂肪变为主,主要分布于肝腺泡Ⅲ区和Ⅱ区,严重者脂滴弥散性分布累及肝腺泡Ⅰ区。坏死肝细胞多位于肝小叶中央和中间带,呈桥接样坏死或大块性分布。坏死灶内的肝细胞见核固缩、核碎裂或核溶解,胞质嗜酸性增强或含色素颗粒;坏死灶内或其周围有明显的库普弗细胞增殖,其胞质丰富、嗜碱性,有不同程度的吞噬现象。肝窦内常见数量不等的各类型炎细胞,包括中性白细胞、单核细胞、淋巴细胞及坏死细胞(图1b)。
早期营养组肝细胞也有轻度的混浊肿胀及胞质疏松,肝窦内有少量炎细胞浸润。肝小叶脂肪变性范围较小,表现为散在性或小灶状肝细胞脂肪变性,主要分布于肝腺泡Ⅲ区和Ⅱ区,累及整个小叶者少见。部分肝窦内有散在的坏死细胞(图1c)。
2.5创面组织成纤维细胞电镜观察早期营养组细胞明显肿胀,胞质空淡,核周围间隙增宽,核仁浓缩或边集,并可见核膜内陷,形成核内小管及核内假包涵体。细胞凋亡并可见凋亡小体。常染色质减少,图1各组大鼠肝组织病理检查结果比较
(苏木精-伊红染色,×400)
a.对照组:正常肝组织;b.禁食组:重度脂肪变性;c.早期营养组:轻度脂肪变性
异染色质边集。胞质内空泡形成,溶酶体增多,可见数量不等的圆形、低电子密度的脂肪空泡及肿胀、脱落的微绒毛。线粒体肿胀,嵴缩短、减少或消失,基质透明,甚至空化成囊泡状;少部分线粒体则固缩,基质电子密度增加而均质化。粗面内质网增生、肥大或呈扁囊状、囊泡状扩张;增生的内质网密集成片,形成指纹状结构或围绕着变性的线粒体(图2a)。
禁食组细胞体积增大,胞质疏松化,或胞质空淡;核膜完整,边集。可见粗面内质网代偿性增生、扩张;线粒体轻度肿胀,基质浅淡,嵴模糊;细胞内脂肪空泡体积小,溶酶体、髓样小体数量多(图2b)。
3讨论
3.1烧伤动物模型的特点与死亡率本实验中采用凝固汽油造成的30%TBSA深Ⅱ度烧伤模型,具有以下特点:用创伤单相打击,较好地模拟了临床上全身炎症反应综合征(SIRS)及单相速发多器官功能不全综合征(MODS)的发病过程;器官功能不全发生率高,有一定动物死亡率;重复性好;所用动物大鼠相对价廉易饲养,且检测各项指标的试剂和仪器最齐全。
本实验中禁食组及早期营养组于术后24h均出现较为严重的感染症状,包括创面毁损、出血,大鼠的毛发无光泽并且有不同程度的脱落等。2组大鼠于术后24h相继出现死亡,但早期营养组在24h、48h、7天3个时间点上的死亡数及死亡率均低于禁食组,提示早期肠内营养有利于提高烧伤后生存率。本实验中早期营养组和禁食组的总死亡数(分别为3只和8只)差别较大。
3.2局部创面变化创面愈合过程涉及一系列快速增长的细胞群,这些细胞群一旦完成了修复任务,就必须从创面消除,从而进入愈合过程的下一阶段。文献报道,在创面愈合过程中,生长因子减少或消失,可诱发生长因子依赖的成纤维细胞发生凋亡[1]。
表皮细胞生长因子(EGF)、TNF、前列素(PGE2)等均能促进细胞凋亡[2-3],而这些因子和介质恰恰以较高的含量存在于创面微环境中[3-4]。Desmouliere等[2]利用末端标记技术证实伤口愈合后期,功能活跃的修复细胞以细胞凋亡形式消退,因而使修复细胞数量减少。深Ⅱ度烧伤往往导致真皮的严重损伤,其愈合主要依赖于创面形成肉芽组织支架,并在此基础上借助于创面残存附件上皮及创周表皮的增殖爬行覆盖创面。胶原蛋白和成纤维细胞均为肉芽组织的主要成分;胶原蛋白在创面的沉积主要依靠成纤维细胞的合成与分泌,并主要与成纤维细胞的数量相关。
因此,成纤维细胞凋亡是创面进入愈合期的标志。Darby等[5]报道在创面闭合早期,创面内的肌成纤维细胞就发生凋亡,并且该作用对靶细胞是持续的。本实验中,早期营养组成纤维细胞体积变小,呈现核固缩、染色体沿核膜聚集及胞质减少等退行性变细胞凋亡的表现,并可见凋亡小体;而禁食组成纤维细胞体积增大,胞质疏松化、空淡,核膜完整,边聚。可见早期营养组创面进入愈合期较禁食组早,提示早期营养有促进创面早期愈合的作用。
3.3肝脏病理研究的结果和意义烧伤主要死因是MODS,其发病机制公认为是严重烧伤后过度应激,发生SIRS。肠黏膜正常结构和功能的维持是肠道正常吸收和屏障功能的基础。烧伤时,肠黏膜损伤,通透性增强,导致内毒素、细菌、细胞碎片等刺激肠相关淋巴系统,使肠黏膜成为大量炎性细胞因子的早期释放器官;随着肠黏膜通透性进一步增高,大量内毒素、细菌、细胞碎片进入肝脏,激活肝脏巨噬细胞系统,成为SIRS的主要原因[6-7]。一般认为,微循环障碍、严重感染和肠道细菌与内毒素移位是导致SIRS及MODS的机制[8]。而肝脏作为人体最大的化工厂和血库,在上述3种病理生理改变中起着关键的作用。
本实验试图通过对肝细胞病理变化的观察,从一个侧面了解早期肠内营养对重要器官的干预结果。实验结果显示:早期营养组与禁食组均出现不同程度的肝细胞脂肪变性,但早期营养组脂肪变性程度较禁食组轻,2组间比较差异有统计学意义。这一结果显示:烧伤早期肠内营养的干预可以显著减轻肝脏的病理损害,可能有助于抑制SIRS及MODS的发生作用。
3.4细胞因子和氧自基的变化和意义TNF可刺激外周血多形核白细胞(PMN)生成、释放和趋化反应,并活化产生大量毒性产物损伤组织细胞[9]。TNF对内皮细胞具有直接毒性,如作用于内皮细胞,使其表面成为促凝性致血栓形成;或使内皮细胞分泌递质而使PMN黏附、活化。TNF又可作用于肝细胞抑制白蛋白的生成和促进某些急性期蛋白合成[10]。本实验观察到伤后6h血清TNF即显著增高,至12h达到高峰。虽然随后有所下降,但至7天时仍高于正常值,提示烧伤后有大量TNF产生;其产生机制可能与严重烧伤后发生的体液大量丢失或严重休克造成的组织缺血缺氧、坏死组织的大量产生、某些递质如补体的活化以及应激反应等有关[11],因为这些因素均可激活单核巨噬细胞系统(MPS),从而使TNF大量产生。
3.5早期肠内营养严重烧伤后机体缺血/再灌注损害可生成大量氧自由基,后者可导致血管内皮细胞损害,使毛细血管通透性明显增加[12]。由于肠黏膜上皮细胞富含黄嘌呤氧化酶(xanthineoxidase,XO),当肠黏膜发生缺血/再灌注后,将产生大量来源于黄嘌呤氧化酶系统的氧自由基,后者能攻击生物膜磷脂中的多不饱和脂肪酸(PUFA),形成脂质自由基和脂质过氧化物[13]。本实验中我们观察到早期营养组SOD高于禁食组,而MDA则低于后者,提示早期肠内营养对抑制烧伤患者氧自由基的产生具有积极作用。
在重危感染患者,肠内营养的药理作用大于其营养作用。EN之所以能改变疾病的治疗效果,不仅是由于纠正患者的营养不足,更重要的是通过其异营养素的药理学作用达到治疗目的,如一些营养物质能以某种特定方式刺激免疫功能,恢复免疫反应,调控细胞因子的产生及释放,维护肠道功能,即营养药理(nutritionalpharmacology)或免疫营养(immunonutrition)作用。有研究表明[14]只要提供不低于所需总热量20%的肠内营养就可避免肠道屏障功能的破坏与肠道细菌移位。
本研究结果显示,烧伤后早期肠道营养可降低血中TNF-α和氧自由基水平、促进烧伤创面愈合并减轻内脏器官如肝脏的损伤,其机制尚不完全清楚。推测早期肠内营养有利于烧伤后整体调节和肠道的局部调节,既可以减轻应激、保护肠道黏膜、增加内脏血流量、减轻氧自由基损害,又可调理免疫和代谢,使营养支持更有效。
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1.2人力资源内在要素——质的管理
