时间:2023-03-21 17:14:26
导言:作为写作爱好者,不可错过为您精心挑选的10篇药学研究生毕业论文,它们将为您的写作提供全新的视角,我们衷心期待您的阅读,并希望这些内容能为您提供灵感和参考。
文章编号:1673-7717(2008)11-2328-02
慢性阻塞性肺疾病(COPD)是一种常见的呼吸系统慢性疾病。其发病率高,病死率高,社会经济负担重,受到世界各国的重视,因此提高其治疗水平已成为目前研究的焦点之一。COPD属于咳嗽、喘证、痰饮、肺胀等病范畴,对该病的病因、病机、辨证、治疗等方面仍存在不同的认识。现就近几年COPD的中医证候与证型研究作一综述。
1 分 型
焦扬等[1]认为COPD可分为风寒犯肺、风热犯肺、表寒肺热、痰热蕴肺、痰湿阻肺、水凌心肺、肺气虚、脾气虚、肾阳虚、肺阴虚、肾阴虚、血瘀证12个证型。喻清和等[2]认为本病急性期痰热蕴肺、肺肾两虚型多见。缓解期肺脾两虚型为多见,另外还有气虚痰瘀型、肺郁痰瘀、脾肾阳虚型。陈瑾等[3]认为本病稳定期分为肺气虚和脾阳虚、肾阳虚不同阶段辨证论治。李刚等[4]认为主要病理因素为痰浊与瘀血,分证论治分为三大类,痰(痰热郁肺、寒痰留肺、痰瘀互结、痰湿蕴肺)、瘀(痰瘀互结)、虚(肺气虚、脾气虚、肾气虚)。刘书政[5]将其分为5个类型,实证肺风喘证、肺咳喘证,虚证肺肾气虚证,虚实夹杂的肺虚风热证、肺虚痰热证。付林安[6]将本病分为虚、实两端。实是邪气实(外邪与痰浊),分为风寒郁闭、外寒内热、外寒内饮、湿热痰郁、痰浊壅肺、痰饮凌肺。虚是正气虚,分为肺脾气虚、肺阴不足、肺肾气虚、肾阳衰微。
2 证型分布规律
中医证型多为复合型,各证型比例由大到小依次为肺脾气虚、痰瘀阻肺证,肺脾气虚、痰热瘀肺证,气阴两虚、痰热瘀肺证,肺脾肾虚、痰饮瘀肺证,其分布规律体现了“气虚痰瘀”的基本病机[7]。本病并发肺心病的中医证型与病情程度有一定关系,痰浊蕴肺证偏于轻度,痰热壅肺及气阴两虚证偏于中度,阳虚水泛证偏于重度,痰热、痰浊至气阴两虚及阳虚水泛疾病逐渐加重[8]。急性期痰热蕴肺,肺肾两虚型多见,缓解期肺脾两虚型为多见[2]。急性加重期证型发生频率依次为:血瘀证、痰热蕴肺证、表寒肺热证、痰湿阻肺证、风热犯肺证、水凌心肺证;同时合并肺气虚证、脾气虚证、肾阳虚证、肾阴虚证等虚证。缓解期虚证的发生频率依次为:肺气虚证,肾阳虚证,肾阴虚证,脾气虚证,肺阴虚证。实证为:血瘀证,痰湿阻肺证。肺、脾、肾三脏气虚及阳虚为主,阴虚者相对较少[9]。
3 证型与生存质量
COPD患者生存质量测量总评分很低,各维度受损程度由大到小依次为躯体维度、心理维度、社会维度、物质维度。瘀血证、痰气互结、寒饮停肺、痰热雍肺、气阴两虚、肺气虚、肺肾气虚、肺脾气虚、肺肾阴虚各证候患者生存质量均有不同损害,血瘀证的生存质量总分最低[10]。
4 证型的现代化研究
COPD从肺虚肺脾两虚肺肾两虚肺脾肾俱虚,病情加重,病程延长;慢性支气管炎并发阻塞性肺气肿者及发展为慢性肺原性心脏病者比例增加;纤维蛋白原及D-二聚体升高;肺通气功能下降,RV/TLC升高,呼吸衰竭发生率升高,PaO2下降,PaCO2升高,肺肾两虚、肺脾肾俱虚型间差异不显著,余各组间均差异显著[11]。呼吸肌力和驱动指标比较,COPD总体样本和不同中医证型COPD患者的大部分Pm ip、PmEp和P0.1等指标均
明显低于正常人。各中医证型患者常有肺通气、灌注血流和呼吸肌力、驱动指标减退表现,特别是脾阳虚证和肾阳虚证患者,肺气虚证损害较轻[3]。FEV1/FVC与气虚、肾阳虚、肺气虚相关;气虚和HA、血瘀与LN、痰阻与TNF均有一定相关性;气虚、血瘀、痰阻与生活质量四项指标均相关;中医各证候之间相关。治疗前后FEV1/FVC,FEV1/ FEV1Pre与TNF- a、IL-1,IL-8相关;HA与LN、PCIII相关[12]。无气虚组CODP患者肺功能优于气虚组,气虚组细分为肺气虚、肺脾气虚、肺肾两虚及肺脾肾虚四型间肺功能分布无显著差异。淋巴细胞检测提示稳定期气虚患者细胞免疫功能比无气虚患者更低下[13]。COPD肺气虚痰浊型和肺气虚痰热型VC、MVV、RV/TLC值与正常对照组比较有显著差异,痰浊型通气量显著低于痰热型,通气障碍更明显。肺气虚组和脾气虚组患者FVC、FEV1、FEV1/FVC、MVV均明显下降,脾气虚组下降更明显。痰热壅肺型与WBC总数正相关,与RDW负相关;阳虚水泛型与Hb正相关,与MEF75、PEF、MCH负相关;脾虚型与MEF25、NMO负相关;肾虚型与RDW正相关,与K+浓度负相关。虚寒型、痰湿型COPD患者血浆皮质醇水平与健康人差异无显著性,虚热型患者显著升高。肺虚组与肺虚夹实证组外周血OKT3、OKT4和OKT4/OKT8比值小于肺实证组,OKT8无明显差异,肺气虚组患者局部支气管肺泡灌洗液OKT4/OKT8的比值低于肺实证组,OKT8显著高于肺实证组。肺气虚组外周T淋巴细胞亚群各项指标与正常对照组比较有显著差异,通过相关分析表明肺气虚组局部
OKT8与AM内CAMP、CGMP增加有关[14]。
5 总 结
近年来对COPD中医辨证论治及与现代化指标的关系研究众多,取得了很多研究成果。但仍存在一些问题:对证型概念、内涵、外延缺乏统一的认识;证型诊断的标准不统一;中医病机、证型与西医学理化检查的相关性有待进一步验证、研究;临床与实验相脱节。因此,在今后的研究过程中,科学地制定辨证论治的量化标准,规范实验研究,有效指导临床是我们目前应积极努力的目标。
参考文献
[1] 焦扬,傅开龙.慢性阻塞性肺病常见症状及证候调查[J].北京中医药大学学报,2006,29(7):497.
