时间:2023-03-16 17:34:46
导言:作为写作爱好者,不可错过为您精心挑选的10篇细胞技术论文,它们将为您的写作提供全新的视角,我们衷心期待您的阅读,并希望这些内容能为您提供灵感和参考。
2、仪器:美国SurPathTMPrepstain全自动液基薄层细胞制片染片机(BDTriPath,BurlingtonNC,USA)及相关耗材。采用奥林巴斯电子支气管镜(BF-260或1T260工作镜)进行检查。镜下发现肺癌的直接征象或间接征象者,根据胸部CT提示的病变行透视下支气管镜肺活检。所有患者均在活检部位采用南京微创一次性保护型细胞刷刷检,将毛刷头直接在玻片上常规涂片1张。再将毛刷头置于盛有10mlCyteRichRed固定液的50ml离心管中充分震荡漂洗收集细胞。
3、制片方法
3.1传统涂片方法:纤维支气管镜刷头直接涂抹于载玻片上,涂片1张,干燥,95%乙醇固定10min,常规HE染色镜检。
3.2BDTriPath制片方法:标本加入专用50ml离心管中,使用程控离心机以Hettich3#程序600r/min离心10min,迅速管架倒置180°倾出上清液,加入CyteRichRed固定液20ml,静置30min,Hettich的3#程序以600r/min离心10min,迅速管架倒置180°倾出上清液,涡漩混合器振荡均匀,加入10mlTris缓冲液,混均,移至12ml的离心管,Hettich的4#程序以600r/min离心5min,迅速管架倒置180°倾出上清液,涡漩混合器振荡(15±5)s。管架放在PrePStain系统上,静置10min,等待上机自动制片染色。
4、判断标准:涂片诊断采用正常、可疑癌细胞、癌细胞三种分类方法,后两项为阳性标本。尽量由同一位医师操作电子支气管镜采集标本,由两位细胞病理学医师同时阅片镜检,以找到癌细胞为阳性。
5、统计学方法:统计学处理数据采用SPSS10.0软件包进行χ2检验。P<0.05为差异有统计学意义。
二、结果
两种涂片质量比较:传统涂片,涂片范围大小不一,涂片背景红细胞白细胞多,细胞分布厚薄不均,胞质核浆结构对比不明显,胞核染色质均一模糊、核仁不清;支气管镜刷检细胞标本LCT制片后,细胞集中于涂片范围直径15mm专用玻片上,细胞界限清楚,涂片背景干净清晰,细胞分布单个散在或成团分布,有立体感,胞质着色鲜艳、易于观察,胞核核膜分明,核内染色质及核仁清晰可见。薄层液基细胞学涂片诊断肺癌阳性率为58.33%,(146/252),其中中央型肺癌98例,周围型肺癌48例。传统涂片诊断肺癌的阳率为33.19%,(84/252),其中中央型肺癌68例,周围型肺癌16例。液基薄层细胞学与传统涂片的阳性率的差异有统计学意义P<0.05。
三、讨论
支气管镜刷检细胞学标本应用传统涂片方法制片,受细胞新鲜程度、细胞量、出血及炎性背景、制片技术等因素影响,造成背景不清晰、涂片细胞易重叠、厚薄不均、细胞形态不易观察、有意义细胞数量偏少,容易出现假阴性或假阳性结果,漏诊重要病变。液基薄层细胞学制片技术(LCT)是近年来出现一种制片技术的革新,明显优于传统巴氏涂片的检查方法,其中有代表性的是BDThiPth离心沉降技术和新柏氏(ThiPthTCT)模式技术。两种方法工作原理不同,分别为重力沉降式和过滤膜式,已经广泛成熟应用于宫颈细胞学检查和TBS诊断报告,对比传统巴氏涂片,宫颈癌及癌前病变(低度鳞状上皮内病变和高度鳞状上皮内病变)检出率大大提高,标本采集及制片质量的优越性是传统涂片技术无法比拟的,特别是BDThiPth制片技术在细胞数量、背景去除非诊断性杂质、全自动制片染色及诊断质量尤为突出。美国FDA认证:超柏式液基薄层细胞学检查是所有液基细胞学技术中检出率最高的技术。2005年美国病理协会非妇科细胞学实验室比较液基制片方法与传统制片方法在体液样本检测能力,证实液基制片方法更容易检出肿瘤。
对比传统涂片,LCT制片使细胞在载玻片上分布均匀,厚薄一致,细胞数量多,集中于15mm范围内易于阅片,核染色质着色鲜明,核浆对比效果好,易于观察核结构,染色背景清晰,制片质量十分满意,阳性率显著提高。LCT制片技术和诊断质量体会:支气管镜刷检由于全部收集或大部分收集送检标本,最大程度保留病变细胞,尤为适用LCT制片方法;液基涂片中的细胞核可能不如传统涂片中那样深染,但细胞核异型性是判读恶性或可疑恶性病变的重要重要标准,一般认为核占优势、核浆比例高、核膜不规则、染色质凝块状、核仁清或多个小核仁为恶性证据;巴氏染色胞浆在区分腺癌或分化鳞癌很有帮助,前者胞浆见空泡,后者胞浆橘黄色、含角蛋白;仔细观察成团核深染的细胞,如怀疑异常,在背景中全面寻找单个异型细胞更有意义;提高制片质量显著,但诊断阳性率的改善还需病理诊断医师勤于积累,LCT在支气管镜刷检细胞标本应用时间及应用范围还比较晚,对同一份标本同时进行普通涂片,以积累经验,减少误诊。
支气管镜检查是目前诊断肺癌的常规检查方法,刷检联合组织活检的重要手段。传统支气管镜黏膜细胞学检查是在支气管镜检查过程中用支气管毛刷直接在普通玻片上涂片,诊断率低。LCT对肺癌有更高的诊断率。国内也有少量文献报道。本研究结果显示,经过与组织病理学对照,普通涂片法检出敏感度为33.19%,而LCT检出敏感度为58.33%,较普通涂片法提高了25.14%,差异有统计学意义(P<0.05)。
1.1宿主细胞来源Yamanaka将小鼠体细胞诱导为iPSC开启了该技术的先河,之后人、大鼠、猴、猪、绵羊,甚至一些濒危动物的iPSC系纷纷建立。就人类而言,目前已从皮肤成纤维细胞、角质成形细胞、羊水、神经前体细胞、外周血细胞,甚至尿液中获得iPSC。不同组织来源细胞重编程效率及所需因子不同。不仅iPSC分化能力因人而异,在表观遗传稳定性和癌基因的表达方面也存在男女有别现象。使得iPSC技术应用于临床个体治疗更具挑战性。
1.2重组因子的选择及导入方式经典的Yamanaka因子在癌细胞中存在超表达、整合型载体可导致插入突变,且诱导效率非常低。因此,iPSC研究者一直致力于寻求更安全、简单、有效的诱导策略。Anokye-Danso等应用微RNA调控技术,不使用转录因子高效诱导iPSC。Zhou等和Kim等分别利用Yamanaka四因子的融合蛋白和穿膜肽与转录因子蛋白的融合蛋白,直接诱导受体细胞为iPSC,但效率较低。一些学者利用腺病毒、质粒载体瞬时转染靶细胞,或利用Cre/LoxP系统、oriP/EBNAI系统及piggyBac转座系统将外源基因整合后再特异性切除,从而得到不含外源基因整合的iPSC,但是存在基因重排及效率低下现象。而一些小分子化合物(如丙戊酸、曲古抑菌素A、维生素C、筛选激酶抑制剂、BIX-01294、5-AZA、Wnt3a、Zscan4因子)的应用可显著提高iPSC的产生效率。
1.3iPSC的诱导分化Zhao等利用iPSC通过四倍体囊胚注射得到存活并具繁殖能力的小鼠,证明了iPSC的全能性。目前,人们已成功地将iPSC在体外定向诱导分化为神经细胞、造血细胞、胰腺细胞、肝细胞、血管内皮细胞、心肌细胞、平滑肌细胞、耳蜗毛细胞、色素细胞等类型细胞。
1.4iPSC机制相关研究突破研究人员长期受困于体细胞重编程的具体机制。Polo等绘制出体细胞重编程为iPSC的分子线路图,证实诱导过程引起了两次转录波,分别是由c-myc/Klf4和Oct4/Sox2/Klf4驱动,并确定了重编程过程中路障基因。基于iPSC技术已证明细胞的分化过程并非不可逆转,研究人员利用细胞直接重编程技术将已分化细胞直接转化成特定谱系的细胞,利用间接谱系转化技术部分去分化生成多潜能祖细胞,为干细胞研究开辟了新思路。