就人的个体而言,主观能动性是积极性和创造性的基础,而人的思想、心理活动和行为都是人的主观能动性的表现。就人的群体而言,每一个个体的主观能动性,并不一定都能形成群体功能的最佳效应。只有群体在思想观念上一致,在感情上融洽,在行动上协作,才能使群体的功能等于或大于每一个个体功能的总和。对人力资源质的管理,实质上是对人的心理和行为的管理。即采用现代化的科学方法,对人的思想、心理和行为进行有效的管理,充分发挥人的主观能动性,以达到组织目标。总之,现代人力资源的管理就是一个人力资源的获取、整合、保持激励、控制调整及开发的过程。
1.3人力资源管理是保证各种活动顺利进行的必要条件。膳食处的经营活动离不开人与物这两个基本要素,而人是业务经营活动的中心,是决定因素。员工的劳动并非一种孤立的个体劳动,而是一种分工协作的社会劳动。所以,要保证业务经营活动的正常进行,首先必须合理招募员工,并科学安排、处理、调整、考评人与人之间、人与事之间的关系,使之有机地结合起来。而这些正是人力资源管理的基本职能。
1.4人力资源管理是提高素质的前提。在商品经济的条件下,必须努力提高团队的素质,增强团队的活力,而团队的素质归根结底是人的素质。人是有思想、有感情的,其积极性的发挥,不是仅靠发号施令所能做到的,只有采取现代化的科学的管理方法,才能充分激发员工的主观能动性,不断提高员工素质,最大限度地挖掘员工的潜能,这是提高团队素质、增强团队活力的关键所在。
1.5人力资源管理是提高服务质量、创造良好社会效益的保证,其产品是由员工提供的服务,而员工服务的对象又是需要情感的患者,因而其从业人员的心理因素、职业道德等就直接决定了服务质量,进而关系着经营的成败。
因此,充分调动员工的积极性,对人力资源进行科学有效的管理,是提高服务质量、创造良好社会效益的前提和保证。
2人力资源的激励原则
2.1激励是管理的核心问题。古典管理学理论认为,经济因素和物质条件是重要的激励因素,相应的管理方法是严格奖惩;行为科学理论认为,社会因素和心理因素是首要的激励因素,相应的管理方法是“优待员工”。现代科学管理理论将人们的视线转移到“合理利用和开发人力资源”上,认为人的贡献本身就是极有价值的东西,相应的管理方法是内在激励法,使组织目标和任务高度个人内在化,求得最大限度的认可和认同。
2.2运用内在激励与外在激励
(l)内在激励。内在激励来自于人们和任务之间的直接联系,通常是自我运用的、完成工作本身产生的成就感、挑战感和胜任感等等,可以成为某种内在激励因素,对工作本身的兴趣也是一种内在激励因素。
(2)外在激励。外在激励来自于任务外部的工作环境,通常是被某些人而不是被正被激励的人所运用。工资、附加补贴、各种形式的监督是外在激励的因素。
(3)内激与外激相结合的原则。内激侧重于行为前的需要和动机的引导或牵引,以及行为中的指导和支持,而外激则侧重于行为后果的兑现,以及外部环境的治理。相比之下,内激比外激所产生的工作动力更持久,它可以使员工在工作(而非工作环境)中充满兴趣和乐趣,激发起光荣感、自豪感、成就感,发挥其个人最大潜能。因此,在激励工作中,管理人员应坚持以内激为主、外激为辅的原则,使员工外有压力,内有动力。
(4)情感与理性相结合的原则。员工绝大多数是通情达理的。因而,管理人员在激励他们时,应晓之以理,动之以情,坚持理性管理和情感管理相结合、奖罚严明与奖罚适度相结合的原则。
2.3实施绩效考评
一是要开个为学生服务的虽不起眼但很实惠的知识“杂货铺”;
二是要敏而好学,不断学习新知识,增长新本领,把学生摆渡到我们年轻时未曾去过的新文化新学术天地里去。
掐指一算,我在大学中文系已从教35年了。这些年来,特别是1983年我国电影界前辈先生倡导电影理论课进入普通大学课堂以来,我是在按着辛老师的教诲去做的,不避艰辛,不揣浅陋,为首都已在岗的或将上岗的中学语文教师开设了《电影艺术概论》、《电影文学引论》等课程。教学实践使我认识到,影视艺术理论知识、影视文化素养,对高师中文系学生和中学语文教师来说,都是必不可少的。对此若无清醒认识,既不能适应当前基础教育学校由“应试教育”向素质教育转轨的新形势,更不能胜任未来21世纪语文教学现代化的重任。
我们强调语文教师如今必须具有良好的影视艺术修养,主要有以下三个理由:
第一,影视在当今人类社会生活中起着日益重要的作用。
电影自上个世纪90年代中问世,电视从本世纪30年代诞生,在不长的时间里,随着电视机、录相机、VCD机等的普及,随着“家庭影院”在寻常百姓家的“建立”,随着中小学有了可以用电影和电视来配合语文等多门学科教学的成套设备,语文教师必须赶上时代潮流,提高自己对影视艺术的重要社会功能的认识。在人类艺术发展史上,影视是现代化的综合艺术、影像艺术,它们是开放在现代科技之树上的艺术新花,它们利用了人类文明长期积累的成果,因而显示了后来居上的明显优势。我国现在故事片年产量在150部以上,电视剧年产量在10000部(集)以上,是举足轻重的影视生产大国。影视不仅是大众传播艺术,也是文化信息丰富的大众传播媒介,它们的影响不比广播、报刊差。不识字的人,观赏影视的要求往往更为迫切。影视集多种媒介的优点于一身,声图并茂、视听兼顾,具有极强的艺术感染力,能收到雅俗共赏的好效果。再加上大群体或小群体观赏,观众之间相互感染、相互交流,又能进一步强化欣赏效益。影视艺术具有以审美为核心的认识、教育、娱乐、信息等多种社会功能。影视是以生动具体的银屏幕形象来反映社会生活的面貌、本质,人们在观赏影视艺术的过程中,可以得到思想的提高、知识的增长、眼界的开阔和心灵的愉悦,从而受到了以美感为前提的特殊的启迪、教育。
第二,当今的青少年,是在银屏幕前成长的。
他们从学前时期,就接触了影视。他们每天看电视的时间,在2至6小时之间。据马来西亚一个消费者协会的统计,这个国家的儿童每年在学校上课的时间为1040小时,而他们每年平均看电视的时间,竟然多达2000小时,几乎是上课时间的一倍。这说明青少年的精神文化生活中,电视占有非常重要的地位。青少年是一个相对独立的观众层,他们精力充沛,好奇心强,阅历尚浅,可塑性大。在影视欣赏方面,需要教师、家长进行正面引导。否则,一些格调不高的、有害的影视作品,可能对他们产生消极的影响:诸如厌学、吸烟、早恋、比阔、赌博、拜把兄弟、打架斗殴等。结合语文课在中小学进行影视欣赏指导,开设影视艺术讲座、选修课,开展倡优拒劣的影视评论活动,以期端正中小学生的文艺观、人生观,提高他们的影视文化水平,已成为有事业心、责任感的语文教师的燃眉之急。由于当今的中小学生是自幼接触影视的,他们的画面读解能力、蒙太奇思维能力,相对来说较为活跃、发达。近年来有的语文教师进行的看电视、看电影、看录相做作文的实验,适应了教学对象的新特点,取得了可喜的成绩。蒙太奇本是法语montage的音译,原义是构成、装配,是建筑学中的术语,借用到电影学中来,指的是剪辑、组接、组合的意思。简要地说,所谓蒙太奇,就是把电影创作中的零散镜头(画面),按照编导的严密的艺术构思,组接成一个有机的艺术整体、一件完整的银幕作品的结构方法、手段、技巧。蒙太奇是影视艺术再现生活的独特手段、美学基矗语文教师必须锻炼自己的蒙太奇思维,掌握这方面的原理、知识。
Abstract:Actionresearchisakindsystematicretrospectiveprobingactivity.Inthispaper,aseriesofstudieshavebeencarriedoutaimingatthepoorperformanceofEnglishtranslationbycollegestudents,aretrospectionontheinadequateeffectoftheactionresearchhasbeendoneandthedirectionforfutureeffortshasbeenpointedout.