[2] 喻清和,邱志楠.慢性阻塞性肺疾病的辨证治疗浅析[J].中医药学刊,2003,21(7):1190.
[3] 陈瑾.COPD患者中医辨证分型与有关指标相关性分析[J].辽宁中医药大学学报,2006,8(4):7.
[4] 张伟,李刚,张心月,等.从痰、瘀、虚辨治慢性阻塞性肺疾病[J].中医药信息,2006,23(5):6.
[5] 刘书政.COPD分型辨证施治[J].医用放射技术杂志,2004(2):F003.
[6] 付林安,付涛,魏海婷.慢性支气管炎、肺气肿的辨证分型治疗[J].河北中医,2005,27(10):745.
[7] 胡旭贞.慢性阻塞性肺病急性加重期中医证候的初步研究[C].广州中医药大学硕士研究生毕业论文集,2006.
[8] 李淑芳,熊旭东.COPD并发肺心病中医证型与病情程度相关性的对应分析研究[J].中国中医急症,2007,8:55.[9] 傅开龙.慢性阻塞性肺病中医证候学探讨[C].北京中医药大学硕士研究生毕业论文集,2005.
[10] 余学庆,李建生,李力.慢性阻塞性肺疾病患者生存质量与中医证候的关系[J].上海中医药杂志,2004,38(1):9.
[11] 刘丽.COPD稳定期中医证型与相关现代医学指标关系的研究[C].北京中医药大学硕士研究生毕业论文集,2007.
2加强学科实验教学平台建设,凸显生物技术药物的学科特色
生物技术药物课程有着突出的专业特色。经过我们的不断努力,课程使用的自编教材入选2011年国家教育部高等教育精品教材,开设了药学本科学生的生物技术药物亲和层析纯化的实验课程。让本科学生动手操作整个实验过程,从融合蛋白的表达、超声破碎工程菌、初步分离纯化蛋白到用亲和层析的方法获得较纯的药用蛋白。经过统筹规划,生物技术药物模块成为本科生毕业前最后的学习阶段所开展的药学专业多学科综合性实验教学课程重要内容之一。从基因工程重组蛋白的表达、纯化、活性鉴定,让学生完整地体验基因工程药物的设计与研制,了解作为原料药的重组蛋白药物的制备流程。随后,与药学专业其他学科相衔接,将获得的重组蛋白进行质量评价、剂型工艺研究等,推动学生综合运用前期学习过的理论知识和实验技能解决实际问题,培养学生分析问题、解决问题和动手实践的能力。
3强化多学科、多层次教育合作,培养本科生创新能力
在校研究生院的领导和支持下,本教研室建设了开放性的研究生创新实验中心。依托教学科研资源优势,我们结合实际,设计并开展了多项本科生的第二课堂活动,丰富并拓展了本科生开放性实验教学,向学生提供了实践和自我展示的机会。
3.1组织文献汇报,培养本科学生获取新知识的能力文献检索、阅读及综述是培养科研能力的基础实践。研究生通过坚持阅读大量文献资料,了解和追踪本专业领域的最新研究动态,初步具备了独立开展课题研究的能力。而本科生的基础知识相对薄弱,可自由支配的时间较少,因此我们研究制定了适合他们的文献汇报方式。通过引领学生阅读文献,分析实验背景、实验目的、实验方法和实验结论,领悟研究者的原创性思路和严谨的实验设计,让学生受益良多。而让学生制作PPT与研究生一起进行汇报来检验文献阅读的成效,让其意识到自己的差距和不足,极大地激发了他们的竞争意识和学习热情。学生文献阅读能力逐渐增强,不仅阅读的篇幅越来越长,而且还能够提出一些颇有见地的问题。此外,学生的多媒体制作、分析归纳和语言表达等多方面的能力也得到了快速提高,心理素质得到了锻炼,面对导师提问和应对各种突况更加自如。实践证明,文献汇报会在拓宽本科生的知识方面和培养创新能力方面是一种行之有效的方法。
结合医药行业特点,中国药科大学探索出一条校企联合的人才培养模式。目前,中国药科大学共有89名基地班在读研究生在企业做硕士论文。
中国药科大学副校长姚文兵认为,校企联合培养的研究生是应用型高级技术人才培养模式的一种创新。他们既具备较强的基础知识,又具有创新创业能力,在企业能留得住,用得上,干得好。这种模式可以在应用学科领域广泛推广。
到企业做论文
从本科入校,张阿琴他们就是学校的“宝贝”,开始吃“小灶”。
基地班是单招班,两个班共60人,教学管理由副校长直接负责。校内选拔名师组成两个国家级教学团队做基地班任课老师,课程设置也与其他班不同,有三分之一课程重新设计,有15门是精品课程。
实践是基地班培养方案的重点。学校要求,基地班本科阶段实践教学占总学时60%以上。早在本科一二年级时,张阿琴就要和同学去企业参观学习,做调研;三年级要去企业实训3个月,学生进入企业研发中心、GMP车间、质量部等多个部门轮岗,并以完成一项技术工艺改造作为本科毕业论文。
三年级本科毕业,按照综合成绩排名,60%的学生直接保研。研究生阶段,张阿琴选择继续留在圣和药业,鉴于她在企业的出色表现,企业也选择了她。企业提供的课题是对该公司一个中药制剂进行主要成分分析与药效评价。她有两个导师,“企业导师”指导做实验,遇到疑难问题找“学校导师”。
一开始,学生、家长都不理解,到企业做论文能保证论文质量吗?