2临床应用前景
iPSC因其分化全能性、体外易扩增、易于基因干扰或过表达等特性,在再生医学、药物研发评价、组织工程等领域有广泛应用前景。
2.1疾病特异iPSC动物疾病模型由于种属差异,不能真实反映人类疾病,利用疾病特异的iPSC系建立的iPSC疾病模型则可弥补这一缺陷,还可在免疫缺陷动物体内观察疾病。当前已建立包括神经系统疾病(帕金森病、亨廷顿病、肌萎缩侧索硬化症、脊髓性肌萎缩、唐氏综合征、脆性X综合征),血液系统疾病(范科尼贫血、镰刀细胞型贫血、β地中海贫血、原发性骨髓纤维化),代谢系统疾病(1型糖尿病,Ⅲ型戈谢病,Shwachman-Bodian-Diamond综合征、肌营养不良、莱施-奈恩综合征)及其他疾病(右心室心肌病)等特异的iPSC系。
2.2药物研发及筛选大规模药物筛选需要很多细胞,iPSC可以无限增殖,并且疾病特异iPSC本身就是筛选药物的目标。Takayama等导入Foxa2及肝细胞核因子1α到人类ESC/iPSC产生具有代谢功能的肝细胞样细胞,对筛查药物肝毒性具有重大意义。Lippmann等将iPSC转化为血脑屏障的内皮细胞,可用于神经系统疾病药物高通量筛选或药物神经毒性检测。Egawa等利用肌萎缩侧索硬化症患者iPSC分化而来的神经细胞来筛选并确认药物效果,发现漆树酸具有改善神经异常的作用。
2.3组织工程学应用用干细胞培养的人体组织是理想的器官再造来源。英国已经报道利用3D打印技术为癌症患者重塑面部,Faulkner-Jones等将3D打印拓展到人ESC范围,当3D打印技术能够兼容iPSC时,组织工程学将迈上一个新的台阶。
2.4临床疾病治疗
2.4.1神经系统疾病帕金森病是一种常见的神经退行性疾病,目前治疗手段只能改善症状。Kikuchi等利用iPSC分化出能产生多巴胺的神经细胞,然后移植到帕金森病猴子脑部,这些细胞存活半年以上,并持续释放多巴胺,很大程度上减轻了患病猴子的症状。Jiang等将帕金森病患者和健康志愿者皮肤细胞来源iPSC诱导为脑细胞并对比,观察到parkin基因发生突变产生自由基破坏多巴胺神经元是帕金森病发病机制之一。除帕金森病外,在阿尔茨海默病、脊髓侧索硬化症、脊髓肌肉萎缩症及舞蹈症等神经退行性疾病研究中,iPSC也取得许多进展。
2.4.2血液系统疾病Hanna等将人类镰刀型贫血症小鼠皮肤成纤维细胞建立的iPSC,通过同源重组技术获得正常基因型iPSC,诱导为造血干细胞并移植后可治疗动物模型的镰状细胞性贫血。Xu等用iPSC来源的内皮前体细胞和内皮细胞移植到血友病小鼠肝脏中,病鼠出血症状得到了改善。Raya等获得了基因修饰后的贫血症患者特异性iPSC,其能够分化成表型正常的髓系和红系造血祖细胞。最近,日本学者利用iPSC培养出一种能产生促红细胞生成素的细胞,有望用于治疗肾性贫血。
2.4.3心血管系统疾病2008年,Schenke-Layland等成功地将小鼠iPSC在体内和体外分别诱导出了心肌细胞。之后,Nelson等将iPSC分化得到的心肌细胞移植入具有完整免疫系统的成年小鼠梗死心脏内,能够观察到功能性的新生心肌。Tohyama等使用不含葡萄糖的低成本培养液获得大量纯度高达99%的心肌细胞,且几乎不存在癌化风险。而Zhang等证实iPSC具有分化为心房、心室和窦房结细胞等的潜能。
2.4.4感官疾病感音神经性聋的主要原因是毛细胞及螺旋神经节细胞退变和死亡,而其治愈需要相关结构的修复或再生。Nishimura等将iPSC来源神经祖细胞移植到小鼠耳内,观察到这些神经细胞开始表达谷氨酸神经元的标志性因子,表明iPSC可用于螺旋神经节损伤的再生修复。Oshima等使用小鼠ESC及iPSC成功分化出了功能性内耳毛细胞。Mizutari等使用γ-分泌物抑制剂抑制Notch信号通路,刺激支持细胞转变为毛细胞,首次证明成熟哺乳动物的感音毛细胞也能再生。感音毛细胞的损伤导致听力损失,感光细胞的损失则导致视力损失。Meyer等将iPSC分化为视网膜色素上皮细胞,成功治愈1例回旋状脉络膜视网膜萎缩症患者。Singh等将发育中的感光细胞移植到盲鼠眼睛中,能够再次形成视网膜的整个光敏感层,恢复视觉。
2.4.5内分泌系统疾病Tateishi等将正常人iPSC培养成胰岛素分泌型的胰岛细胞,其不仅能分泌C肽和胰高血糖素,而且能通过感受葡萄糖的刺激来调节C肽的分泌。Maehr等用1型糖尿病患者的成纤维细胞来源iPSC分化出了具有胰岛素分泌功能的细胞。这些研究使糖尿病患者特异细胞治疗成为可能。
2.4.6生殖系统疾病Park等将iPSC体外分化并分离得到原始生殖细胞,其与体内分离的原始生殖细胞在基因表达上极相似。Hayashi等将小鼠ESC和iPSC在体外诱导成为原始生殖细胞样细胞并分化为功能正常的和卵子。如果能进一步将人原始生殖细胞体外分化为和卵子,就有望治疗不孕不育症。
2.4.7运动系统疾病杜氏肌营养不良是一种X染色体隐性遗传病,患者早期即出现肌肉无力或萎缩,严重威胁生命安全。Filareto等将杜氏肌营养不良小鼠皮肤细胞重编程为了iPSC,进行遗传修复,再分化成骨骼肌干细胞进行移植治疗,能产生功能性肌肉,并检查到新形成的肌纤维表达修复后的标记,证明了iPSC技术结合遗传修复技术治疗杜氏肌营养不良的可行性。Diekman等利用iPSC在小鼠实验中培育出无再生能力的软骨,有望成为人造软骨组织的来源。
2.4.8肿瘤Chen等用小鼠iPSC培育出了癌症干细胞,并确认其发展成癌细胞的过程。Yang等发现人类iPSC来源的神经干细胞可以靶向肿瘤,或可用于联合基因治疗,抑制肿瘤生长。Vizcardo等从恶性黑色素瘤患者体内提取出T淋巴细胞,诱导出iPSC再分化成为T淋巴细胞,发现这些T细胞能够识别黑色素瘤特异性蛋白黑色素瘤抗原1,继续攻击癌细胞。此方法能够大量培养T淋巴细胞,有望在此基础上开发出治疗癌症的新型免疫疗法。
2.4.9其他人类疾病CCR5(C-Cchemokinereceptortype5)是人类免疫缺陷病毒进入靶细胞的重要辅助受体,缺乏CCR5使人类免疫缺陷病毒不能感染人体。Yao等用锌指核酸酶技术剔除患者iPSC的CCR5基因,并诱导成造血干细胞,为艾滋病的治疗提供一条新的可能途径。Arakaki等将小鼠iPSC与小鼠齿源性上皮细胞共培养,转化为成釉细胞,且含有作为牙釉质成分的成釉蛋白,这对牙齿再生和修复研究至关重要。
1.化学因子(1)酸和碱:酸能水解生物大分子或催化其水解。过氧乙酸是一种常见的抗感染因子,对残留的核酸具有很强的去除作用,而对ECM的影响较小;乙酸会破坏胶原成分,降低ECM的强度,而对硫酸盐黏多糖的影响较小。碱因其完全去除了ECM中的生长因子,严重影响其机械性能,基本只用于早期处理表皮的脱毛。
(2)低渗和高渗溶液:高渗溶液可以分离DNA和蛋白质,低渗溶液可以溶解细胞。为发挥最大作用,经常将低渗和高渗溶液交替使用,但此法耗时长,处理后的组织易水肿,且不能完全溶解掉细胞残余物,还需进一步处理。
