时间:2023-05-25 17:35:17
导言:作为写作爱好者,不可错过为您精心挑选的10篇自动化免疫分析,它们将为您的写作提供全新的视角,我们衷心期待您的阅读,并希望这些内容能为您提供灵感和参考。
【关键词】化学发光免疫分析法;甲状腺激素
化学发光免疫分析法是20世纪80年代以来发展起来的一项新的标记免疫技术,在临床上有广泛的应用,包括内分泌激素、肿瘤标志物、血药浓度、传染病、心血管疾病标志物、贫血及过敏原等,特别是在甲状腺激素检测中应用更为广泛[1]。本文采用贝克曼全自动化学发光免疫分析仪检测T3、T4、FT3、FT4、TSH,对其方法学进行综合评价。
1 材料与方法
1.1 仪器贝克曼全自动化学发光免疫分析仪。
1.2 试剂发光试剂、质控品、标准品由贝克曼公司提供。
1.3 血清来源试验所需血清样本采自本院门诊和住院患者,每例取3ml血,离心3000 r/min,10分钟,取血清-70℃保存备用。
1.4 检测方法利用化学发光技术和磁性微粒分离技术相结合的测定方法,其反应原理与放免和酶免中的双抗夹心法、竞争法相似,严格按试剂盒操作说明书操作。
1.5 评价指标
1.5.1 批内精密度取含T3、T4、FT3、FT4、TSH高、中、低三种浓度的血清样本,每种浓度同批平行测定10次,计算平均变异系数(CV)。
1.5.2 批间精密度取含T3、T4、FT3、FT4、TSH高、中、低三种浓度的血清样本各10份,每天各测定1次,共测定10天,计算平均变异系数(CV)。
1.5.3回收率:由贝克曼公司提供原装3个浓度的标准品,分别测定T3、T4、FT3、FT4、TSH含量,每个浓度平行测定3次,计算平均回收率。
1.5.4 线性范围收集患者血清标本,取T3、T4、FT3、FT4、TSH浓度高于厂家提供线性范围上限作为高值浓度水平(H),厂家提供稀释液作为低值浓度水平(L),用稀释液稀释高值浓度血清,形成如下系列浓度检测标本:1H+0L、4H+1L、3H+2L、2H+2L、2H+3L、1H+4L、0H+1L。用配制成的系列浓度标本平行测定各项指标含量,取平均值作图,取在坐标纸上呈明显直线趋势的各点值进行直线回归统计,取回归系数r大于0.9的浓度范围为可报告的浓度线性范围。
2 结 果
2.1 批内精密度T3、T4、FT3,FT4、TSH的平均变异系数分别为4.40%、4.90%、3.00%、4.50%、3.50%。
2.2批间精密度T3、T4、FT3,FT4、TSH的平均变异系数分别为6.90%、5.30%、3.50%、6.20%、4.80%。
2.3 回收率T3、T4、FT3,FT4、TSH的平均回收率分别为96.7%、95.5%、97.1%、95.6%、96.4%。
2.4 线性范围T3所测结果得到回归方程为y=1.069x-0.2468,r=0.9966,截距经t检验,ta=1.36,0.95,截距经t检验,ta=0.36,
3 讨 论
血清中三碘甲状原腺氨酸(T3)、四碘甲状原腺氨酸(T4)、游离三碘甲状原腺氨酸(FT3)、游离四碘甲状原腺氨酸(FT4)、促甲状腺激素(TSH)的测定对甲状腺疾病的诊断具有重要价值。以往国内实验室多采用RIA、MIRA检测血清甲状腺激素水平,此法虽较准确,仪器与试剂也较为低廉,但对操作人员水平要求较高,对实验条件及环境有较多要求,且随着标记抗原的放射性衰减,而使计数不稳定及曲线失真,导致结果偏离,结果重复性差,且可产生放射性污染[2,4]。
近年来发展起来的全自动化学发光免疫分析系统是利用化学发光技术和磁性微粒分离技术相结合的测定方法,其反应原理与放免和酶免中的双抗体夹心法、竞争法相似。其优点是[3,5]:(1)成熟的单克隆抗体技术或独特的磁性微粒子技术,保证了反应的高特异性;(2)检测范围宽,具有良好的稀释线性;(3)试剂稳定性好,不需酶促反应,有效期可长达半年;(4)操作简便,分析过程采用全自动化,减少了人工操作误差,重复性好;(5)试剂及标本均采用无吸附材料,故相互间的交叉污染率低,干扰因素少;(6)真正的随机连续检测,样本随到随测,具有急诊优先插入功能。因此全自动化学发光免疫分析系统是目前检测甲状腺激素等指标的较好方法。
【参考文献】
[1] 陶义训.免疫学和免疫学检验[M].第1版.北京:人民卫生出版社,1997:174.