生命科学与技术学院副院长周长林教授说:“研究生现在属于应用型人才,博士生才是研究型人才。
研究生就业的方向大多数是面向企业,在企业做课题更适应学生今后的发展。”
“基地班的学生研究生论文都是结合企业做的科研项目,既有创新,又很实用,比校内培养研究生的要求更高。”中国药科大学教务处处长徐晓媛说,联合培养的企业都是医药行业世界500强、国内50强,拥有雄厚的科研实力,能为学生提供具有创新点的科研课题,导师都具有博士、副研究员以上的学历和职称。
“他们毕业后都能独当一面”
中国药科大学的目标是,把基地班学生培养成医药行业应用型高级技术人才。
对于基地班保研,学校制定了一套新的选拔评价机制,学习成绩只占一半,综合素质占20%,企业创业实习成果占30%。学校按照自由申报、综合排名、企业面试等程序,确定校企联合培养对象。
联合培养是个新事物。对企业来说,他们更习惯于招收现成的技术人员。“能为企业解决科研难题,能加快科研成果转化,可以培养企业急缺人才……”学校到各家合作企业游说,陈述联合培养的种种好处,几家企业终于答应尝试。
一家企业接收了一批学生实训。第一天,学生弄断一根线,企业负责人很不高兴,当天就想把学生退回去,但3个月下来,企业就想把学生都留下来——企业很看重学生的团队精神、协调能力,从产品研发、生产、申报等多个环节锻炼学生能力,希望他们毕业后能留在企业工作。
在联合培养中,一批优秀学生涌现出来。孙晓泉,是上海中科合臣股份公司联合培养生,在读期间承担了12项研发课题和1项技术改造项目,其中3个项目已经完成研发和中试,一年就为企业创收近千万元,孙晓泉毕业后担任了该公司研发主管。夏鸣,江苏先声药业联合培养生,完成一个三类新药研究项目,成为企业科研骨干。
目前,基地班已经有56名研究生毕业,大多数留在企业成为技术骨干。先声药业陈荣博士说:“他们毕业后都能独当一面,完全可以单独组建一个实验室。”
高校企业学生“三赢”
联合培养研究生,企业提供经费、场地、科研课题。看起来,企业吃亏了,实际上,许多老师因为学生进入企业,和企业有了更深层次的接触交流,成为企业高参。
学校成了企业的智囊团和人才库,校企合作迈上了一个新台阶。比如,周长林教授的一名研究生在南通秋之友生物科技有限公司做核苷酸的研究,他也在该公司有自己的科研项目。
二、结果
1.三类核心期刊中动物实验期刊数及其中动物实验论文数 由表1可见该三类期刊中动物实验研究论文较多。基础医学类占期刊总数85,医药类、综合类分别占85、72,平均80。该类期刊中动物实验论文数占论文总数:基础医学为50、医药28、综合类35,平均39。
2.论文中各种实验动物分布 从表2可知我国实验动物研究使用了大鼠、小鼠、兔、豚鼠等10余种,其中大鼠使用分布最高,小鼠次之,兔、豚鼠、犬使用也较常见。
3.论文书写中获得资助情况 各类研究占比例最高的是未注明资助的项目,为53.1,其次为国家级资助项目、省部级资助项目、军队、高等院校资助项目(见表3)。
4.论文中写明动物级别次数及比例、动物来源数及比例 1617篇论文中629次使用动物,多数能写明动物种类、体重、性别、数量,有366次写明了动物来源(约58),仅有38次(约6)写明了动物级别[2],其中普通动物(一级动物)7次,清洁级(二级动物)17次,无特殊病原体动物(三级动物)16次,无菌级(四级)0次。
三、讨论
21世纪是一个充满创新的信息时代,作为信息传播媒介的科技期刊更是一种多功能的复合型信息传播工具,是直接地、系统地传播科技知识和创新成果的载体。实验动物是医学研究的基础和支撑条件,也是衡量一个国家生命科学技术发展水平的重要标志。十几年来我国医学实验动物事业在法规的制定、科学管理、专业建设、科研水平、动物质量等方面都有了很大的发展和提高,但仍存在着差距。基础医学、药学、综合医学是医学中使用实验动物较多的学科,通过20__年发行的在各专业享有较高声誉的核心期刊中相关信息的分析,注意到以下几方面的问题:
1.正确认识实验动物科技工作的重要性 从我们的分析中可见,基础医学、药学、综合性医学期刊中涉及实验动物的期刊数、论文数和比例都很高,平均为80、39。可见作为重要的基础学科之一的实验动物学起着举足轻重的作用。下个世纪,人与自然、人与健康的诸多问题在某种程度上,要靠生命科学研究来解决。在世纪之交的当今世界,要在生命科学研究领域中做出具有国际先进水平的科技成果,就要充分认识实验动物工作对科研工作的重要性,加强实验动物工作,使实验动物科学水平更好地适应生命科学发展的需要。
【关键词】 菊科;还阳参;化学成分
abstract:objective to study the chemical constituents in crepis turczaniowii c. a. mey. method the constituents were isolated and purified by column silica, polystyrene resin ra and polyamide columbine chromatography, and the structures were identified by physicochemical data, ms and nmr. result two compounds were obtained in the petroleum ether fractions as ω-taraxasteryl acetate (ⅰ) and β-sitosterol (ⅱ), and one compound was obtained in the n-buoh fractions as phillyrin (ⅲ). conclusion all above compounds are obtained from the plants of crepis turczaniowii c. a. mey. for the first time. ⅲ is isolated from crepis l. for the first time.