(3)洗涤剂:分为离子型、非离子型和两性离子型洗涤剂。通过溶解细胞膜并将DNA从蛋白质中分离,脱细胞效果明显,然而这些洗涤剂会将ECM中的蛋白质成分去除,蛋白质的丢失程度随着洗涤时间的增加而增加。多种洗涤剂同时使用会增加ECM蛋白的丢失,优点是有利于脱细胞之后洗涤剂的去除。与酶相比,非离子型洗涤剂TritonX-100能够更有效的从致密组织中去除细胞成分。离子型洗涤剂十二烷基磺酸钠(SDS)相比于TritonX-100能更好的从致密的组织或器官中去除细胞核成分,同时保持其机械性能;在完全去除细胞核成分中起至关重要的作用,但是会引起一些超微结构的破坏和生长因子的丢失。两性离子型洗涤剂3-[(3-胆固醇氨丙基)二甲基氨基]-1-丙磺酸(CHAPS)对薄的组织(比如肺)作用较强,但是对于较厚的组织,即使与SDS联合使用,脱细胞效果仍然很弱。需要注意的是,脱细胞之后必须将ECM中残余的洗涤剂去除,特别是SDS,它能够穿透入较厚和致密的组织,即使在较低浓度时仍对再种植的细胞显示毒性。
(4)醇类:甘油通过脱水和溶解细胞发挥作用;甲醇和乙醇能使蛋白质沉淀,进而破坏ECM的超微结构。
2.生物因子(1)酶:能够用于脱细胞的酶包括核酸酶、胰蛋白酶、胶原酶、脂肪酶、中性蛋白酶、嗜热菌蛋白酶和α-半乳糖苷酶,去除细胞成分方面有较高的特异性。然而,用单一的酶来完全去除细胞成分难以达到预期的目的,且残留的酶不利于细胞再种植,并且存在诱发不利免疫应答的可能。核酸酶可以裂解核酸序列,可用于去除残余的核苷酸。胰蛋白酶是一种常用的脱细胞因子,然而,ECM中的蛋白质如胶原蛋白对胰蛋白酶的抵抗能力较弱,因此使用时应格外小心。与洗涤剂相比,胰蛋白酶对弹性蛋白和胶原蛋白破坏力较大,脱细胞速度较慢,但能更好的保护糖胺聚糖。胰蛋白酶脱细胞效果及对ECM的影响程度与时间相关,单独使用胰蛋白酶完整脱细胞需要很长的时间。值得注意的是,胰蛋白酶可以破坏组织的超微结构,有利于后续的脱细胞因子的渗透,因此在初始阶段使用胰蛋白酶可以起到较好的作用,特别是要从一些致密的组织中完全去除细胞核。脂肪酶有协助去脂作用。中性蛋白酶的脱细胞效果较好,但会伴随着ECM更大程度的破坏。(2)非酶因子:螯合物如乙二胺四乙酸(EDTA)和乙二醇双(2-氨基乙基醚)四乙酸(EGTA)有助于细胞从ECM蛋白中分离,但是,单独使用螯合物即使通过振荡也难以将表层细胞脱去。因此,它们经常和酶(如胰蛋白酶)或者洗涤剂联合使用。联合使用螯合物与高/低渗溶液脱细胞的效果尚不明确。3.物理和其他因子(1)温度:冻融技术能有效的溶解组织和器官中的细胞,对组织的超微结构仅有轻微影响。单次冻融可以减少不利的免疫应答,如白细胞浸润;应用多次循环冻融对ECM蛋白的含量影响较小。(2)机械振荡法和压力:机械振荡法可通过振荡产生的能量破坏细胞,多与其他方法联合使用,可将细胞从基底膜分离,然而不可避免的造成超微结构和基底膜完整性的破坏。静水压力所需时间较短,在血管或者角膜组织脱细胞时的效果比洗涤剂或者酶更有效,但是冰晶的形成会影响ECM的超微结构。(3)非热力学打孔技术:使用微秒的电脉冲流经组织或者组织中的剩余细胞,可以诱导产生细胞膜表面的微空隙,从而破坏细胞内微环境,继而导致细胞死亡。由于非热力学打孔技术的探针较小,能用它来脱细胞的组织较小,应用明显受限。
二、脱细胞支架的灭菌
脱细胞支架制备成功后将进行系列体内外实验,在此之前对支架的灭菌十分重要,常使用去除热原法来清除残余的内毒素、病毒和细菌DNA。生物支架可以置于酸或者其他溶剂中以达到灭菌的目的,但是该方法渗透能力不强,且会损伤重要的ECM成分;环氧乙烷对ECM的机械性能影响较大,并引起不利的免疫应答,进而影响移植后正常功能的发挥;γ射线、电子束辐射等灭菌方法会改变ECM的超微结构和机械性能;超临界二氧化碳对ECM和支架的机械性能的影响较其他方法小,目前成为一种替代方法。
三、肝脏脱细胞支架的制备方法
脱细胞器官优良的性能为其成功应用于肝脏带来希望。Shupe等首次报道了啮齿类动物肝脏的脱细胞,通过下腔静脉置管,门静脉切断,上腔静脉结扎,PBS去除血管内剩余血液,依次用浓度为1%、2%、3%的TritonX-100各300ml以5ml/min的速度灌注肝脏,以含0.1%SDS的PBS液300ml冲洗。脱细胞肝脏经HE染色,显示完整的ECM网状结构;免疫组化染色表明Ⅳ型胶原和层黏连蛋白均保留,且胶原存在于基质中,而层黏连蛋白存在于血管的基底膜中。将106个大鼠肝脏前体细胞WB344置于RPMI1640培养基中,通过置管的下腔静脉注入肝脏进行再种植,构建出组织工程肝脏。另有文献报道,经门静脉插管以1ml/min灌注梯度浓度的SDS(0.01%、0.1%、1%)各24h,用蒸馏水灌注15min、1%的TritonX-100灌注30min清除剩余的SDS。PBS冲洗1h后,从门静脉注入染色剂可以清楚地观察到完整的血管结构。将其中一叶置于0.1%的过氧乙酸中灭菌。组织学分析显示,在支架中几乎无细胞核结构;免疫组化分析Ⅰ型胶原、Ⅳ型胶原、纤连蛋白、β1层黏连蛋白,结果表明其在ECM的结构和血管基底膜的完整性方面与正常肝脏相当,DNA含量分析证实支架中DNA低于3%。大鼠来源的肝细胞经门静脉以15ml/min灌入,3D动态培养2周,分别于种植后4h、1、2、5d行组织染色,结果表明4h时,大多数细胞存在于血管内或者血管周围,1d和2d时,细胞离开血管,分布到基质中。该文献首次报道了将肝细胞种植到支架上后白蛋白分泌、尿素合成等功能的发挥,再种植成功的肝脏被移植到单侧肾切除的大鼠体内。Baptista等采用小鼠、大鼠、雪貂、兔和猪,分别经由门静脉插入不同尺寸的导管,通过蠕动泵以5ml/min的速度注入总量约为40倍肝脏体积的蒸馏水,后以1%的Triton-X100和0.1%氨水灌注肝脏去除细胞,最后以蒸馏水去除残余洗脱剂。将人脐静脉内皮细胞和人胚胎肝细胞种植到肝脏支架中,同时通过门静脉以3ml/min循环灌注RPMI1640培养基16h,首次证实了人肝细胞前体细胞具有在脱细胞肝脏支架上生存的潜力。功能测定显示,培养液中的尿素和白蛋白水平明显高于单纯将人胚胎肝细胞置于培养液中的方法。另有文献报道一种改良的脱细胞方法,以RPMI1640培养基灌洗10min,再用混有SDS的磷脂酶A2冲洗30-60min,直到组织透明,流出液澄清,再以高渗盐水及核酸酶分别冲洗,直到灌洗液在280nm及260nm的吸光度皆呈阴性,最后以RPMI1640培养基冲洗2h,所制备支架具有将肝脏前体细胞分化成肝细胞和胆管上皮细胞的能力。然而,上述文献都仅限于啮齿类动物,Barakat等采用新的方法制备猪脱细胞支架,并进行人肝细胞种植:以SDS进行去细胞,右前叶作为种植细胞的支架,含有肝细胞生长因子的胚胎肝细胞和胚胎星状细胞作为种植细胞,灌注液中含有肝细胞生长因子和其他所需营养物质,通过测量灌注过程中氧分压、二氧化碳分压、乳酸、葡萄糖、尿素氮和白蛋白量进行肝脏代谢和合成功能的评估。结果表明,再生的肝脏呈现活跃的代谢能力,并保留白蛋白的合成能力,种植细胞分化为成熟的肝细胞。因此,ECM对于细胞的种植至关重要,具有支持细胞生长、促进前体细胞特异性分化的作用。Hammond等通过将肝脏脱细胞支架移植到正常肝脏和部分肝切除的肝脏中,证实了这一观点。首要的观察指标为肝细胞DNA的合成和肝组织渗透进入支架的程度;其次的观察指标为非实质细胞的DNA合成、肝重量的测定、肝功能测定以及移植物周边的细胞生长情况。结果令人振奋,支架种植到正常肝脏4d后,支架周边有更多的肝细胞增殖,7d后更多的肝脏组织渗透进入支架中;部分肝切除术后2d,种植支架的肝脏较单纯部分肝切除的肝脏有更多的肝细胞增殖。
1环境保护的系统性分析