Keywords:actionresearch;translationability;CollegeEnglishTeaching
现行《大学英语教学大纲》明确指出必须“培养学生听、说、写、译的能力”。而对非英语专业学生进行翻译能力培养重要性的问题,国内已有不少专家和学者已著文指出[1,2]。新四级考试题型的改革也增添了翻译题型,我们从中可以看到大学英语教学中翻译能力培养的重要性。但对学完大学英语教材的学生来说,他们的翻译能力不容乐观。笔者所教班级的翻译能力也存在同样的问题,第一学期学生翻译的平均分只有6.019分(总分为15)。笔者一直在思考如何解决学生翻译中存在的问题,终于从近年来非常受到重视的自我反思(selfreflection)教学模式中得到了启发。
一、教学行动研究的原理与过程
行动研究是一种系统的反思性的探究活动[3]。它由教师针对自己教学中的问题直接参与和开展调查与研究,目的是不断改进自己的教学,使教学达到最佳效果,同时解决教学中出现的问题。教学行动研究是一个循环往复的过程,包括计划、行动、观察分析、反思等环节。McNiff(1988)将这种教学行动研究分为五个具体的步骤:第一、发现教学中的一个问题;第二、设想一个解决的办法;第三、在教学中实施这个办法;第四、调查并收集数据对实际效果进行评估;第五、在分析、评价的基础上重新确定教学问题,以便进行下一轮研究[4]。其实行动研究这个概念最早出现在美国,20世纪70年代再一次兴起之后,开始应用于教学理论中。我们注意到尽管目前翻译能力的培养极其重要,而学生的翻译能力也亟待提高,但未见将行动研究运用于培养学生翻译能力上的文献发表。
二、大学英语翻译能力培养的行动研究过程
(一)发现问题并明确问题存在的原因
在教学过程中,笔者发现学生的翻译水平非常低,在学完新视野大学英语第一册之后的期末考试汉译英中(试题由新视野大学英语第一册题库中抽调出来),学生的翻译题成绩平均分只有6.019分,及格率仅有16.7%,是所有题型中最差的一项。这种状况与新大纲提出的翻译能力相差甚远。针对此问题,笔者提出了导致学生翻译能力差的大致假设:1、学生在学习中对翻译重要性的认识不够,因而忽视翻译能力的培养;2、学生翻译技巧的贫乏;3、教师上课偏重语法词汇的讲解,缺乏翻译技能的指导;4、学生在课堂上没有足够的翻译练习;5、课外翻译练习太少。为了验证以上假设并查明学生翻译能力差的真正原因,笔者于第二学期开学初对所教班级进行了问卷调查。此次调查的对象为广东药学院药事管理2005和人力资源2005班的同学,共131人,其中收回有效问卷115份。通过数据分析表明(文中所有数据由SPSS13.0处理),学生翻译能力存在问题并非是认为翻译不重要,问卷显示89.5%的同学认为翻译比较重要,但我们发现关于在课堂上认为能掌握一定翻译技能的同学却只占49.9%,能进行课外翻译练习的同学也只占28.7%。由此可见,造成翻译能力差的原因主要有:第一、学生翻译技巧的贫乏,第二、教师在课堂上缺乏翻译技能的指导,第三、学生翻译练习太少。
(二)对策及行动研究计划
基于以上翻译能力的问题,笔者采取了如下对策:
第一、加强翻译方法和技巧的指导。很多学生已经掌握了足够的词汇量,可对翻译却无从下手,主要是不了解中英文语言结构的差异,缺乏翻译技巧造成的。因此有必要在课堂上对学生进行翻译方法和技巧的传授。第二、进行适当的翻译练习。翻译是一种实践,而技巧只有在课堂内外付诸实践,才能收到好的效果。大量的翻译练习可培养学生的翻译能力。第三、推荐课外书目并进行课外翻译指导。由于课堂时间有限,且目前大学英语并没有专门的翻译课程,因此必须让学生多利用课外时间进行有效的翻译练习。
在制定对策之后,笔者依此制定了为期一个学期的行动研究计划。计划中就翻译练习和翻译技巧的讲解方面,从实验学期的第二周开始,每次精读课上对语言点的讲解时,先出示汉语例句,再对其进行翻译。这样既可以在课堂上让学生进行翻译的练习,还可以适当地就出现的翻译问题进行相关的翻译方法和技巧的讲解。同时每周给学生留下适当的翻译练习,要求学生独立自觉地完成,老师将抽改部分作业,并在下次课上就易犯的错误进行讲解,其他学生的作业则分配给各个小组进行批改和讨论。在第五周结束时对学生进行访谈,根据学生反馈的信息对教学行动研究计划进行必要的调整。同时从第四周开始ClassTranslation的活动,班上同学分成16组,除了批改和讨论翻译作业之外,每组同学分别找到自己感兴趣的话题和资料,将其翻译成英文,或翻译成中文,并可画上插图,形式自由多样。期间老师将对各组进行指导。在第8周各组交换作品,并提出修改意见。第9周各组修改自己的作品。第10周各组上交自己的作品,学生和老师一起选出比较好的作品作为ClassTranslation的成果。从11周开始以同样的安排开始进行第二轮ClassTranslation活动。研究结束时,即第18周再次对学生进行第二次问卷调查,以搜集反馈,此次收回有效问卷共122份。
三、行动研究后的反思
1.学生学习效果
在第二学期的期末考试中,我们欣喜地看到学生的翻译成绩明显提高(见表1),此次考试学生平均从先前的6.019分提到了9.373分,及格率也提到了67.9%。考试试卷依旧是从题库抽出,改卷也仍然采取流水作业,且教师不改自己所教班级。表1翻译成绩比较(略)
我们再从开学初和第18周对学生进行的同一问卷调查结果分析也可以看出,此次行动研究对学生翻译能力的提高起到了一定的作用。我们注意到在12个问题中,差异有显著性的问题共有8个(见表2)。表2问卷调查结果及分析(略)
(1)翻译方法和技巧的掌握方面
翻译是外语综合能力的组成部分,是衡量外语水平的重要标准之一,缺乏翻译方法和技巧往往让学生对翻译无从下手,即使勉强译出,也是让人看不懂的怪怪的单词堆砌,因为“过于直译”和“死译”正是缺乏翻译方法和技巧所导致的[5]。由此可见方法和技巧的把握对提高翻译能力非常重要。从问卷调查中“认为在课堂上掌握了一定翻译技巧”的平均分由2.74增长到3.48中可看出,在翻译方法和翻译技巧的指导上,笔者在课堂上采取先出示汉语句子,再对其进行翻译,并以此渗透翻译方法和技巧的讲解的方法有一定的成效。而这种教学方法也与张美平在其论文中指出的在教学中“教师应适当减少讲解知识点的时间,腾出时间进行有针对性的翻译技巧训练”[6]的主张是相一致的。我们在访谈中也了解到学生喜欢这种讲解语言点的方式,在访谈中学生说:“这种方法很好,一方面可以帮助记住文章中语言点,以前印象就没那么深刻;另一方面又可以知道怎么做翻译。”,“以前我从来没有注意到中文和英文有这么大的差别。”在关于是否喜欢“多点语言点传授”方面,第二次问卷学生明显意识到我们的精读课堂除了学习语言点之外,还应多一些技巧的训练。研究结束时的问卷调查显示(见表2),学生对翻译方法和技巧的使用情况有了较大的改善。学生在翻译时逐渐学会开始考虑中英文语言的差异,开始进行词汇转性的思考及面对长句翻译也有了一定的对策。