key words:compsitea;crepis turczaniowii c. a. mey.;chemical constituent
还阳参crepis turczaniowii c.a.mey.为菊科还阳参属植物,别名屠还阳参、驴打滚儿草,多年生草本植物,生长于山坡、路旁,主要分布在山西、内蒙古[1]一带,资源丰富,为民间习用草药。其味苦,性微寒,具有止咳平喘、清热降火、益气之功效,用于治疗支气管炎、肺结核、喘息性慢性支气管炎等疾病。有关其化学成分及生物活性,未见任何文献报道。药效学实验研究表明,还阳参全草的石油醚提取物能减少小鼠咳嗽次数,并能延长小鼠的咳嗽潜伏期,有明显的止咳作用;正丁醇提取物能保护组胺和乙酰胆碱对豚鼠引起的哮喘,具有平喘作用[2]。为了探寻其止咳平喘作用的物质基础,本实验对还阳参石油醚提取物和正丁醇提取物进行了化学成分的研究,结果从石油醚部分分离得到两个化合物,分别为伪蒲公英甾醇乙酸酯(ω-taraxasteryl acetate,ⅰ)、β-谷甾醇(β-sitosterol,ⅱ);从正丁醇部分分离到一个化合物,鉴定为连翘苷(phillyrin ,ⅲ),化合物ⅰ、ⅱ、ⅲ都是首次从植物还阳参中分离。
1 实验材料
yanaco显微熔点测定仪(未校正);瑞士bruker ifs-55型红外分光光度计;瑞士bruker-arx-300型核磁共振仪;美国菲尼根lcq-ms质谱仪。聚酰胺(柱层析用,80~100目,浙江台州市路桥四甲生化塑料厂)、大孔吸附树脂(d-101型,16~60目,天津农药股份有限公司树脂分公司)、硅胶(柱层析用,160~200目,青岛海洋化工有限公司)。其他试剂均为分析纯。还阳参药材采集于山西省山阴县(采集时间8-9月份),
经山西省药品检验所高天爱主任药师鉴定为菊科植物还阳参crepis turczaniowii c. a. mey.的全草。
2 提取分离
还阳参粗粉4 kg,以70%的乙醇加热回流提取3次,合并提取液,减压浓缩得到浸膏。用适量水分散,依次用石油醚、醋酸乙酯和正丁醇萃取,减压回收溶剂并浓缩,分别得到石油醚部分(99 g)、醋酸乙酯部分(48.6 g)、正丁醇部分(114.5 g)。取石油醚部分20 g,加乙醚适量使溶解,用硅胶拌匀,乙醚自然挥干,上硅胶柱,以石油醚-醋酸乙酯梯度洗脱,得3个流份,再经反复硅胶柱层析分别得化合物ⅰ(30 mg)、ⅱ(20 mg)。取正丁醇部分10 g,加水搅拌,使混悬,静置2 h,取上清液,加入处理好的d-101型大孔吸附树脂柱,依次以水、30%、60%、95%的乙醇洗脱,紫外检测器跟踪检测,收集洗脱液,减压回收溶剂,得到4个不同浓度乙醇洗脱流分,将其中30%乙醇洗脱流份经聚酰胺柱层析和反复硅胶柱层析,得到化合物ⅲ(40 mg)。
3 结构鉴定
化合物ⅰ为无色针状结晶(醋酸乙酯),mp 238~240℃, libermann-burchard反应阳性,tlc喷10% h2so4,加热后显紫红色。易溶于氯仿、乙醚,微溶于甲醇、丙酮。irvkbrmax cm-1:1 731、1 247、2 943、2 850、1 640 cm-1。1h-nmr(cdcl3)δ:4.46 (1h,t,c21-h),2.03(3h,s,ch3-co),1.05,0.995,0.956,0.922, 0.895,0.826,0.748(21 h,m,7×ch3)。ei-ms(m/z):468(m+)、453(m-ch3)、408(m-ch3co-h2o)、393、249、204、189。与伪蒲公英甾醇乙酸酯对照品薄层色谱rf值[3]及显色行为一致。综合分析以上数据,并结合文献[4-5]对照,确证化合物ⅰ为伪蒲公英甾醇乙酸酯。
化合物ⅱ为无色针状结晶(石油醚-氯仿),易溶于氯仿、乙醚,mp137~138 ℃,libermann-burchard 反应阳性。在数种不同展开剂条件下进行薄层层析,其rf值与β-谷甾醇对照品一致,并且与对照品混合后展开,只显示一个斑点。综合上述分析,故鉴定该化合物为β-谷甾醇。
化合物ⅲ为白色粉末,mp 148~150 ℃,molish反应阳性,不溶于氯仿,微溶于甲醇,易溶于热甲醇。该化合物经酸水解后,pc鉴定有葡萄糖。irvkbrmaxcm-1:3412,2923,2800,1744, 1614,1516,1448,1410,1261,1161,1075,1036,914,817。fab- ms m/z(%):533[m-1],372[m-glc]+。1h-nmr(c5d5n)δ:8.7 (1h,s,ar–h),7.6-6.9(6h,m,arom h),3.75-3.68(9h,s,2o ch3), 4.66(1h,d,j=6.9hz,glc-1h)。13c-nmr(c5d5n)δ:132.2 (c-1), 136.3(c-1'),110.5(c-2),111.1(c-2'),148.0(c-3),149.0(c-3'),147.5(c-4,c-4'),112.4(c-5),116.3(c-5'),118.4(c-6), 119.1(c-6'),82.3(c-7),87.9(c-7'),50.5(c-8),55.2(c-8', och3),71.3(c-9,c-9'),55.9(2o ch3),glc:102.3(c-1),74.9 (c-2),78.6(c-3),70.0(c-4),78.9(c-5),62.0(c-6)。化合物ⅲ的13c-nmr和1h-nmr波谱数据与文献[6]的连翘苷的数据比较,两者基本一致。因此鉴定化合物ⅲ为连翘苷。
【参考文献】
[1] 《全国中草药汇编》编写组.内蒙古中草药[m].北京:人民卫生出版社,1985.