[2] 叶任高,陆再英.内科学[M].第6版.北京:人民卫生出版社,2004:725.
C/S结构系统:是传统开发模式,一般以数据库和客户端的两层结构实现,也有加入中间件的三层或多层结构,在OA早期是标准的系统模式,但随着计算机技术的发展和网络的发展,它已经无法满足现在的远程网络办公和移动办公,逐渐在被取代
C/S+Web技术:是为了补充C/S结构的不足,在C/S基础上加入Web技术来实现对远程数据的获取,但拥有一定局限性,如数据及时更新、软件升级等问题就无法很好解决
B/S结构系统:是援用动态网页技术,加入OA的开发理念,完全适应网络办公和移动办公需求,也是现代办公自动化系统的首选技术。
就B/S结构的开发,具体技术又有多种选择:JSP+J2EE,ASP+IIS,ASP.net+Microsoft .NET Framework,PHP+Apache,就这几门技术,可以说各有其优缺点,分析如下:
JSP技术:具有良好的跨平台性,加上J2EE功能十分强大,但是J2EE的布置使开发成本显得略高,而且没有良好的安装界面
PHP技术:是早期动态网页技术中的强手,但随着JSP技术与ASP技术的不断更新,使得PHP技术稍微比较落后
ASP技术:类似于PHP技术,开发简便,快速,加上IIS的功能支持,是比较简易快速的开发技术
ASP.net:可以说是ASP技术的替代技术,是ASP的一大进步,在Microsoft .NET Framework的强大支持下,可以使用C#、VB、java script三种语言来编写代码,采用预先编译技术,使得代码安全性加强
最终讨论结果:在针对于中小型企业用户,建议采用ASP.net技术,理由是,该技术易于服务器的维护,成本相对较低,开发周期较短
在针对政府部门用户,建议采用JSP或ASP.net技术,理由是,政府部门服务器很多已经改装为Linux系统,在该平台下采用JSP技术较成熟;如果是Windows用户,则采用ASP.net技术
二、OA概述
人们普遍使用计算机来提高个人工作效率,但是在需要许多人一起协同工作的现代工作环境中,我们更需要提高我们的整体工作效率。利用网络通讯基础及先进的网络应用平台,建设一个安全、可靠、开放、高效的信息网络和办公自动化、信息管理电子化系统,为管理部门提供现代化的日常办公条件及丰富的综合信息服务,实现档案管理自动化和办公事务处理自动化,以提高办公效率和管理水平,实现企业各部门日常业务工作的规范化、电子化、标准化,增强档案部门文书档案、人事档案、科技档案、 财务档案等档案的可管理性,实现信息的在线查询、借阅。最终实现“无纸”办公。
办公自动化,一个极大的概念,一个炒作了很久的概念。无论是办公设备公司,还是系统集成公司,都大力推出自己的办公自动化产品。有办公设备、办公自动化电脑、办公自动化软件。可见,办公自动化中内容庞大,可为空间不可小视。那么,首先我们来探讨一个问题,什么是办公?
办公实际就是文件的制作、修改、传递、签定、保存、销毁、存档的过程。那么随着文件的这一流程,产生了各种各样的设备。随着技术的发展,计算机网络技术的进步,办公自动化网络的建设也得到了大力推广。
传统的办公模式主要以纸介质为主,在信息革命的浪潮中,显然已经远远不能满足高效率、快节奏的现代工作和生活的需要。如何实现信息处理的自动化和办公的无纸化逐步得到了人们的重视。
传统办公模式
办公自动化提了多年,但效果并不明显,人们还是停留在单机字处理和表格处理的所谓办公自动化的初级阶段。信息的交流和共享,以及团队的协同运作等无法完美的实现,极大地限制了工作的效率。
Internet/Intranet的迅猛发展,为信息的交流和共享,团队的协同运作提供了技术的保证,同时也预示着网络化办公时代来临。
网络化办公模式
现有办公自动化系统和大型信息管理系统中,企业业务流程重组或者是文件流转功能都是核心功能。同时我们也认为,企业办公主要是一个文件流转的过程,所有的办公事务都可以抽象成一个数据库表单。
传统的办公自动化系统和大型MIS系统在处理企业管理流程中大多采用企业业务流程重组(BKR),其核心思想就是要先优化企业业务管理流程,再根据优化后的流程建设企业信息系统。这样不仅在系统建设中工作量巨大,同时面临来自企业内部重重的阻碍。
我们的核心思想是;前期系统建设中不牵涉企业内部业务流程重组,只是协助企业通过方便的流程自定义等功能进行流程电子化,以及不断根据实际需求去改变电子化流程。
三、系统结构设计