但通过访谈学生,笔者发现尽管学生对翻译方法和技巧有了一定的认识和掌握,但基础较差的学生认为这些技巧对他们作用不大,因为词汇量是他们的主要问题。由此可见,翻译确实是包含接受技能和产出技能的综合能力,需要对两种语言的理解和运用能力。由于对英语的理解和运用能力不够,即使掌握了翻译的方法和技巧,翻译能力的提高也并不显著。
(2)翻译练习方面
翻译是一种实践,只有经过大量的练习,将所学的方法和技巧付诸于实践,翻译能力才能得到提升。在精读课堂上,先出示汉语再一起翻译成英语的做法让大部分同学得到了翻译练习的机会,但由于一起上课的学生过多,再加上课堂时间有限,无法督促所有的学生均能思考、练习。因此适当的课外翻译练习自然必不可少。为了更好地做好课外练习,我们把全班分成16个小组,一方面可以一起批改和讨论其他组员的翻译错误;另外我们也在第四周开始了ClassTranslation的活动。
在实施计划时,最大的问题是对学生课外练习的检查和监督。由于活动都是小组合作的形式,学生的投入很不均衡。很多小组的任务都是由个别或者几个学生单独完成。我们从问卷调查中也能看出,学生在课外的翻译练习很少。为此我们对学生进行了访谈,有些同学认为“课堂上的例句难度太大,给予思考的时间也太少,只有一小部分基础好的同学能够翻译出来”。也有同学提出:“希望多举一些与实际、与我们专业更紧密相关的句子。”关于课外的ClassTranslation的活动,很多同学认为“时间不够”,“专业课太忙,选修课也多,加上还有学生社团活动等”。而且这又不是考试,不少同学都是随便对付一下。而对作业的批改和讨论,很多同学认为“讨论根本没法开展”,因为这么多人很难聚在一起,只能是各人分到作业独自帮看一下,也有很多同学根本就不知道错在哪儿。
当然由于每次课还是留下了课外练习,而且组织了课外翻译活动,学生在课外对翻译练习的投入还是有所增加。通过调查结果也可以看出,关于“做课外练习”这一项选择“1从不”“2偶尔”的人明显从71.3%减少到29.6%。这说明课外练习的指导起到了一定的效果。
2.教师自身收获
教学行动研究不仅使学生受到积极的影响,更重要的是,我们在实施计划时增加了对教学过程的了解,增加了对学生的了解,通过制定切实可行的行动计划解决我们在教学中遇到的问题,这给我们带来自我的肯定。正如陈向明所说:“参与研究可以帮助教师从日常繁杂的教学工作中解脱出来,在教学劳动中获得理性的升华和情感上的愉悦,提升自己的精神境界和思维品位”[7]。通过此次行动研究,笔者也注意到了一些方面的问题。
第一、大学英语教学需要与实际紧密结合,要尽可能与学生所学的专业结合。通过访谈学生提出希望能多举“与专业相关的例句”,体现大学英语的翻译教学应尽可能与其专业相结合的需求。这一做法在法国里昂第二大学的医学和环保专业等早已存在[8]。这就对我们教师的知识结构提出了新的要求,作为药学院的英语教师必须对医药英语有所涉及。
第二、进行教学行动研究时,活动应尽可能有趣多样。比如此次在课外练习这一方面活动就过于单一,导致一些对此活动无兴趣的同学便放弃了练习的机会。可以适当增加一些对简单电影对话的翻译、或现场翻译学生发言等的活动。
第三、行动研究的手段要尽可能丰富。此次研究,笔者使用了问卷、教学日志、访谈、观察、分析试卷等多种手段。虽然在数据整理方面增加了工作难度,但大量信息的收集,使我们对学生的状况有了更深入的了解,同时加强了对教学过程各个侧面的理解和思考。
第四、活动研究的计划设计要合理、实事求是。活动计划的设计是教师分析问题解决问题的能力体现。计划方案必须为解决问题而置,又必须充分考虑学生的英语水平和个体差异。
通过此次行动研究,可以说学生的翻译能力得到了一定的提高,而且还增进了教师与学生之间的情感和交流。教师的这种能够不断了解教学效果并进行改正的教学态度也给学生留下了积极的影响。
基金项目:2006年广东药学院教育教学研究课题
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所以,及时有丰富的专业知识,拓宽了知识面,但是,在其就业时也会显现出实践能力差,学习的知识跟不上时代的脚步,不能与时代接轨,就业压力增大。
2.实习困难重重,逐渐趋于形式。
由于学生的假期时间短和社会资源稀少,难以接受大批量的学生进行实习,因此,毕业实习并不能从根本上解决学生的实践能力薄弱这一缺点。
3.毕业生的就业面积广,但是专业对口不多。
从毕业生的去向调查报告显示,只有少数部分的学生从事的是工商管理专业,与在大学期间学习的专业对口,大部分的学生与所学专业并不对口,这就是工伤管理专业毕业生的就业面积广,而专业对口的少。
4.对师资的要求高,符合要求的教师少。
工商管理专业是一个知识性和实践性很强的专业。只有知识没有实践,或者只有实践没有知识都是不行的,二者缺一不可。这对教师的实践水平和只是素养的要求都非常高。但是,在现实生活中,符合这一要求的老师并不对。无法真正培养出高素质的工商管理人才。
二、工商管理专业人才培养目标的定位
人才目标的定位决定着人才培养的质量。为了能够使工商管理人才在各种环境中应变自如。全国各地高校应该根据自身的办学水平,圣元水平,教学水平,以及各种综合性素质和资源配置,设定出,符合本身学院水平的工商管理新型人才培养目标。培养目标,培养规格,课程设置是一个培养方案制定三大重要组成部分。培养目标是核心。课程设置是关键,培养规格是要求。我们的办学宗旨应该是“为地方经济建设和社会的进步培养合格的高素质新型人才”我们要通过追踪调查,深入用人单位,调查社会对新型人才的需要。并由此来设定工商管理专业新型人才培养的目标以及规格。为了避免规格学校盲目的太高人才培养的标准,要培养面向社会,面向企业。培养在专业领域的专业人才。我们培养人才的定位应该是:高等。人才定位是:应用型人才。工商管理专业的人才应该懂得运用社会主义市场经济来发展着重培养学生基础理论方面和社会实践方面的能力。能够与时俱进,以科技发展同步。为了确保综合性人才对社会的发展很好的适应,应该对贡山管理专业的学生进行深层次培养和教育,不断改革创新培养模式。