环境保护是全人类共同的话题,在社会快速发展的过程中,环境保护已经成了人们发展的共识。其中环境保护主要是指人们生存环境的保护以及经济的可持续发展,将人与环境之间的关系相互协调在一起,进而解决人们生存发展过程中存在的威胁。环境保护工作包括了多种不同的内容,比如自然环境保护、生态环境保护、地球生物保护等等。在这里我们也可以看出,环境保护是一项系统性较强的工作,所涉及的内容也相对较多,并且在很多领域中也都有所体现,比如自然科学、社会科学、法律、经济等。近年来,工业化快速发展的过程中,环境保护的任务相比以往也有了新的挑战,因此环境保护工作开展的过程中,我们也必须要改进发展,通过先进的环境保护技术的应用,来更好的提高环境保护工作的质量和效率。
2信息技术在环境保护中的应用现状
信息技术的发展为人们的工作生活带来了很大的便利,在环境保护工作中,应用信息技术也能够有效帮助环境保护工作开展。采用新的信息化技术和新的管理方法,环境保护工作的效率和质量都有了大幅提高。而随着环境保护部门各项系统的不断发展完善,新的环境保护系统体系也开始成了目前环境保护工作中必不可少的重要内容。其中很多信息中心都建设了专门的通信网络以及硬件系统和软件系统,同时还有专门的人员来对环境污染的情况进行分析和研究,通过对相关信息的获取来掌握生态环境的保护都需要开展哪些工作,这样也能够最大限度的促进环境保护的预防和改善。
3信息技术在环境保护信息系统的应用
3.1环境保护信息系统的主要结构与功能
环境保护信息系统并不是单独存在的,其中也包括了多方面技术的应用,比如3S技术、模型技术、人工智能技术、互联网技术等等,这些技术的应用不仅影响着整个环境保护信息系统的质量,同时也有助于提高环境保护信息系统的应用质量。在环境保护信息系统中,对于信息的获取、显示以及分析表达等都需要通过信息技术来作为支持,而信息技术的发展也直接的促进了环境保护信息系统的发展,因此,在环境保护信息系统中,我们也必须要最大限度的提高信息技术的发展和应用,这样也才能够更好的促进我国环境保护信息系统的发展。
3.2计算机技术应用于环境保护信息系统的管理
目前,计算机技术也是人们日常生活中必不可少的重要技术,在人们工作、生活的方方面面都有着重要的提现。其中环境保护信息系统在应用的过程中对于信息数据的采集、传输、存储以及使用等都需要通过计算机技术来加以实现,并且在计算机技术应用的过程中,也能够促进环境保护信息系统更好的发展,无论是在对环境保护信息资源的共享上还是提高资源的利用率上也都有着非常明显的作用效果。环境保护信息系统的数据采集、录入、传输、分析、存储、表达和应用,无不需要依靠计算机技术,建立完整的环境保护信息系统,可以增强环境保护信息的共享,提高资源利用率和孤效率。
3.3互联网技术与环境信息系统的融合更能实现环境保护质量的提高
环境保护的目的是促进人类、社会与资源的协调发展,满足当代人的发展又不损害后代的利益,也就是说,环境信息系统获取的环境信息、研究的环境保护对策、环境处理工艺等都需要及时的向大众传播,应用于现实,而互联网的运用不仅可以加速信息的传播,为大众提供快捷、全面的环境信息,提高环境保护信息系统的服务质量和效率,对提高大众参与度也具有不可忽视的作用。
43S技术在环境保护信息系统中的运用
3S技术是指环境保护信息系统中最重要的技术。3S技术是指GIS(地理信息系统)、RS(遥感技术)、GPS(全球定位系统)技术。3S技术结合了空间技术、卫星定位、导航系统、传感技术、通讯技术、计算机技术等多项综合技术,随着信息技术的发展,3S技术的部分功能可以实现融合和集成,对信息的采集、录入、编辑、管理、分析、表达、传播和应用具有重要作用。
4.13S技术利于环境保护信息系统中的模型制作
环境信息的获取,环境保护的规划、决策制定很多时候要依靠合理的模型来作参考。3S技术结合了地理学、城市空间学、环境科学等,通过计算机技术和信息技术能实现地理信息、环境空间的信息的获取、分析、管理和运用,所以,当3S技术和环境模型相融合和集成时,可为大气、水、土壤、城市、人口等的空间分布和要素分析形成点、线、面的空间模拟实体,并且可表现其相关属性,方便分析和决策。
4.23S技术与ES技术结合使环境保护信息系统更加智能化
ES即专家系统,因其强大的定性分析能力,是人工智能近年来被应用的最广泛的一个分支。ES系统的核心问题是系统知识的权威性、简明性和广泛适用性,ES的定性分析能力和3S技术的结合,可以使环境保护信息系统更为准确、便利的进行模型选择、评估、校正,对提高环境信息管理,发挥系统的决策功能具有实际意义。
4.33S技术与仿真系统集合提高了环境保护信息系统的交互性
环境保护面临的问题是非常复杂和广大的,绝大多数需要依靠仿真技术。无论是大的环境问题中复杂环境信息和系统的研究和构建,比如大气、水体、土壤等不同条件下的不同污染物的量控制、研究和治理方法的实施等,还是小的环境问题比如具体的某种污染物的处理工艺的实验、分析,处理系统的审核、改进等,都需要集合模型技术、仿真技术在仿真的环境下进行操作,3S、三维动画、多媒体、多传感器、高分辨显示器等结合营造的仿真环境,可以增强工作人员的环境感,增强人机的交互,大大提高工作效率。
4.43S与在线监测技术融合使环境保护信息系统更具实用性
环境保护信息系统最重要的功能之一是实行环境监测。污染物的浓度、来源、变化等监测数据是后面分析、采取应对措施的依据。3S技术中的GPS定位功能对监测十分必要。
环境保护是涉及多个方面多个领域的系统工程,应用先进的计算机技术,建立环境保护信息系统,对环境保护适应社会发展,与时俱进,提高保护质量和效率具有重要意义,文章对计算机技术在环境保护信息系统中的应用情况作了分析,具有一定的现实意义。
作者:魏东凯 单位:抚顺市顺城区环境监察局
参考文献
1常用缓冲材料
发泡植物纤维是近几年来研究的一个热点,国内外都在努力开发这类材料。国外主要研究不添加化学发泡剂,通过水蒸气的作用发泡,形成颗粒型发泡纸浆;而国内则是采用发泡剂产生发泡,工艺较简单,但是生产和使用后对环境具有隐患,该技术还有待改进和提高。顺应当代环保及绿色理念,许多新型缓冲材料不断产生。成培芳等以淀粉/纤维作为原料制备可降解缓冲包装材料。Shi等和Lu等分别以向日葵茎秆和毛竹竹浆作为开发生物缓冲包装材料的原料,与发泡聚乙烯材料相比较,其物理特性和缓冲系数表现出更好的防护性能,并且安全无污染,可以替代石化产品作为新型的生物缓冲包装材料。
2缓冲材料的减振作用
研究各种缓冲材料的减振效果,有助于设计和开发减振包装。不同缓冲材料类型、缓冲材料的厚度、包装结构吸收振动冲击的能量不同,减振效果表现不同。缓冲材料对果蔬振动保护的作用主要在于缓冲衬垫对冲击能量的吸收、冲击对缓冲衬垫的压缩变形,缓冲材料的种类、厚度、包装结构对其减振效果都有一定的影响。了解各种因素对减振效果的影响对减振包装设计具有很强的理论指导作用。
2.1材料种类