[2] 刘振权.还阳参有效部位止咳平喘作用的研究[d].山西省中医药研究院硕士研究生毕业论文,2002.5.
[3] 凌 云.中药蒲公英的理化鉴别研究[j].西北药学杂志,1999,12(14):250.
[4] p l majumder.chemical constituents of launaea nudicaulis:c-13 nuclear magnetic resonance spectroscopy of taraxasterenes and pseudo-taraxasterenes[j].j indian chem soc,1982,7:881-883.
[5] 凌 云.蒲公英三萜类化学成分的研究[j].中草药,1998,29(4):224.
[6] 石 钺.银翘散抗流感病毒有效部位群化学成分的分离与鉴定[j].中国中药杂志,2001,28(1):43-46.
【摘要】 目的 研究还阳参crepis turczaniowii c.a.mey.全草的化学成分。方法 采用硅胶、大孔吸附树脂及聚酰胺层析柱进行分离和纯化,通过理化、质谱及核磁共振等现代波谱技术鉴定化合物结构。结果 从还阳参石油醚部分分离得到2个化合物,分别鉴定为伪蒲公英甾醇乙酸酯(ⅰ)、β-谷甾醇(ⅱ);从其正丁醇部分分离到1个化合物,鉴定为连翘苷(ⅲ)。结论 化合物ⅰ、ⅱ、ⅲ均为首次从该植物中分离得到,ⅲ为首次从还阳参属植物中分离得到。
【关键词】 菊科;还阳参;化学成分
study on chemical constituents in crepis turczanilwii
ni yan, lu fang-jin, hao xu-liang, et al
shanxi academy of tcm, taiyuan 030012, china
abstract:objective to study the chemical constituents in crepis turczaniowii c. a. mey. method the constituents were isolated and purified by column silica, polystyrene resin ra and polyamide columbine chromatography, and the structures were identified by physicochemical data, ms and nmr. result two compounds were obtained in the petroleum ether fractions as ω-taraxasteryl acetate (ⅰ) and β-sitosterol (ⅱ), and one compound was obtained in the n-buoh fractions as phillyrin (ⅲ). conclusion all above compounds are obtained from the plants of crepis turczaniowii c. a. mey. for the first time. ⅲ is isolated from crepis l. for the first time.
key words:compsitea;crepis turczaniowii c. a. mey.;chemical constituent
还阳参crepis turczaniowii c.a.mey.为菊科还阳参属植物,别名屠还阳参、驴打滚儿草,多年生草本植物,生长于山坡、路旁,主要分布在山西、内蒙古[1]一带,资源丰富,为民间习用草药。其味苦,性微寒,具有止咳平喘、清热降火、益气之功效,用于治疗支气管炎、肺结核、喘息性慢性支气管炎等疾病。有关其化学成分及生物活性,未见任何文献报道。药效学实验研究表明,还阳参全草的石油醚提取物能减少小鼠咳嗽次数,并能延长小鼠的咳嗽潜伏期,有明显的止咳作用;正丁醇提取物能保护组胺和乙酰胆碱对豚鼠引起的哮喘,具有平喘作用[2]。为了探寻其止咳平喘作用的物质基础,本实验对还阳参石油醚提取物和正丁醇提取物进行了化学成分的研究,结果从石油醚部分分离得到两个化合物,分别为伪蒲公英甾醇乙酸酯(ω-taraxasteryl acetate,ⅰ)、β-谷甾醇(β-sitosterol,ⅱ);从正丁醇部分分离到一个化合物,鉴定为连翘苷(phillyrin ,ⅲ),化合物ⅰ、ⅱ、ⅲ都是首次从植物还阳参中分离。
1 实验材料
yanaco显微熔点测定仪(未校正);瑞士bruker ifs-55型红外分光光度计;瑞士bruker-arx-300型核磁共振仪;美国菲尼根lcq-ms质谱仪。聚酰胺(柱层析用,80~100目,浙江台州市路桥四甲生化塑料厂)、大孔吸附树脂(d-101型,16~60目,天津农药股份有限公司树脂分公司)、硅胶(柱层析用,160~200目,青岛海洋化工有限公司)。其他试剂均为分析纯。还阳参药材采集于山西省山阴县(采集时间8-9月份),
经山西省药品检验所高天爱主任药师鉴定为菊科植物还阳参crepis turczaniowii c. a. mey.的全草。
2 提取分离
还阳参粗粉4 kg,以70%的乙醇加热回流提取3次,合并提取液,减压浓缩得到浸膏。用适量水分散,依次用石油醚、醋酸乙酯和正丁醇萃取,减压回收溶剂并浓缩,分别得到石油醚部分(99 g)、醋酸乙酯部分(48.6 g)、正丁醇部分(114.5 g)。取石油醚部分20 g,加乙醚适量使溶解,用硅胶拌匀,乙醚自然挥干,上硅胶柱,以石油醚-醋酸乙酯梯度洗脱,得3个流份,再经反复硅胶柱层析分别得化合物ⅰ(30 mg)、ⅱ(20 mg)。取正丁醇部分10 g,加水搅拌,使混悬,静置2 h,取上清液,加入处理好的d-101型大孔吸附树脂柱,依次以水、30%、60%、95%的乙醇洗脱,紫外检测器跟踪检测,收集洗脱液,减压回收溶剂,得到4个不同浓度乙醇洗脱流分,将其中30%乙醇洗脱流份经聚酰胺柱层析和反复硅胶柱层析,得到化合物ⅲ(40 mg)。
3 结构鉴定
化合物ⅰ为无色针状结晶(醋酸乙酯),mp 238~240℃, libermann-burchard反应阳性,tlc喷10% h2so4,加热后显紫红色。易溶于氯仿、乙醚,微溶于甲醇、丙酮。irvkbrmax cm-1:1 731、1 247、2 943、2 850、1 640 cm-1。1h-nmr(cdcl3)δ:4.46 (1h,t,c21-h),2.03(3h,s,ch3-co),1.05,0.995,0.956,0.922, 0.895,0.826,0.748(21 h,m,7×ch3)。ei-ms(m/z):468(m+)、453(m-ch3)、408(m-ch3co-h2o)、393、249、204、189。与伪蒲公英甾醇乙酸酯对照品薄层色谱rf值[3]及显色行为一致。综合分析以上数据,并结合文献[4-5]对照,确证化合物ⅰ为伪蒲公英甾醇乙酸酯。