三、构建工商管理专业应用型本科人才培养模式
1.确定型人才培养目标,构建人才的知识能力素质结构。
培养工商管理专业的人才主要是培养全方位的专业综合性人才。在人才培养的过程中,要以实践应用能力的培养为主要目标。要采用“一体双翼”的方法。一体双翼就是有广泛额基础知识素养和较强的基本技能素养。二者为双翼。对应用型人才的素质要求主要集中在一下四个方面:思想道德素质、专业素质、文化素质、身心素质。来适应生产发展的需要。培养人才质量的主要标准是综合型应用人才的总体能力。专业综合能力主要包括发展能力、交流、协作与计算机应用的基本能力。三是专业技术应用能力。这三种能力在相辅相成,缺一不可。其中,专业技术能力是基础,只有学好专业技能才能更好的在实践中获得提升。学会了专业技术,下一方面就是应用的能力,在实践中要学会发现问题更要学会解决问题,运用所学的专业知识解决实际问题,从而在这个过程中自身的能力得到升华。
2.建立“两平台、多方面”的人才培养模式。
所谓的两平台、多方面就是在工商管理专业人才培养的前期按照大类招生共同培养。让学生共同举杯基础知识,基本素养和基本技能,构建学科课程和公共课程两个平台。后期在大类招生的基础上进行分专业培养,将大专业根据专业属性,分为各个小专业。专业性增强。这样就很好的解决了有良好的专业基础而缺乏实践素质的问题解决了缴款基础与针对性强的矛盾,学制短和灵活性之间的矛盾,解决了学生的素质与就业的需求脱节的矛盾。这样学生就有了多次选择专业的机会,这样不但满足了学生在学习兴趣方面的要求同时也培养了更过的专业型人才。
3.实现经济管理基层应用人才的目标。
这就要求各个高校放弃运用传统模式进行人才的培养,摒弃传统的授课方式,提高知识的专业性。所教授的理论应该与时代接轨。真正地做到与时俱进。降低学生出校园的就业压力。在学习内容方面应该给予学生自由,让他们选择自身感兴趣的部分进行学习。兴趣是学习的一大助力,要把专业知识的培养放在首位,同时也不忘专业技能额培养,在实践中不断融合和进步,理论与实践相结合才能培养出全面高素质的应用型人才。
4.加强工商管理专业的“校企合并,工学结合”培养应用型人才,这是核心是必然途径。
在这方面,各个高校还相对薄弱,却方相关方面的指导。因此校企结合的优势就在于一方面学校可以利用教育资源对学生的专业知识和技能进行培养。而在企业方面,可以利用企业的教育环境和资源。让学生在真正地学习实践环境中成长,从而满足新形势下对工商管理人才的需求。
5.学校对于人才的培养首先应当满足社会的需求,这样人才才能更好地适应社会。
培养用人单位需要的人才。积极的督促学生与企业签订相应的劳工协议,为应用型人才提供更多的就业机会。或者是采用“用人实验试点”的方法,让工商管理专业的人员友根果的就业机会,提高就业几率。需求决定市场,如果人才的培养不能很好地适应企业的发展战略需求就不能很好地胜任这个岗位,既不利于企业的发展,也不利于个人的社会价值的实现。
6.学校应当全方位的培养学生的素质,专业知识是工商管理专业的根本。
首先应当牢固掌握。其次,仅仅有专业知识是不够的,在人际交流,工作的态度和责任心方面应当着重培养,让员工对企业有归属感,进而更快的适应岗位。全方面培养学生素质,有利于工商管理专业的学生更好的额适应社会,提高适应岗位的能力,不断创新,提升自己。
数学知识的应用是广泛的,大至宏观的天体运动,小至微观的质子、中子的研究,都离不开数学知识,甚至某些学科的生命力也取决于对数学知识的应用程度。马克思曾指出:“一门科学只有成功地应用了数学时,才算真正达到了完善的地步。”生活中充满着数学,数学教师要善于从学生的生活中抽象出数学问题,使学生感到数学就在自己身边,从而产生兴趣。比如,“比的意义”讲完之后,可让学生了解自己身上的许多有趣的比;体重比血液之比大约为13:1,身高与脚长之比大约为7:1。知道这些有趣的比有什么用途呢?如果要知道自己血液的重量,只要称一称自身的体重,马上就可以算出来;如果你当了公安人员,凭借坏人的脚印就可以估计到坏人的身高。再比如,学完了利息的计算公式:利息=本金×利率×期数,就可以让学生把自己节省的钱存入银行,并且预算一定时间后得到的利息。
二、课堂教学应该联系实际
从知识的掌握到知识的应用不是一件简单、自然而然就能实现的事情,没有充分的、有意识的培养,学生的应用意识是不会形成的。教学中应该注重从具体的事物提炼数学问题,这引导学生联系日常生活中的一些问题用数学知识来解决,这有助于学生数学应用意识的形成。比如在讲“行程应用题”时,利用这样一个生活中常遇到的问题:甲乙两地有三条公路相通,通常情况下,由甲地去乙地我们选择最短的一条路(省时,省路);特殊情况下,如果最短的那条路太拥挤,在一定时间内由甲地赶到乙地我们就选择另外的一条路,宁肯多走路,加快步伐(速度),来保证时间(时间一定,路程与速度成正比)。从数学角度给学生分析这个问题用于“行程应用题”,是路程、时间、速度三者关系的实际应用。又比如,在讲“解直角三角形”时,可利用这样一个实际问题。修建某扬水站时,要沿斜坡辅设水管,从剖面图看到,斜坡与水平面所成的<A可用测角器测出,水管AB的长度也可直接量得,当水管辅到B处时,设B离水平面的距离为BC,如果你是施工人员,如何测得B处离水平面的高度?有的同学提出从B处向C处钻个洞,测洞深;有的同学反对,因为根据实际情况,这样做费力;有的同学又反对,因为这不是费力问题,C点无法确定。应该运用解直角三角形知识去解决:BC=AB·sinA(AB、<A均已知)。这实在是一个施工中经常遇到的问题,这一问题的提出可以使学生感到具体的实际问题就在自己身边等待解决,增强了主动意识,激发了兴趣。
三、开展数学知识应用竞赛
Effectofchangingconjugationbridgebetweenhaptenandcarrierproteinonthesensitivityofsalicylateelisa
WANGShu-Cai,ZHOUXie.