具有高滞后吸收能量的材料,如塑料、纸板、泡沫、植物纤维等,均能够减少运输中振动损伤的程度,但是不同的缓冲材料对果蔬减振效果不同。Raghav和Gupta用宽松的水稻秸秆和纸碎片作为水果层之间的缓冲材料,发现没有缓冲包裹的水果比包裹的水果腐烂速度要快得多,说明水果层之间的缓冲材料有利于减少运输振动损伤。以竹篮为包装材料时芒果损伤程度严重,以泡沫网包裹的瓦楞纸箱对芒果具有最优的保护作用。纸包裹和泡沫网都能大大减少黄花梨的运输振动,泡沫网缓冲材料对于保持黄花梨贮运品质效果更好,而纸包装的黄花梨酶活性比泡沫网箱高出许多,但是硬度反而降低。Jarimopas等发现塑料和纸板均具有降低冲击损伤作用,但是纸板的减振效果优于塑料板,缓冲能量与苹果的大小无关。Chonhenchob和Singh认为纸板缓冲和泡沫网缓冲材料具有相似的保护作用,但是纸板包装更有利于番木瓜的成熟。但是Çakmak等认为在中长期高速运输过程中,纸板包装运输增加了果品内部的温度,导致果品品质的降低,而聚苯乙烯包装盒可以减小这种负面反应。李春飞等也发现,采用瓦楞纸板衬垫、发泡塑料网作缓冲包装时,均可有效地降低苹果损伤率,发泡塑料网对苹果的整体保护特性优于瓦楞纸板衬垫。
2.2材料厚度
不同厚度的缓冲材料产生不同的缓冲作用,在一定范围内,缓冲材料的厚度越大,缓冲吸收能量越大,减振效果好。多层瓦楞纸板能量吸收显著大于单层,多层瓦楞纸板抗冲击能力强,双壁瓦楞纸板箱较单壁有利于减少苹果的损伤率。当缓冲材料厚度超过一临界值时,甜罗望子损伤率不再发生变化,以30%5mm大小的泡沫球与甜罗望子混合在15cm直径、20cm高度的瓦楞纸箱中,甜罗望子的损害率最小。
2.3包装结构
包装结构的不同对缓冲性能也有一定的影响,卢立新等研究表明,瓦楞纸板衬垫与隔档可以减小梨损伤率达15%~25%,瓦楞纸板衬垫、隔档以及网罩的联合包装形式可以使梨损伤率减小35%~45%。实际物流过程中,果品常常堆积多层,研究发现多层苹果的总损失体积与其吸收总能量存在线性关系,而其中的单个苹果不存在线性关系,卢立新建立了多层果实跌落冲击模型。
包装箱所处堆码层数对果实的振动损伤有重要的影响,最上层包装箱内梨果实的损伤最大,最下层梨果实的损伤次之,中间层梨果实的损伤最小;在同一包装箱内,最上层梨果实损伤最大,中间两层次之,最下层最小。但是李春飞等研究发现,瓦楞纸板内部隔档可以减小苹果的损伤率,同一种缓冲包装的中间层苹果的损伤率最大,底层苹果损失率次之,顶层苹果损伤率最小。双壁瓦楞纸板箱较单壁减振效果较好,多层瓦楞纸板作为缓冲介质夹层结构减振效果较好,因为多层波纹夹层结构振动能量吸收显著大于单层结构,多层瓦楞纸板具有重复抗冲击能力,减小果实的振动损伤程度。
模拟振动试验
运输过程中不同路面造成的冲击和振动之间的加速度存在明显差异,在模拟振动损伤时,必须把冲击和振动分开,达到实际振动随机性。通过模拟运输试验,在实验室内再现实际运输环境,通过包装内果蔬的损伤情况来评定包装系统的减振效果,是目前开发或改进缓冲包装,解决果蔬运输损伤的最有效途径。康维民等通过模拟运输振动试验,确定了运输模拟试验的振动频率、振动加速度、振动时间参数。Thompson等通过模拟振动运输开发了一套新的水果包装系统,当结合一个塑料翻盖或瓦楞纸板控制器时,这套包装运输系统几乎可以防止梨的所有振动损伤。
1振动频率
通过模拟实际运输条件,在一定频率范围内进行振动扫描,确定共振频率。黄翔飞等发现,共振频率随着包装箱层数的增加而增大,箱内梨果实的共振频率随着激励源加速度的增加而减小。在相同加速度条件下,振动频率越小,梨越容易产生损伤。因此,果蔬损伤主要产生在低频范围内,Barchi等研究发现,在频率为13-25Hz范围内,枇杷损伤从底部到顶部逐渐加强。Shahbazi等模拟卡车运输西瓜的研究中也发现,在7.49Hz和13.03Hz产生损伤率峰值。但是,Berardinelli等模拟梨运输振动损伤时发现,振动频率与振动加速度会产生交互作用,在出现振动加速度峰值的频率范围内,不同包装箱所处位置所受的振动加速度不同,因此在减振包装设计时,应考虑到多方面的影响因素。
2振动加速度
振动加速度分为稳定振动条件和随机振动条件下的加速度,随机振动条件下进行模拟振动试验,以随机振动加速度进行实际运输时间的振动,水果的振动损伤和实际运输条件下的相同。振动时间和振动加速度具有相关性,为提高试验效率,缩短试验时间,在进行模拟振动试验时,可以通过改变振动加速度来确定振动时间。模拟振动时间越长,梨果实损伤越大。
振动时间对梨果实损伤也受到包装方式的影响,不同包装方式条件下,梨果实损伤随振动时间的变化不同。振动加速度越大,梨越容易受损伤,西瓜振动损伤随着加速度的增加而增加,而且西瓜肉的损害明显高于西瓜皮。货车前后部的振动加速度幅值最高峰分别是0.51和0.83m/s,车厢后部的振动加速度显著高于车厢前部,使得车厢后部的梨损伤要高于车厢前部同样高度堆放的。在车厢内同一位置,顶部塑料箱所受的振动加速度高于底部塑料箱,因此,装载顶部塑料箱内的梨损伤情况显著高于装在底部塑料箱的。但是Zeebroeck等研究发现在高峰值加速度时,位置从高往低,挤压不断加强,因此苹果受到的挤压损伤逐渐增加。
3振动损伤检测
果蔬模拟损伤运输过程中往复振动产生的损伤,可以根据Palmgren-Miner理论和S-N曲线来定量评价。果蔬因振动引起的机械损伤会产生一系列生理异常,影响果蔬的贮藏,如表皮腐烂、呼吸加强、乙烯释放量增多、电导率升高等。Jiang和Shiina研究表明,以表皮破损程度、呼吸和乙烯、电导率和吸光度为指标,可以评价振动引起的果蔬损伤程度。
由于果蔬损伤后能量吸收发生变化,可以通过能量吸收、声波和超声波、X射线、荧光、核磁共振等物理方法来检测振动损伤。通过实验室模拟公路运输果蔬所受的振动,可以从振动频率、振动加速度和振动时间等不同方面来研究果蔬振动损伤模型,有很强的理论指导意义和现实价值,有助于加强贮运中果蔬保鲜和减少果蔬损伤,同时也是减振包装设计步骤中关键的一环。
减振包装设计
减振包装,又称为防振、隔振包装,它是通过在包装内设计具有高阻尼特性的隔振垫层,使外界振动传递到被包装产品后,产品被激励的加速度不超过脆值,减小产品在功能和形态上的损伤。减振包装设计形式大致可以分为两类:一类是以防冲击破损为主的包装设计,应选择具有强压缩能力、高弹性的材料,适用于冲击破坏强度高于振动破坏强度的产品;另一类是以减振为主的包装设计,侧重强衰减能力、高阻尼特性材料,适用于由于长期运输振动易产生疲劳损伤、脆值低的产品,例如振动敏感性强的水果和蔬菜,因此果蔬的减振包装设计常以防振为主要目标。
减振包装设计的核心在于调节防振衬垫的传送率来控制产品的共振响应,产品、容器以及高阻尼性材料构成产品包装系统,可以看作“质量-弹簧系统”模型,当忽略外包装箱的弹性和缓冲材料的质量时,可视为单自由度线性模型。
随着社会经济的快速发展,图书馆逐渐朝着市场化、网络化的方向发展,这就使得图书馆需要处理的信息更加复杂,而要提供的信息也更加广泛。在图书馆情报工作中,为确保各项信息的准确性,必须从海量的信息资源中,剔除无效信息,并对信息资源进行分类处理,从而为人们提供更加方便的服务,信息技术的应用,能有效地帮助图书馆工作人员处理分析信息,极大的减轻了工作人员的工作强度,提高了工作人员的工作效率。
1.2优化图书馆信息资源
目前,很多图书馆都设置有数字图书馆,数字图书馆是一种信息资源共享、馆藏资源数字化的信息系统,但受互联网的冲击,数字图书馆中蕴含着很多无效资源,信息技术的应用,能帮助图书馆工作人员从这些无效资源中找到有用的信息,并通过检索方式,快速的搜索出这些信息资源,极大的提高了信息资源的利用率。
1.3网络环境下图书馆情报工作的新问题