化合物ⅱ为无色针状结晶(石油醚-氯仿),易溶于氯仿、乙醚,mp137~138 ℃,libermann-burchard 反应阳性。在数种不同展开剂条件下进行薄层层析,其rf值与β-谷甾醇对照品一致,并且与对照品混合后展开,只显示一个斑点。综合上述分析,故鉴定该化合物为β-谷甾醇。
化合物ⅲ为白色粉末,mp 148~150 ℃,molish反应阳性,不溶于氯仿,微溶于甲醇,易溶于热甲醇。该化合物经酸水解后,pc鉴定有葡萄糖。irvkbrmaxcm-1:3412,2923,2800,1744, 1614,1516,1448,1410,1261,1161,1075,1036,914,817。fab- ms m/z(%):533[m-1],372[m-glc]+。1h-nmr(c5d5n)δ:8.7 (1h,s,ar–h),7.6-6.9(6h,m,arom h),3.75-3.68(9h,s,2o ch3), 4.66(1h,d,j=6.9hz,glc-1h)。13c-nmr(c5d5n)δ:132.2 (c-1), 136.3(c-1'),110.5(c-2),111.1(c-2'),148.0(c-3),149.0(c-3'),147.5(c-4,c-4'),112.4(c-5),116.3(c-5'),118.4(c-6), 119.1(c-6'),82.3(c-7),87.9(c-7'),50.5(c-8),55.2(c-8', och3),71.3(c-9,c-9'),55.9(2o ch3),glc:102.3(c-1),74.9 (c-2),78.6(c-3),70.0(c-4),78.9(c-5),62.0(c-6)。化合物ⅲ的13c-nmr和1h-nmr波谱数据与文献[6]的连翘苷的数据比较,两者基本一致。因此鉴定化合物ⅲ为连翘苷。
【参考文献】
[1] 《全国中草药汇编》编写组.内蒙古中草药[m].北京:人民卫生出版社,1985.
[2] 刘振权.还阳参有效部位止咳平喘作用的研究[d].山西省中医药研究院硕士研究生毕业论文,2002.5.
[3] 凌 云.中药蒲公英的理化鉴别研究[j].西北药学杂志,1999,12(14):250.
【关键词】 菊科;还阳参;化学成分
Abstract:Objective To study the chemical constituents in Crepis turczaniowii C. A. Mey. Method The constituents were isolated and purified by column silica, polystyrene resin RA and polyamide columbine chromatography, and the structures were identified by physicochemical data, MS and NMR. Result Two compounds were obtained in the Petroleum ether fractions as ω-taraxasteryl acetate (Ⅰ) and β-sitosterol (Ⅱ), and one compound was obtained in the n-BuOH fractions as phillyrin (Ⅲ). Conclusion All above compounds are obtained from the plants of Crepis turczaniowii C. A. Mey. for the first time. Ⅲ is isolated from Crepis L. for the first time.
Key words:Compsitea;Crepis turczaniowii C. A. Mey.;chemical constituent
还阳参Crepis turczaniowii C.A.Mey.为菊科还阳参属植物,别名屠还阳参、驴打滚儿草,多年生草本植物,生长于山坡、路旁,主要分布在山西、内蒙古[1]一带,资源丰富,为民间习用草药。其味苦,性微寒,具有止咳平喘、清热降火、益气之功效,用于治疗支气管炎、肺结核、喘息性慢性支气管炎等疾病。有关其化学成分及生物活性,未见任何文献报道。药效学实验研究表明,还阳参全草的石油醚提取物能减少小鼠咳嗽次数,并能延长小鼠的咳嗽潜伏期,有明显的止咳作用;正丁醇提取物能保护组胺和乙酰胆碱对豚鼠引起的哮喘,具有平喘作用[2]。为了探寻其止咳平喘作用的物质基础,本实验对还阳参石油醚提取物和正丁醇提取物进行了化学成分的研究,结果从石油醚部分分离得到两个化合物,分别为伪蒲公英甾醇乙酸酯(ω-taraxasteryl acetate,Ⅰ)、β-谷甾醇(β-sitosterol,Ⅱ);从正丁醇部分分离到一个化合物,鉴定为连翘苷(phillyrin ,Ⅲ),化合物Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ都是首次从植物还阳参中分离。
1 实验材料
Yanaco显微熔点测定仪(未校正);瑞士Bruker IFS-55型红外分光光度计;瑞士Bruker-ARX-300型核磁共振仪;美国菲尼根LCQ-MS质谱仪。聚酰胺(柱层析用,80~100目,浙江台州市路桥四甲生化塑料厂)、大孔吸附树脂(D-101型,16~60目,天津农药股份有限公司树脂分公司)、硅胶(柱层析用,160~200目,青岛海洋化工有限公司)。其他试剂均为分析纯。还阳参药材采集于山西省山阴县(采集时间8-9月份),
经山西省药品检验所高天爱主任药师鉴定为菊科植物还阳参Crepis turczaniowii C. A. Mey.的全草。
2 提取分离
还阳参粗粉4 kg,以70%的乙醇加热回流提取3次,合并提取液,减压浓缩得到浸膏。用适量水分散,依次用石油醚、醋酸乙酯和正丁醇萃取,减压回收溶剂并浓缩,分别得到石油醚部分(99 g)、醋酸乙酯部分(48.6 g)、正丁醇部分(114.5 g)。取石油醚部分20 g,加乙醚适量使溶解,用硅胶拌匀,乙醚自然挥干,上硅胶柱,以石油醚-醋酸乙酯梯度洗脱,得3个流份,再经反复硅胶柱层析分别得化合物Ⅰ(30 mg)、Ⅱ(20 mg)。取正丁醇部分10 g,加水搅拌,使混悬,静置2 h,取上清液,加入处理好的D-101型大孔吸附树脂柱,依次以水、30%、60%、95%的乙醇洗脱,紫外检测器跟踪检测,收集洗脱液,减压回收溶剂,得到4个不同浓度乙醇洗脱流分,将其中30%乙醇洗脱流份经聚酰胺柱层析和反复硅胶柱层析,得到化合物Ⅲ(40 mg)。