DepartmentofAgronomy,NanjingAgriculturalUniversity,Nanjing210095
AbstractObjective:TostudytheeffectofchangingconjugationbridgebetweenhaptenandcarrierproteinontheraisingofantibodiesagainstsalicylicacidandthesensitivityofsalicylateELISA.Methods:Threekindsofsalicylicacid(SA)immunogens:SA(C5)-N=N-p-AHA-BSA(A)、SA(C4)-N=CH-(CH2)3-CH=N-BSA(B)andSA(C5)-NH-CH2-NH-BSA(C)andfourkindsofSAcoatingconjugates:SA(C5)-N=N-p-AHA-OVA、SA(C4)-N=CH-(CH2)3-CH=N-OVA、SA(C5)-N=CH-(CH2)3-CH=N-OVAandSA(C5)-NH-CH2-NH-OVAweresynthesizedbylinkingSA、4-aminosalicylicacidand5-aminosalicylicacidrespectivelytobovineserumalbumin(BSA)andovalbumin(OVA)throughdifferentconjugationmethods.RaisingofantibodiesinrabbitsandeffectofchangingconjugationbridgeonthesensitivityofsaliaylateELISAweredetectedbyELISA.Results:TwokindsofpolyclonalantibodieswereraisedinrabbitsagainstimmunogensAandCrespectively.TheantibodiesagainstimmunogenCpossessedahighspecificity.UsingtheseantibodiesandchoosingSA(C5)-N=CH-(CH2)3-CH=N-OVAasacoatingconjugate,akindofELISAwasdevelopedwhichdisplayedalinearityrangefrom0.064to200.000nmolofSA.Conclusion:ConjngationbridgechanginghasagreateffectontheraisingofantibodiesagainstsalicylicacidandthesensitivityofsalicylateELISA.
KeywordsSalicylicacidConjugationbridagePolyclonalantibodiesELISA
定量检测半抗原的ELISA在植物学研究中已得到广泛应用[1],但其建立比较困难,因为半抗原与载体蛋白相偶联的人工免疫原所诱导产生的往往是特异性不同的抗体群,制备单克隆抗体时,可以通过筛选得到专一识别半抗原的抗体[2],而基于多克隆抗体的ELISA往往因多种抗体并存,非特异结合率较高。通过改变包被物中载体蛋白种类可以提高检测灵敏度[3],但反应体系中仍存在识别连接桥抗体的干扰。能否通过改变连接桥的结构以消除或减少这一类干扰呢?作者对此进行了探索。
1材料与方法
1.1化学试剂4-氨基水杨酸(p-aminosalicylicac-id,p-ASA)、4-氨基马尿酸(p-aminohippuricacid,p-AHA)、碳化二亚胺(EDC)、5-氨基水杨酸(5-aminosalicylicacid,5-ASA)购自Sigma公司;牛血清白蛋白(BSA)、卵清蛋白(OVA)购自上海生化试剂采购站;福氏不完全佐剂自制;其它试剂均为分析纯。
1.2免疫原的合成
1.2.1SA(C5)-N=N-p-AHA-BSA(A)的合成通过重氮化氨基马尿酸法[4]。
1.2.2SA(C4)-N=CH-(CH2)3-CH=N-BSA(B)的合成按Bennett的方法[5]。
1.2.3SA(C5)-NH-CH2-NH-BSA(C)的合成用Mannich反应[4]:100mgBSA溶于2ml蒸馏水,加入3mol/L乙酸钠0.67ml,7.5%(W/V)甲醛1.2ml,最后加入5-ASA溶液(50mg溶于2.5ml1mol/LNaOH),调节pH至8.5,室温下搅拌过夜。将反应物装入透析袋,4℃下先对0.1mol/LNaHCO3,后对蒸馏水充分透析,冷冻保存。
1.3包被物的合成
1.3.1SA(C5)-N=N-p-AHA-OVA的合成合成程序与A相同,仅以OVA代替BSA。
1.3.2SA(C4)-N=CH-(CH2)3-CH=N-OVA和SA(C5)-N=CH-(CH2)3-CH=N-OVA的合成合成程序与B的相同,以OVA代替BSA合成SA(C4)-N=CH-(CH2)3-CH=N-OVA。同时以5-ASA与OVA偶联合成SA(C5)-N=CH-(CH2)3-CH=N-OVA。
1.3.3SA(C5)-NH-CH2-NH-OVA的合成合成方法与C的相同,仅以OVA代替BSA。
1.4抗血清的制备和纯化参照Weiler的方法,每种免疫原免疫3只新西兰白兔[6]。第4(或5)次免疫后9d行颈动脉全放血。血样置37℃2h后移入4℃冰箱过夜,4000r/min,离心20min,取上清。用饱和硫酸铵法纯化抗血清。
1.5SAELISA操作程序非竞争性ELISA程序参见Zheng等,用于抗体的产生和效价的检测[7]。竞争性ELISA程序参见张能刚等,用于SA对抗体与包被物结合的抑制率及抗体对SA类似物的交叉反应率的测定[8]。
2结果
2.1抗体的产生4次免疫后,用连接桥相同的包被物的非竞争ELISA检测,发现免疫原A和C诱导产生了高效价的抗体即PAbs(A)和PAbs(C),其最高效价分别为12800和25600(以OD值为1.0时的抗血清稀释倍数表示)。而以戊二醛法合成的免疫原B,经5次免疫也未能检测到抗体的产生。
2.2连接桥不同的免疫原诱导产生的抗体对SA的特异性竞争性ELISA检测表明,PAbs(A)对SA的识别能力较低(基于连接桥相同的包被物,SA浓度高达400nmol/50μl时,其抑制率仅为31.05%),而PAbs(C)在用同型连接桥的包被物时已表现出对SA较高识别力,而改用异型连接桥的包被物,其抑制率又有明显提高(表1)。
在继续使用异型连接桥包被物的条件下,我们检测了PAbs(C)对13种SA类似物的交叉反应率,结果表明:PAbs(C)除对5-ASA的交叉反应率高达141.2%、对5-磺基水杨酸和4-氨基水杨酸的交叉反应率也较高,分别为15.9%和3.7%,对乙酰水杨酸、对羟基苯甲酸、对氨基苯甲酸、N-苯基邻氨基苯甲酸、3,5-二硝基水杨酸、苯羟乙酸、水杨醛肟、2,4-二硝基酚、水杨酸钠和2,4-二氯酚10种类似物的交叉反应率均不高于2.1%,甚至表现为不识别,表明PAbs(C)对SA具有相当高的特异性。
2.3SAELISA的建立基于上述结果,以PAbs(C)为第一抗体,SA(C5)-N=CH-(CH2)3-CH=N-OVA为包被物建立了SAELISA,其灵敏度为0.030nmol,线性检测范围为0.064~200.000nmol。
表1包被物连接桥结构的改变对PAbs(C)与SA特异结合的影响