在网络环境下,各种信息资源越来越丰富,网络信息已经远远超过文献信息的增长,在信息爆炸的网络环境中,图书馆情报工作面临的信息数据越来越多,这极大的增加了有用信息的查找难度。网络信息的急剧增加不但没有缓解人们对信息的需求问题,还增大了网络信息与人们个性化信息需求的矛盾,这无疑拯增大了图书馆情报工作的难度。在以往的图书馆情报工作中,人们都是通过情报服务机构的文献检索和传递式服务来满足信息需求的,随着网络信息技术的发展,不同地区、不同行业的人们都能在网络环境中获得信息,从而满足自身的个性化信息需求。但仍有少数人由于习惯了传统的情报信息服务方式,不愿意接受新的情报服务方式,这就对图书馆情报工作的开展造成一定影响。
2图书馆情报信息服务
2.1建立完善的数据库
在网络环境下,网络技术的快速推送功能和大容量储存功能,极大的改变了图书馆原有的服务方式,拓展了图书馆服务功能,为确保图书馆能为人们提供更好的服务,必须建立完善的数据库,及时跟踪各种科研信息、搜集学术论文,并加大对电子出版物网站的关注力度,确保图书馆数据库信息资源的及时性、有效性,从而有效地提高图书馆服务水平。
2.2加大信息收集力度
图书馆情报工作是为了获取更多的情报信息,为读者提供使用,为保证获得的信息及时、有效,图书馆必须采用先进的信息工具进行信息资源收集,并对这些信息进行有效地处理,从而汇集成简洁的情报集,供读使用。在网络环境下,读者所需要的信息资源经常会在各个载体中出现,为满足读者的需求,图书馆需要加大与外在系统的合作,实现资源共享,从而解决传统图书馆情报信息资源储备丰富,但开发不足的现象,这不仅能充分发挥网络优势,还能为读者提供更加全面的信息资源,这对图书馆的现代化发展有很大的帮助。
2.3提高信息处理能力
在网络环境下,图书馆获得的情报信息更加广泛、更加复杂,在这种情况下,图书馆情报人员需要有更加敏锐的信息分析能力和判断能力。因此,图书馆情报人员要不断丰富自身的文化底蕴和知识基础,扩展视野,更快、更准确、更正确的判断情报信息,并从海量的情报信息中,获得有价值的信息,从而适应图书馆信息化发展的需求。
3信息技术在图书情报工作中的应用反思
3.1信息技术的不足
在图书馆情报工作中,信息技术虽然有不可代替的地位,但信息技术也不是万能的,很多情况下,信息技术并不能代替其他工作,如信息技术并不能改善当前图书馆的管理状况,技术大多数是由管理发展出来的,如果管理不到位,就无法为技术的更新提供保障,这也使得信息技术的优势无法充分体现出来;信息技术并不能代替文献信息,文献信息是图书馆的象征,图书馆不能因为吸引广大读者而使用数字图书馆代替文献信息;信息技术的应用是为了促进图书馆的发展,利用信息技术对图书馆情报信息进行分析,从而发现存在的不足,优化图书馆情报工作。
3.2图书馆文化的变化
在图书馆情报工作中应用信息技术时,要与图书馆文化紧密的联系在一起,在网络环境下,随着图书馆情报工作方式的转变,很多工作人员难以适应,如果工作人员没有做好准备,很难改变技术实施过程,这就使得信息技术难以获得预期的效果。因此,在图书馆情报工作中采用信息技术时,要注重信息技术与图书馆文化的有效结合,利用图书馆文化帮助图书馆情报工作人员掌握信息技术,从而为信息技术的实施打下良好的基础。
3: 吉林省林业设计院网络中心网络改造与发展规划.
4: 吉林省林业系统生态信息高速公路构建课题.
二、论文撰写与设计研究的目的:
吉林省的林业分布十分广泛,以长白山系为主要脉络的山地广泛分布各种森林资源,而作为林业及林业环境的发展,林业生态信息则是一个更为庞大的系统,快捷,准确,合理,系统的采集,处理,分析,存储这些信息是摆在我们面前的十分现实的问题.在信息交流的这个世界中,信息好比货物,我们需要将这些货物(信息)进行合理的处理,其中以硬件为主的计算机网络系统是这些货物(信息)交流的"公路"和"处理厂",我做这个题目,就是要为它画出一条"公路"和若干"处理方法"的蓝图.
由于森工集团这样的特定企业,其一,它是一个统一管理的企业,具有集团化的特点,网络的构建具有统一性.其二,它又在地理上是一个分散的企业,网络点也具有分散性.然而,分散中还具有集中的特点,它的网络系统的设计就应该是板块化的.从信息的角度来讲,信息的种类多,各种信息的采集传输处理角度也不尽相同,我们在设计的过程中不仅要考虑硬件的地域布局,也要考虑软件平台的配合.
没有最好,只有更好;更新观念,大步向前.我相信,在导师的精心指导下,经过我的努力,我将为它们创造出一条平坦,宽阔的"高速公路".
1,论文(设计)研究的对象:
拟订以吉林省林业系统为地理模型,以林业网络综合服务为基本需求,以网络拓扑结构为设计方向,以软件整合为应用方法,开发设计一套完整的基于集散集团企业的企业网络系统.
2,论文(设计)研究预期达到目标:
通过设计,论文的撰写,预期达到网络设计全面化,软件整合合理化,网络性能最优化,资金应用最低化,工程周期最短化的目标.
3,论文(设计)研究的内容:
一),主要问题:
设计解决网络地域规范与现有网络资源的利用和开发.
设计解决集中单位的网络统一部署.
设计解决多类型网络的接口部署.
设计解决分散网络用户的接入问题.
设计解决远程瘦用户网络分散点的性能价格合理化问题.
设计解决具有针对性的输入设备的自动化信息采集问题.
合理部署网络服务中心的网络平衡.
优化网络服务系统,营造合理的网络平台.
网络安全问题.
10,基本应用软件整合问题.
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二),论文(设计)包含的部分:
1,地理模型与网络模型的整合.
2,企业内部集中部门网络设计.
3,企业内部分散单元网络设计——总体分散.
4,企业内部分散单元网络设计——远程结点.
5,企业内部分散单元网络设计——移动结点.
6,企业网络窗口(企业外信息交流)设计.
7,企业网络中心,服务平台的设计.
8,企业网络基本应用软件结构设计.
9,企业网络特定终端接点设计.
10,企业网络整合设计.
5,论文(设计)的实验方法及理由:
由于设计的过程并不是工程的施工过程,在设计过程中详尽的去现场建设肯定有很大的难度,也不是十分可行的,那么我们在设计的阶段就应该进行仿真试验和科学计算.第一步,通过小型网络测试软件平台,第二步,构建多个小型网络搭建全局网络模拟环境,第三步,构建干扰源利用小型网络集总仿真测试.
6,论文(设计)实施安排表:
1.论文(设计)阶段第一周次:相关理论的学习研究,阅读参考文献资料,制订课题研究的实施方案,准备试验用网络硬件和软件形成试验程序表及试验细则.
2.论文(设计)阶段第二周次:开始第一轮实验,进行小型网络构建试验,模拟网络服务中心,模拟区域板块,模拟远程及移动网络.
3.论文(设计)阶段第三周次:进行接口模拟试验,测试软件应用平台,完善课题研究方案.
4.论文(设计)阶段第四周次:完成第一轮实验,提交中期成果(实验报告1).
5.论文(设计)阶段第五周次:进行第二轮实验,模拟环境(干扰仿真)实验,提交实验报告2.
6.论文(设计)阶段第六周次:完成结题报告,形成论文.
三,论文(设计)实施工具及参考资料:
小型网络环境,模拟干扰环境,软件平台.
吴企渊《计算机网络》.
郑纪蛟《计算机网络》.
陈济彪 丹青 等 《计算机局域网与企业网》.
christian huitema 《因特网路由技术》.
[美]othmar kyas 《网络安全技术——风险分析,策略与防火墙》.
其他相关设备,软件的说明书.
1、论文(设计)的创新点:
努力实现网络资源的全面应用,摆脱将单纯的网络硬件设计为企业网络设计的模式,大胆实践将软件部署与硬件设计阶段相整合的网络设计方法.