3 结构鉴定
化合物Ⅰ为无色针状结晶(醋酸乙酯),mp 238~240℃, Libermann-Burchard反应阳性,TLC喷10% H2SO4,加热后显紫红色。易溶于氯仿、乙醚,微溶于甲醇、丙酮。IRvKBrmax cm-1:1 731、1 247、2 943、2 850、1 640 cm-1。1H-NMR(CDCl3)δ:4.46 (1H,t,C21-H),2.03(3H,s,CH3-CO),1.05,0.995,0.956,0.922, 0.895,0.826,0.748(21 H,m,7×CH3)。EI-MS(m/z):468(M+)、453(M-CH3)、408(M-CH3CO-H2O)、393、249、204、189。与伪蒲公英甾醇乙酸酯对照品薄层色谱Rf值[3]及显色行为一致。综合分析以上数据,并结合文献[4-5]对照,确证化合物Ⅰ为伪蒲公英甾醇乙酸酯。
化合物Ⅱ为无色针状结晶(石油醚-氯仿),易溶于氯仿、乙醚,mp137~138 ℃,Libermann-Burchard 反应阳性。在数种不同展开剂条件下进行薄层层析,其Rf值与β-谷甾醇对照品一致,并且与对照品混合后展开,只显示一个斑点。综合上述分析,故鉴定该化合物为β-谷甾醇。
化合物Ⅲ为白色粉末,mp 148~150 ℃,molish反应阳性,不溶于氯仿,微溶于甲醇,易溶于热甲醇。该化合物经酸水解后,PC鉴定有葡萄糖。IRvKBrmaxcm-1:3412,2923,2800,1744, 1614,1516,1448,1410,1261,1161,1075,1036,914,817。FAB- MS m/z(%):533[M-1],372[M-glc]+。1H-NMR(C5D5N)δ:8.7 (1H,s,Ar–H),7.6-6.9(6H,m,arom H),3.75-3.68(9H,s,2O CH3), 4.66(1H,d,j=6.9Hz,glc-1H)。13C-NMR(C5D5N)δ:132.2 (C-1), 136.3(C-1'),110.5(C-2),111.1(C-2'),148.0(C-3),149.0(C-3'),147.5(C-4,C-4'),112.4(C-5),116.3(C-5'),118.4(C-6), 119.1(C-6'),82.3(C-7),87.9(C-7'),50.5(C-8),55.2(C-8', OCH3),71.3(C-9,C-9'),55.9(2O CH3),Glc:102.3(C-1),74.9 (C-2),78.6(C-3),70.0(C-4),78.9(C-5),62.0(C-6)。化合物Ⅲ的13C-NMR和1H-NMR波谱数据与文献[6]的连翘苷的数据比较,两者基本一致。因此鉴定化合物Ⅲ为连翘苷。
【参考文献】
[1] 《全国中草药汇编》编写组.内蒙古中草药[M].北京:人民卫生出版社,1985.
[2] 刘振权.还阳参有效部位止咳平喘作用的研究[D].山西省中医药研究院硕士研究生毕业论文,2002.5.
[3] 凌 云.中药蒲公英的理化鉴别研究[J].西北药学杂志,1999,12(14):250.
[4] P L Majumder.Chemical Constituents of Launaea nudicaulis:C-13 Nuclear Magnetic Resonance Spectroscopy of Taraxasterenes and Pseudo-Taraxasterenes[J].J Indian Chem Soc,1982,7:881-883.
[5] 凌 云.蒲公英三萜类化学成分的研究[J].中草药,1998,29(4):224.
[6] 石 钺.银翘散抗流感病毒有效部位群化学成分的分离与鉴定[J].中国中药杂志,2001,28(1):43-46.
【摘要】 目的 研究还阳参Crepis turczaniowii C.A.Mey.全草的化学成分。方法 采用硅胶、大孔吸附树脂及聚酰胺层析柱进行分离和纯化,通过理化、质谱及核磁共振等现代波谱技术鉴定化合物结构。结果 从还阳参石油醚部分分离得到2个化合物,分别鉴定为伪蒲公英甾醇乙酸酯(Ⅰ)、β-谷甾醇(Ⅱ);从其正丁醇部分分离到1个化合物,鉴定为连翘苷(Ⅲ)。结论 化合物Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ均为首次从该植物中分离得到,Ⅲ为首次从还阳参属植物中分离得到。
【关键词】 菊科;还阳参;化学成分
Study on Chemical Constituents in Crepis Turczanilwii
NI Yan, LU Fang-jin, HAO Xu-liang, et al
Shanxi Academy of TCM, Taiyuan 030012, China
Abstract:Objective To study the chemical constituents in Crepis turczaniowii C. A. Mey. Method The constituents were isolated and purified by column silica, polystyrene resin RA and polyamide columbine chromatography, and the structures were identified by physicochemical data, MS and NMR. Result Two compounds were obtained in the Petroleum ether fractions as ω-taraxasteryl acetate (Ⅰ) and β-sitosterol (Ⅱ), and one compound was obtained in the n-BuOH fractions as phillyrin (Ⅲ). Conclusion All above compounds are obtained from the plants of Crepis turczaniowii C. A. Mey. for the first time. Ⅲ is isolated from Crepis L. for the first time.