Tab.1EffectsofchangingbridgeofcoatingconjugateonthebindingspecificityofSAtoPAbs(C)
CoatingconjugateInhibitoryrate(1-B/B0,%)
SA(nmol/50μl)0.1280.6403.20016.00080.000400.000
SA-NH-CH2-NH-OVA6.7810.1717.8024.5848.3180.34
SA(C5)-N=CH-(CH2)3-CH=N-OVA2.136.9424.3539.8164.5292.56
Note:B.bindingoftracertoantibodyinthepresenceofSA;B0.bindingoftracertoantibodyintheabsenceofSA
3讨论
3.1半抗原的偶联位点以及和载体之间连接桥的结构对产生抗体的影响SA的分子量仅138.1,与载体偶联后才能具备免疫原性。作者在SA苯环的C4和C5位分别偶联载体蛋白合成了3种结构不同的免疫原。结果C4位偶联合成的免疫原未能诱导产生抗体,而Bennett等用同样方法将SA与KLH偶联却制成了识别SA的羊抗体(但未见其建立ELISA的报道)[5],这可能与KLH异源性比BSA强和不同物种的免疫应答不同有关。C5位偶联合成的免疫原C和A都诱导产生了高效价的抗体,而前一种能较强地识别SA。提示偶联位点及连接桥的结构对特异性抗体的产生有很大的影响。同时前一种抗体对SA类似物的交叉反应率较低,从而可以排除样品中SA衍生物的干扰,确保ELISA的可靠性。
3.2包被物中连接桥结构的改变对SAELISA灵敏度的影响改变包被物中的蛋白种类可以消除识别载体蛋白抗体的干扰,部分地提高了ELISA的灵敏度,但反应体系中仍存在识别连接桥抗体的干扰,使抗体与包被物的非特异结合偏高。因此,作者在建立SAELISA时,针对免疫原C诱导产生的抗体,不仅通过改变载体蛋白的种类(OVA代替BSA),而且尝试改变连接桥的结构即-N=CH-(CH2)3-CH=N-代替-NH-CH2-NH-来合成包被物,使SA对抗体与包被物结合的抑制率明显提高(表1),从而提高了SAELISA的灵敏度。
同样,在检测吲哚乙酸(IAA)和脱落酸(ABA)等的固相抗原型ELISA中也存在着非特异结合率偏高的问题,是否也可通过改变连接桥的结构来提高检测的灵敏度呢?有待进一步探索。
作者简介:王树才,男,30岁,硕士;
指导教师,周燮,男,教授,博士生导师,主要从事植物激素及其免疫检测技术的研究作者单位:(南京农业大学农学系,南京210095)
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1.必须确保基金的安全性。由于社会养老保险基金是参保群体的“养老钱”和“救命钱”,是参保群体老年阶段的基本生活费用来源,因此对于社会养老保险基金的运营管理必须确保不能出现过高的风险,基金本金能够安全按期回收。
2.应适当提高基金的流动性。对于社会养老保险基金由于不同时期以及不同情势下的支付压力也不同,在对社会养老保险基金进行投资管理的过程中,应当适度的提高基金的流动性,确保基金在需要时能够及时的变现支付,保证社会养老保险体系的正常运转。
3.确保基金收益的最大化。对于社会养老保险基金运营投资管理策略的制定,应该在符合安全性要求的前提下,把握准收益和风险的尺度,实现社会养老保险基金的保值增值,为社会养老保险基金体系缓解压力。
二、我国社会养老保险基金运营管理存在的问题分析
1.社会养老保险基金的运营管理体制不完善。在我国的社会养老保险基金的运营管理上,投资主体主要是社保基金管理中心,但是其运营管理的专业化水平不高,而且还存在着行政式管理的特点,由于缺乏市场化的运作管理经验,而且对于投资技巧以及风险规避管理的能力不足,降低了社会保险金投资运营的灵活性,基金运营管理效率不高,甚至影响到社会养老保险基金的安全可靠。
2.投资运营渠道单一。当前我国社会养老保险基金的投资渠道主要是银行存款以及购买国债,这两种运营管理模式虽然可以确保社会养老保险基金的安全可靠,但是在市场经济发展新形势下,基金收益与国民经济增长率还有较大的差距,特别是在通胀水平不断提高的情况下,单一的投资渠道造成资金时间价值的丧失,增加了社会养老保险基金的贬值风险,无法真正的实现基金的保值增值。3.缺乏有力的监管。当前在我国社会养老保险基金的管理上,缺乏有力地监管,虽然社保基金挪用、挤占等行为基本已经杜绝,但是基金预算管理不规范、基金投资效益还没有相应的绩效审计等问题仍然较为突出,监管机制的不健全制约了社保基金运营管理规范化水平的提高。
三、会养老保险基金运营管理优化措施
1.完善社会养老保险基金运营管理体制。对于社会养老保险基金的运营管理,首先应该明确社会养老保险基金的投资运营管理主体,可以按照社会养老保险基金管理业务内容的不同确定不同的管理主体,对于基金政策的实施、基金的征缴以及支付可以由政府作为管理主体,对于基金的投资运营则可以根据实际情况综合选择公办养老保险基金管理公司、委托社会保障基金理事会、直接委托商业保险公司或信托机构、参与银行投资管理等体制进行社会养老保险基金的统一管理,通过选择适当的社会养老保险基金投资管理主体,确保社会养老保险基金管理的专业化、市场化与规范化。
2.拓宽社会养老保险基金的投资渠道。对于社会养老保险基金的投资渠道,当前可选择的主要有银行存款、国债、金融债券、股票、投资基金、实体经济、股指期货以及国际市场投资等,应遵循安全、收益性与流动性的原则选择,在具体的投资策略上,应适当的选择分散投资的模式,通过多种投资方式的多样化组合,广泛投资,降低投资风险。同时,可以采取分阶段投资的管理模式,针对当前社会养老保险基金进入市场时间短经验不足的现状,可以采取相对稳健的投资策略,在中远期随着基金累计规模的加大,则应采取多样化的投资组合,来提高社会养老保险基金的收益。
3.强化基金运营风险的监管防范。将社会养老保险基金置于市场化的投资运营,势必会存在各种风险问题,因此在投资运营管理过程中必须加强监管以防范各种风险问题。首先应该注意采取限量监管的方式,对社会养老保险基金中的股票、风险资本以及实物资产等进行数量限制;其次,应该不断地完善社会养老保险基金的信息披露机制,及时的公布基金的运营管理、资产等财务数据,确保监督管理部门以及社会公众可以准确掌握基金状况。第三,应该积极的发挥基金监管机构、财政以及审计部门的作用,严格按照基金的运营管理法律法规进行基金安全以及绩效审计监管,确保社会养老保险基金的安全可靠。
二、高校对物业管理专业人才的培养模式
(一)以服务理念作为培养模式的中心所谓的以服务理念为中心的培养模式指的就是将服务理念作为教学的中心,主要培养学生与业主交流的技巧,以这种方法来进行工作可以以优质的服务来争取业主的心,用心与业主交流,对于企业品牌的树立十分的有作用。但是这种工作方式也存在着一定的问题,就是当遇到一些实际的问题时无法解决,并且无法胜任总体性的管理工作。
(二)以技能作为培养模式的中心所谓的以技能作为培养模式的中心指的就是对学生进行现代化的培养,主要体现在现代化楼宇设备设施的运行和维护、室内环境品质管理和能源管理以及大型物业管理等方面。要求学生必须要彻底的掌握机械、建筑、计算机应用以及电工电子等基础技能;以技能作为培养模式的中心主要的目的就是培养学生的专业技能和技术水平,经过这方面的培训之后物业管理人员可以为业主解决一些实际性的问题,但是却不能体现出物业管理行业的经营理念和管理理念。