2摊铺机日常技术保养
(1)清洁摊铺机:清除摊铺机表面堆积的泥块、粘沙和沥青等;清除发动机、液压元件和其他部件表面上的尘土、油垢。注意,切勿将污物弄进各加油口和空气滤清器内。
(2)检查并排除各部位的渗漏。
(3)检查摊铺机各零部件的连接和紧固情况,特别是左右履带梁和机架、熨平板、分料装置和刮板输送装置的连接螺栓是否松动或断裂,必要时予以紧固或更换。
(4)检查加热系统的喷头、连接管、气罐和各开关。
(5)检查发动机的机油、燃油、冷却液以及液压油的数量,并按规定加入新油至油标指示刻度。
(6)检查各电气插头是否有松脱现象。
(7)检查螺旋分料装置的叶片是否有裂纹,如有应更换。
(8)检查集中装置中脂是否适量。
3周期性技术保养
(1)磨合50h后的技术保养内容
投入使用前,摊铺机应进行50h的试运行,否则不得投入使用。对50h的磨合运行,应按发动机使用说明书中的有关规定进行。磨合试运行结束后,须按以下内容进行技术保养:
①更换柴油机机油:热机时放尽旧机油,然后注入新机油;经短期运行后,立即检查机油油位是否在规定的高度。②更换分动箱和所有减速机(包括行走、分料、输料减速机)的油;热机时放尽旧油,然后注入新油。③更换机油滤清器滤芯。④更换柴油精滤器滤芯。⑤检查液压油是否达到规定量。⑥检查发动机冷却液液位,如不足应加至规定量。⑦检查加热系统的喷头、连接管、气罐和各开关。⑧检查橡胶履带板是否有裂纹,如裂纹长度大于50mm,必须更换。⑨检查各液压系统是否有渗漏现象,如有须排除。⑩柴油机每工作50h,必须清理一次空气滤清器的滤芯。检查螺旋分料装置的叶片是否有裂纹,如有应更换。检查自动找平装置是否正常。检查各工作缸是否有渗漏现象,如有应排除。
(2)每工作100h的技术保养内容
①进行日常技术保养的全部项目。
②按柴油机使用说明书中100h的技术保养项目进行保养。
(3)每工作200h的技术保养
①重复100h的技术保养内容。
②按柴油机使用说明书中200h的技术保养项目进行保养。
(4)每工作500h的技术保养内容
①重复200h技术保养中的全部项目。
②按柴油机使用说明书中200h的技术保养项目进行保养。
③检查机架、油箱等各重要部件的焊接处有无裂纹,履带梁有无变形。如有予以解决。
④检查各操作开关、操纵监视装置的电气线路是否正常,如损坏须立即修复。
⑤检查分料装置的磨损情况。
⑥检查蓄电池的基本情况,如两极的氧化情况等。
(5)每工作1000h的技术保养内容
①重复200h时技术保养的内容。
②按柴油机使用说明书中200h的技术保养项目进行保养。
③更换液压油滤油器滤芯。
④更换柴油机机油。
除以上介绍的周期性技术保养外,在每年的冬季须对摊铺机进行一次全面的检查维修,必要时更换各减速机和分动箱的油。
4长期停放的技术保养
如果摊铺机将停放3个月,应按下列要求进行保养:
(1)按使用说明书中的要求作长期停放的技术保养,并作防锈处理。摊铺机的随机附件在清洗后在做好防锈处理,并放在干净通风的房内。
(2)长期停放时,主机上只能装有熨平装置、分料装置的基本段部分。将熨平板用木块垫起来。对摊铺机各点加注新油或脂
(3)将机器内外表面、料斗、熨平板、螺旋分料装置和刮板输送装置等清洗干净。应尽量停放在库房;若放在露天,应放在通风处,并用帆布盖好。料斗、找平缸要全部收回,并涂上脂。
参考文献:
[1]LTY7.5全液压摊铺机使用说明书.天津工程机械研究所与石油物探特车厂,1997.
[2]全液压摊铺机关键技术研究.机械部天津工程机械研究所,1995.
①继电保护自动化技术在母线保护中的应用。母线继电保护主要包括两种,即相位对比保护以及差动保护。相位对比保护指的是通过相位的对比方式,提高系统保护母线的可靠性和有效性;差动保护是将特点以及变化都一致的电流互感器设置在母线元件上,当系统母线侧边端子和二次绕组进行连接之后,再将继电保护装置安装在系统母线差动位置。在大电流接地过程中,通过三相连接的方式实现;小电流接地过程中,在相间短路中设置系统母线保护,然后通过两相连接的方式实现。②继电保护自动化技术在发动机保护中的应用。发电机是电力系统的重要组成部分,保证发动机的安全、稳定运行至关重要。继电保护自动化技术在发电机保护中应用主要包括两个方面:一方面,重点保护,如果发电机定子绕组匝间发生短路故障,将会导致发电机的故障部位温度上升,破坏绝缘层,威胁发电机的安全运行,通过在定子绕组内安装匝间保护装置,能够有效的防止定子匝间短路故障的发生;如果发电机的单相接地产生的电流超过规定值,通过安装接地保护装置能够对发电机进行继电保护;通过将发电机中性点、电流、相位进行相互结合,能够形成纵联差动保护,实现对发电机的保护;另一方面,备用保护,过电压保护能够有效的防止发电机自负荷较低的状况下发生绝缘被击穿的现象;过电保护能够有效的实现对外部短路故障的保护,防止发生短路破坏发电机;当发电机定子绕组发生低负荷问题时,继电保护装置能够自动切断电源,并发出相应的报警信号,实现对发电机的保护。③继电保护自动化技术在变压器保护中的应用。变压器是电力系统的重要组成部分之一,对电力系统的运行安全性和稳定性具有非常重要的作用。继电保护自动化技术在变压器保护中的应用主要包括以下几个方面:其一,短路保护,变压器短路保护包括阻抗继电保护和过电流继电保护,阻抗继电保护主要是通过利用变压器阻抗元件产生的保护作用,阻抗元件运行一段时间之后,会自动切断电源,以此实现对变压器的保护;过电流继电保护主要是在变压器电源两边电源和时间元件中安装过电流继电保护装置,电流元件运行一段时间之后,会自动切断电源,进而实现对变压器的保护。其二,瓦斯保护,当变压器的油箱出现问题时,在故障电弧的作用下绝缘材料和油都会发生分解,产生有害气体,通过采用瓦斯保护,当油箱出现上述故障时,能够自动的启动保护动作,将变压器电源切断,同时发出警报信号通知维护人员赶到故障地点进行处理。其三,接地保护,对于不接地变压器保护,应该采取零序电压保护措施;对于直接接地变压器保护,应该采取零序电流保护。④继电保护自动化技术在线路接地保护中的应用。电力系统的线路错综复杂,接地方式也相对较多,因此电力系统的接地方式包括大电流型接地与小电流型接地,当出现大电流接地时,应该立刻切断电源,防止接地故障对电力系统造成的破坏;当发生小电流型接地时,继电保护装置会发出报警信号,电力系统在一定时间内依然可以运行。针对不同的接地故障,应该根据故障状况采取相应的保护措施,具体状况如下所示:其一,零序功率,当电力系统发生接地故障时,零序功率的方向发生变化,零序电流波动相对较小,以此实现对电力接地故障的预测以及保护;其二,零序电流,当电力系统线路发生接地故障时,零序电流会迅速上升,继电保护动作非常敏感,能够及时的采取切断电源的保护措施,对电力系统进行保护;其三,零序电压,电力系统在正常运行时,并不会产生零序电压,如果电力系统发生接地故障,会导致零序电压的产生,继电保护装置能够及时的发出相应的报警信号,同时电网维护人员通过观察电压表数值能够判断系统是否发生接地故障,主要是因为当电力系统发生接地故障时,电压数值会降低。
1.2实例分析
文章以某电网为例,该电网于2010年应用了继电保护自动化技术,2011年4月23日,110kV变压器主变低压侧继电保护动作,1号主变101开关跳闸,2号主变119、131开关过流保护动作跳闸,重合闸动作,合成功,电网维护人员赶到事故现场,设备并无异常,维护人员通过查看跳闸过的线路,两条线路故障都能够合闸成功,但是却导致越级跳闸。通过对故障进行分析,发现为线路故障,开关拒动,处理方法表现为:把故障开关隔离,恢复供电,然后通知检修人员认真检查,查实状况后采取措施进行检修。
2继电保护自动化技术的未来发展趋势