Key words:Compsitea;Crepis turczaniowii C. A. Mey.;chemical constituent
还阳参Crepis turczaniowii C.A.Mey.为菊科还阳参属植物,别名屠还阳参、驴打滚儿草,多年生草本植物,生长于山坡、路旁,主要分布在山西、内蒙古[1]一带,资源丰富,为民间习用草药。其味苦,性微寒,具有止咳平喘、清热降火、益气之功效,用于治疗支气管炎、肺结核、喘息性慢性支气管炎等疾病。有关其化学成分及生物活性,未见任何文献报道。药效学实验研究表明,还阳参全草的石油醚提取物能减少小鼠咳嗽次数,并能延长小鼠的咳嗽潜伏期,有明显的止咳作用;正丁醇提取物能保护组胺和乙酰胆碱对豚鼠引起的哮喘,具有平喘作用[2]。为了探寻其止咳平喘作用的物质基础,本实验对还阳参石油醚提取物和正丁醇提取物进行了化学成分的研究,结果从石油醚部分分离得到两个化合物,分别为伪蒲公英甾醇乙酸酯(ω-taraxasteryl acetate,Ⅰ)、β-谷甾醇(β-sitosterol,Ⅱ);从正丁醇部分分离到一个化合物,鉴定为连翘苷(phillyrin ,Ⅲ),化合物Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ都是首次从植物还阳参中分离。
1 实验材料
Yanaco显微熔点测定仪(未校正);瑞士Bruker IFS-55型红外分光光度计;瑞士Bruker-ARX-300型核磁共振仪;美国菲尼根LCQ-MS质谱仪。聚酰胺(柱层析用,80~100目,浙江台州市路桥四甲生化塑料厂)、大孔吸附树脂(D-101型,16~60目,天津农药股份有限公司树脂分公司)、硅胶(柱层析用,160~200目,青岛海洋化工有限公司)。其他试剂均为分析纯。还阳参药材采集于山西省山阴县(采集时间8-9月份),
经山西省药品检验所高天爱主任药师鉴定为菊科植物还阳参Crepis turczaniowii C. A. Mey.的全草。
2 提取分离
还阳参粗粉4 kg,以70%的乙醇加热回流提取3次,合并提取液,减压浓缩得到浸膏。用适量水分散,依次用石油醚、醋酸乙酯和正丁醇萃取,减压回收溶剂并浓缩,分别得到石油醚部分(99 g)、醋酸乙酯部分(48.6 g)、正丁醇部分(114.5 g)。取石油醚部分20 g,加乙醚适量使溶解,用硅胶拌匀,乙醚自然挥干,上硅胶柱,以石油醚-醋酸乙酯梯度洗脱,得3个流份,再经反复硅胶柱层析分别得化合物Ⅰ(30 mg)、Ⅱ(20 mg)。取正丁醇部分10 g,加水搅拌,使混悬,静置2 h,取上清液,加入处理好的D-101型大孔吸附树脂柱,依次以水、30%、60%、95%的乙醇洗脱,紫外检测器跟踪检测,收集洗脱液,减压回收溶剂,得到4个不同浓度乙醇洗脱流分,将其中30%乙醇洗脱流份经聚酰胺柱层析和反复硅胶柱层析,得到化合物Ⅲ(40 mg)。
3 结构鉴定
化合物Ⅰ为无色针状结晶(醋酸乙酯),mp 238~240℃, Libermann-Burchard反应阳性,TLC喷10% H2SO4,加热后显紫红色。易溶于氯仿、乙醚,微溶于甲醇、丙酮。IRvKBrmax cm-1:1 731、1 247、2 943、2 850、1 640 cm-1。1H-NMR(CDCl3)δ:4.46 (1H,t,C21-H),2.03(3H,s,CH3-CO),1.05,0.995,0.956,0.922, 0.895,0.826,0.748(21 H,m,7×CH3)。EI-MS(m/z):468(M+)、453(M-CH3)、408(M-CH3CO-H2O)、393、249、204、189。与伪蒲公英甾醇乙酸酯对照品薄层色谱Rf值[3]及显色行为一致。综合分析以上数据,并结合文献[4-5]对照,确证化合物Ⅰ为伪蒲公英甾醇乙酸酯。
化合物Ⅱ为无色针状结晶(石油醚-氯仿),易溶于氯仿、乙醚,mp137~138 ℃,Libermann-Burchard 反应阳性。在数种不同展开剂条件下进行薄层层析,其Rf值与β-谷甾醇对照品一致,并且与对照品混合后展开,只显示一个斑点。综合上述分析,故鉴定该化合物为β-谷甾醇。
化合物Ⅲ为白色粉末,mp 148~150 ℃,molish反应阳性,不溶于氯仿,微溶于甲醇,易溶于热甲醇。该化合物经酸水解后,PC鉴定有葡萄糖。IRvKBrmaxcm-1:3412,2923,2800,1744, 1614,1516,1448,1410,1261,1161,1075,1036,914,817。FAB- MS m/z(%):533[M-1],372[M-glc]+。1H-NMR(C5D5N)δ:8.7 (1H,s,Ar–H),7.6-6.9(6H,m,arom H),3.75-3.68(9H,s,2O CH3), 4.66(1H,d,j=6.9Hz,glc-1H)。13C-NMR(C5D5N)δ:132.2 (C-1), 136.3(C-1'),110.5(C-2),111.1(C-2'),148.0(C-3),149.0(C-3'),147.5(C-4,C-4'),112.4(C-5),116.3(C-5'),118.4(C-6), 119.1(C-6'),82.3(C-7),87.9(C-7'),50.5(C-8),55.2(C-8', OCH3),71.3(C-9,C-9'),55.9(2O CH3),Glc:102.3(C-1),74.9 (C-2),78.6(C-3),70.0(C-4),78.9(C-5),62.0(C-6)。化合物Ⅲ的13C-NMR和1H-NMR波谱数据与文献[6]的连翘苷的数据比较,两者基本一致。因此鉴定化合物Ⅲ为连翘苷。
参考文献
[1] 《全国中草药汇编》编写组.内蒙古中草药[M].北京:人民卫生出版社,1985.
[2] 刘振权.还阳参有效部位止咳平喘作用的研究[D].山西省中医药研究院硕士研究生毕业论文,2002.5.
[3] 凌 云.中药蒲公英的理化鉴别研究[J].西北药学杂志,1999,12(14):250.