(三)复合型管理人才培养模式复合型物业管理人才的培养模式主要是针对前两种培养模式的有点,将两者的有点进行有效的结合,然后对学生进行培训,所以走的可以算是复合型人才培训的道路。尽管这种教学模式正处于刚刚起步的阶段,但是这是一个好的开头,能够为物业管理行业输送实用性的人才。
(四)最新物业管理专业人才的培养模式物业管理专业对于人才的培养方向是物业的管理员、物业管理公司的部门主管以及项目经理等优秀的管理人才。其培养的目标主要是四个方面。第一方面就是在学术方面对学生进行培养,培养文、理、工相结合的全面型人才。可以在工作中对多科的知识进行灵活的运用,当遇到无法解决的问题时也可以发挥自身的创造性思维。第二方面就是对学生进行方法方面的培养,让学生彻底掌握定性和定量相结合的分析方法。在明确的管理思维支配之下,具备对所有问题都能够明确分析的能力,当遇到问题时可以灵活的对问题进行解决。第三方面局势在经营方面对学生进行培养,所谓的经营方面就是将服务技能和服务理念进行有机的结合,在拥有专业的经济管理理论的同时还会一种或者是多种技能。不论是服务态度方面还是实际问题解决方面都能够应对自如。
在对物业管理人才进行培养的过程中应该采用学校和企业合作的模式。学校和企业合作培养学生,可是实现真正意义上的双赢。企业和学校联合办学的形式多种多样,其中最为常见的就是订单培育式、校企互动式、岗位见习式以及企业主导式,利用一切能够利用的资源对学生进行培养,为物业管理行业输送符合社会需求的人才。
(一)管理会计教学目标偏离现实
当面对实际工作时,却不知从何入手,缺乏必要的分析能力和应对能力,无法指导现代社会复杂多样的经济活动。为了能够更好地为社会输送大量的优秀管理会计人才,有必要对现有的管理会计教学目标进行调整[1]。
(二)管理会计教学内容“重旧轻新”
第一部分介绍管理会计的基础理论,是管理会计课程的基础;第二部分介绍管理会计职能的相关理论与具体应用,是管理会计课程的核心;第三部分介绍管理会计的前沿领域,是管理会计内容的拓展。在组织教学活动时,教师通常将前两部分作为教学的重点,花大量课时进行讲解,而对新拓展的领域,诸如作业成本法、战略成本管理、平衡计分卡等只投入很少的课时,甚至让学生课下自学,而此类内容恰是与企业经营管理联系最为密切的部分。这种偏重传统理论而轻视前沿理论的教学惯性,不仅不利于学生及时了解管理会计发展的新动态,而且也会影响学生利用科学理论分析问题、解决现实问题的能力。
(三)管理会计教学方式陈旧
目前,管理会计这门课程的教学方式比较陈旧,主要体现在三个方面:一是教学方法陈旧,主要采用教师讲解为主、学生自学为辅的方法,学生往往被看成说教的对象,师生间缺少互动,难以调动学生的学习热情。二是实践教学缺乏,在多数高校,几乎没有关于管理会计课程的实践教学环节。个别学校即使安排了实践教学环节,也多变成了简单的案例分析课,或者随便找个企业走马观花式地参观一下,实在有违实践教学的初衷。三是考核方式单一,目前多数高校对学生的评价主要采取标准化考试的方式,着重考核学生对基本内容、基本方法的掌握程度,缺少对学生发散性思维和创新性思维的考核,以致培养的学生“高分低能”,不能很好地满足社会的需求[2]。
(四)管理会计与其他学科内容交叉现象严重
管理会计、成本会计、财务管理是财务管理专业、会计专业、审计专业等工商管理类专业的三门核心课程。纵览这三门课程的教材,内容交叉重复现象严重(见图1)。这种现状不仅浪费了有限的教学资源,同时也浪费了学生的宝贵时间,不利于调动学生的学习积极性,更不利于管理会计、成本会计及财务管理相关学科的建设及长远发展。因此,有必要对管理会计的课程内容进行改革。
二、基于应用型人才培养的管理会计教学改革的基本思路
针对在管理会计课程教学中出现的问题,结合应用型人才培养对实践能力的要求,高校应着重从以下四个方面对管理会计教学进行改革。
(一)调整管理会计的教学目标
为了满足现代社会对新型管理会计人才的需求,我国管理会计教学应转变以基本知识、基本理论传授为主要目的的传承式教育思想,树立以培养学生综合应用能力和创新能力为目标的新的教学理念。在确定管理会计的教学目标时,应重视对学生思维的训练和创新能力的提高,不仅要让学生掌握管理会计的相关理论和基本方法,还要激发学生的开拓性思维,锻炼其提出问题和解决问题的能力,努力将学生培养成能够承担企业计划、控制和评价等相关的各项工作,并能够通过设计企业流程、协调组织企业工作等多种方式参与企业的经营管理,帮助企业完善内部控制,提高企业的市场竞争力的高素质管理人员。
(二)平衡管理会计的“新旧”内容
20世纪80年代以后,世界经济进入蓬勃发展时期,管理会计领域也随之掀起了一场观念革新的。管理会计的新发展促使其内容不断丰富和扩展,形成了许多新的领域。例如,企业成本管理深入到作业层次形成的作业成本法,与现代社会整个价值链优化相联系的战略成本管理,基于战略绩效考核与评价的平衡计分卡系统等。这些内容多与企业经营管理有着紧密的联系,在进行课程内容设置时,应将这些新的内容及时补充进去,并进行详细讲解。首先,高校管理会计教师应系统介绍作业成本法和战略成本管理的基本内容,深入讲解其基本理论和方法。一方面,让学生认识到以作业为计算对象的成本计算代替传统的以产品为计算对象的成本计算的必然性;另一方面,让学生了解成本动因除了与企业生产本身有关外,还与企业经营规模、生产技术水平、劳动力投入情况等因素有关,从而使学生自觉地从企业长期战略的视角来分析成本动因。其次,由于平衡计分卡不仅是一种有效的业绩衡量系统,也是一种科学的管理方法,在企业中得到了比较广泛的应用,教师应理论联系实际,对这部分内容重点讲解[3]。
(三)创新管理会计的教学方式
1.重视案例教学,锻炼学生的综合应用能力
案例教学是推进管理会计理论在实践中应用的有效途径,贯穿整个教学活动,教师必须给予足够的重视。根据不同的教学目的,可以将管理会计案例分为导入式案例和讨论式案例两种形式。导入式案例安排在新内容开始之前,主要目的是通过对案例中某些现象或者某种现实问题的提问,引发学生的好奇心和求知欲,进而激发学生学习新知识的积极性。讨论式案例安排在某一部分内容学完之后再展开,主要目的是让学生巩固学过的知识点,并培养学生利用管理会计的相关知识分析问题、解决问题的能力。
2.增加并落实实践教学环节,培养学生的实务操作能力
社会经济环境的变化对管理会计工作者的素质提出了更高的要求,高素质管理会计人员的培养与高校实践教学的开展有很大关系。实践教学可分为校内实践和校外实践两个环节。针对校内实践,高校可以结合管理会计课程部分的典型领域设计一些实践教学内容。如以全面预算为中心,将预测、决策、预算结合在一起编制一套内容,安排部分课时让学生动手实验。另外,也可以购买或和其他软件开发公司合作开发一套适合高校实践教学的软件,为学生创造模拟操作的机会。对于校外实践,高校可与一些企业建立长期的合作关系,安排学生到企业实习,接触管理会计的具体事务。这样,部分学生在毕业后也许就可以留在实习企业工作。此外,可以邀请实务界资深管理会计人员来校授课,进一步增强学生对管理会计具体工作的了解,提高学生解决现实问题的能力。
3.创新教学评价方式,提高学生学习热情
目前,教学评价是对学生信息反馈和激励的重要手段,其评价方式具有导向功能,会对学生的学习态度和学习方式产生潜移默化的影响。针对管理会计课程实务性比较强的特点,应该打破原来的单一考核方式。在对学生评价时,除了考虑学生期末闭卷考试的卷面成绩外,还要重视其案例分析和实践教学环节的表现情况,以及学生的出勤率和回答问题的积极程度。对以上的各种因素,可以分别给以合适的比重,在此基础上计算学生这门课的最终成绩。这样学生在平时学习的过程中,就会从各环节入手,积极、主动地参与管理会计课程的各项学习活动[4]。