继电保护自动化技术的未来发展趋势主要包括以下几个方面:其一,智能化,近年来,人工智能技术在电力系统继电保护自动化中得到非常广泛的应用,例如模糊逻辑算法、遗传算法、神经网络等,通过将这些人工智能技术应用在继电保护自动化系统中,能够保证继电保护自动化系统正确判别故障,并具有智能化解决复杂问题的能力,进而实现继电保护的智能化;其二,网络化,计算机网络技术在国家经济建设以及能源发展中发挥了至关重要的作用,通过将网络化技术应用在电力继电保护系统中,利用计算机网络能够将主要设备的继电保护装置连接在一起,创建继电保护装置网络,能够显著的提高继电保护的可靠性,因此电力系统继电保护技术的网络化是未来发展的一种必然趋势;其三,计算机化,随着计算机技术的快速发展,自动化芯片控制的电路保护硬件已经从16位单CPU结构发展为32位CPU微机保护结构,显著的提高了继电保护的性能以及响应速度,继电保护自动化系统的计算机化已经成为不可逆转的发展趋势。
传统IT外包向ASP模式转变
实际上,IT外包不是新生事物,它起源于20世纪60-70年代财务与运作领域的专业服务与设施管理服务。20世纪60年代,对外部提供商的使用局限于时间共享与服务处理上,因为当时的计算机既大又昂贵,大多数的公司依靠服务机构、系统商、以及其他专业公司提供设施管理服务。
20世纪70年代开始形成了标准应用软件包的概念。为了解决对IT应用需求的日益增长和IT专业人员的不足,管理者开始依靠合同编程,将企业应用软件的编程外包给第三方,这是20世纪70年代外包的主要形式;20世纪80年代,外包的重点开始转向IT支持的垂直集成。控制从原材料到产品交付的产品开发周期变得越来越重要,IT被认为是一种有价值的内部功能。一般情况下,组织根据定制基础来管理信息系统环境,它们购买标准设备、系统与应用软件以及通信系统,并将它们集成进一种基础设施(对各个组织而言是独特的);20世纪90年代,外包重点在于网络与通信管理、分布式系统集成、应用开发与系统运作。90年代的外包提供商积极将其业务目标放在现场的设施管理上,IT人员由客户向提供商转移,一些提供商购买客户的大型机硬件设备,并现场管理客户的应用服务。当时的系统集成也是一个流行的外包市场,它涉及高度复杂的技术,包括网络管理与电信,同时还有相关的教育与培训。
上述这些外包模式尚未利用因特网或其他网络远程提供应用服务,因此一般被称作传统IT外包模式。从20世纪90年代后期开始,由于网络成本下降、带宽增加、可靠性提高,通过因特网提交应用被普遍采用。ASP模式作为全球信息技术最主要的趋势之一,它通过因特网或专用网,以租用的方式,提供应用服务,它的应用对组织内部的信息资源管理产生了深刻的影响。
ASP模式的内涵
许多学者在研究有关ASP的问题时,采用了美国ASP行业协会对ASP的定义,“ASP具有通过广域网,从一个数据中心为多个实体管理和提交应用服务的能力。”然而,作为一种新兴的IT外包模式,学者们对ASP定义尚未形成一个统一的认识。在笔者从ABI、EBSCOHost、ACM、IEEE、JSTOR、SAGE等文献数据库所收集到的94篇有关ASP研究的文献中,发现有其他11种不同的定义。
通过分析上述定义所使用的关键词(如表1所示),我们可以看出ASP模式所具有的内涵,同时我们也形成一个新的概括性、综合性的ASP定义,即:ASP是通过因特网或其他网络、以租用的方式、根据合同所确定服务级别,向客户提供应用服务的第三方公司;ASP提供多种应用服务供客户选择,客户依据使用量或订阅情况付费,同时ASP集中管理并维护应用与数据,是客户的单一联系点,ASP与客户之间形成一对多的关系。
从更广泛的意义上说,各种服务提供者都适合ASP的一般性分类。包括,管理服务提供商、网络服务提供商、存储服务提供商等,只要他们都能够通过网络提交有价值的服务,并提供相应的技术支持。所提供的服务可能包括:网络、系统基础设施、开发环境、应用、内容、流程支持、流程处理、顾问服务等。许多评论者相信ISP、VAR(增值经销商)和传统的外包提供商将合并到ASP领域。然而,ASP模式是传统IT外包在网络时代的自然演化和创新的结果,有与传统的IT外包模式所不同的特征。
ASP模式的主要特征
ASP与传统外包相比,主要有以下几个方面的特征。
交付方式:ASP是通过因特网或其他网络交付应用服务的,通常是“一对多”的方式;而传统IT外包提供商直接将所开发的软件交付给客户的,以“一对一”的方式交付。
定价方式:ASP模式依使用为基础进行定价,例如,按用户数、交易量、收入比例分成、固定费用等方式进行收费;而对于传统IT外包,客户需要为所获得应用软件付费。
应用所有权:传统IT外包的应用所有权归客户所有;对于ASP模式,应用由提供商提供,客户以租用的方式取得应用服务,所有权归提供商所有,或ASP提供商从软件提供商那里获得软件使用权。另有一种特殊情况是,客户将自身拥有的应用软件托管给ASP提供商,提供商提供相应的应用基础设施和专业技术人员对此应用软件进行维护。
应用与人员位置:ASP的应用服务与数据是通过一个中心位置进行管理的,不在客户所在地点,提供商的专业人员一般也不在客户所处的位置;传统IT外包的应用安装在客户所处位置,提供商的专业人员有些是在客户的位置,有些是集中在提供商的位置。
合同类型:传统IT外包的合同是高度定制化的,而ASP的合同一般是详细规定租用费用和最低服务保证的通用合同(针对ASP的大多数标准应用),但随着对ASP应用的定制化要求的增长,ASP的合同也会有更多的定制化。
客户基础:传统IT外包是在大型外包提供商与大型客户公司之间逐案协商进行的,其主要客户是大企业,而ASP市场的客户主要是一些中小企业,但现在这种情况也逐渐融合,大企业也寻求使用ASP模式。
提供商特征:传统IT外包的提供商主要是在市场中占主导地位的供应商;而ASP模式一开始的提供商主要是新投资成立的公司占主导地位,更多的是针对某一个缝隙市场,但原有IT市场上的大型提供商也正在进入ASP市场。
风险状况:ASP通过因特网提交服务,增加了可用性和响应时间的不确定性,但有些方面的风险更小,例如,客户减少IT投资风险。
组织际关系:传统IT外包的组织间关系比较简单,客户与提供商是“一对一”的关系,ASP模式的组织际关系变得更为复杂,提供商为了其规模经济性,对于同一个应用会尽可能向多个用户提供服务,提供商与客户的关系是“一对多”的关系,除此之外,提供商还需要与其价值链上其他方密切配合,才能向客户提供有质量保证的应用服务。
然而,ASP模式与传统IT外包模式的区别并不是一成不变的,实际上,商务模式是会快速融合与分解的,传统提供商(如SAP、EDS等)也提供ASP方案,以补充他们的产品,一些新兴的ASP提供商也正在赢得一些大客户。甚至以‘一对多’商务模式为特征的最初的ASP概念,也正在与‘一对一’的定制化方式融合,至少对ASP产品与服务的某些方面是这样的。
ASP模式的发展前景及研究视角
近年来,ASP市场得到了快速发展,许多专家认为它将给软件行业与企业计算领域带来重大改变。著名商业作家Carr(2005)在其载于《斯隆管理评论》上、题为“企业计算的终结”一文中宣称:在对内部数据中心投入数百万美元之后,公司可能很快发现已经是要开始关闭这些数据中心的时候了,IT正在从“公司拥有的一项资产“向”公司购买的一项服务”转变。但是,未来ASP的发展仍取决于各种因素的综合影响。一方面,网络技术的发展,包括网络成本的显著降低、网络带宽供应的持续增长、以及网络传输安全性的进步等,是ASP外包模式得以发展的技术条件;另一方面,企业需要对IT应用进行大量的投资,然而由于IT技术与商务环境的不确定性,这种投资具有很大的风险性,通过ASP模式实现IT技术的应用,能够获得成本收益、有效地降低IT投资风险,有利于平衡资金预算,这也是驱动ASP外包模式发展的重要经济因素。
除此之外,IT已成为公司战略的重要组成部分,企业可能没有足够的能力应用新的IT技术维持竞争力,这是驱动其采用IT外包的战略因素;同时,由于外包导致对提供商的依赖性,企业需要考虑与提供商的合作关系、彼此间的信任和协调,这是影响ASP采用的社会因素。因此,对ASP模式的研究需要综合性观点,总体来讲应该包括以下几个视角。
技术视角:目前的IT技术,特别是网络技术,能否满足应用交付所必须的安全性、可靠性、可用性等方面的要求,包括适应这种网络化应用要求的体系结构等。
经济视角:研究如何提供应用与服务,以实现规模经济和范围经济性、降低总体拥有成本。可以应用交易成本理论、成本理论、新古典经济学等方面的理论加以研究。