现在的网络办公自动化系统可以说百家争鸣,各有所长,但是一般的B/S结构系统都做得比较固定,也就是针对某个行业甚至某个企业而开发的,有诸多的限制和代码固化,不利于灵活的OA定制和客户化!而且很多OA系统都具有相同的功能,只是表现手法和操作流程有所不同罢了,所以,他们的基本是一致的,是有共性的,是可以统一的。
我的基础思想是开发一个底层的通用型OA平台,在此平台下实现OA系统的主要功能模块的底层操作,这样,当针对某个企业或者政府部门开发OA系统时,只需在此基础上稍加修改,就可以成为一套具有很强针对性的OA系统,这样方便该系统的二次开发,也方便于针对不通性质部门单位的OA系统的定制。
可以看出,底层通用型管理模块是整个OA系统的基础,而应用层模块是面对客户的,它是界面和业务逻辑的结合体,针对不通企业将有所不通,这种结构将很好的解决一套OA的多种定制功能,便于二次开发。
四、通用型管理模块功能划分
针对于这个底层模块,它并不需要实现实际的功能,它主要是负责完成应用层交付的任务和与底层数据库交换数据,所以它的功能是比较抽象的、统一的和可扩展的。虽然如此,我们还是将这个模块按不同的功能细分,因为办公系统有些模块之间联系并不紧密,比如公文管理系统与公共信息系统,邮件管理系统与办公设备管理系统之间的联系就不是那么紧密,甚至可以完全分开。所以我们的底层管理模块针对于这些情况,主要分为功能子模块:
1.公文管理
公文管理主要负责公文的发送与接受工作,发送流程按照流程定
制来完成,所以还包括流程定制功能。这三大块是OA的核心部分,实现也最为复杂,特别是流程定制功能,是一个非常灵活的模块,它决定了该OA系统的效率和可用性
2.邮件管理
邮件管理主要功能是发送与接受内部邮件,发送与接受外部邮件(外部邮件服务器必须支持pop3),邮件需要存入数据库,以便今后浏览查询
3.表单管理
表单管理是一个辅模块,基本上在其他所有模块都有可能用大它的功能,它主要是实现表单模板的定制,表单的存储,打印等功能。在一个企业,表单是很重要的一个东西,它在办公过程中出现的频率紧次于公文,所以这个模块也非常重要,并且表单的定制与打印是一个技术难点
4.档案管理
档案管理功能是对准备归档的公文或者企业各类合同、协议、文件、指示、资料等的一个合理存储与查阅功能,针对于复杂的分类和查阅权限,实现合理存取,管理得基本功能
5.人事管理
人事管理功能主要包括:员工资料管理,员工薪资管理,员工考勤管理,员工权限管理,部门机构管理,部门任命管理等等公司内部人事管理的所有功能,本子模块将以底层视角反应员工得管理,包括职务和所属性质都将按统一模式规划,便于应用层定制模块
6.日程安排
日程安排是办公系统的一个必不可少的辅助功能,可分为个人日程,部门日程,主要需要解决的是日程的基本存储和信息提示
7.公共信息管理
公共信息包含:公司新闻、文档、员工论坛、资料下载等功能,主要是针对所有部门的一个共用系统,该系统可以采用传统模式,如论坛可以采用BBS系统等,底层主要是统一规范,提供基本功能
8.会议管理
会议对于任何一个公司都是重要的,而会议的形式随着网络的发展也变得多样化起来,除了传统的会议,还有网络会议,视频会议等新型会议方式,使得相隔甚远的人之间也可以有了当面交流的环境。对于相隔较远的部门,如总公司与子公司之间的交流建议采用非视频的网络会议,因为这个即可以满足网速,也可以满流得需求。对于处于同一个大厦的各部门,建议使用视频会议,因为加入多媒体的功能,可以使得会议气氛跟贴近传统会议的效果,而且交流也更人性化,同时也可以得到局域网网速得支持。
这功能子模块都是OA系统得基础,在此之上,我们可以创建更多的功能和辅助,可以使得OA的定制变得轻松而丰富。
在矿井的生产过程中,采煤工艺的先进与否直接影响整个矿井的生产能力,因此,要尽量选用先进的采煤工艺,从而达到矿井高产高效的目的。由于煤矿是高危行业,提高综机设备自身的安全可靠程度和自动化程度,最大限度的减少用人,是实现矿井长治久安的关键所在,因此煤矿综合自动化有力推动了企业安全高效、又好又快发展。
1 地质概况
耿村煤矿综合自动化13160工作面位于东三采区(2-3)煤轨道延伸西翼。工作面采用走向长壁式布置,下巷标高+81.914~+101.718m ,上巷标高+115.520~+142.344m ,工作面切眼长206m ,走向长753m ,煤层倾角8°~12°煤层储量利用厚度13.5m。地质构造条件较简单,煤层整体呈一向南东倾斜的单斜构造,煤层结构较复杂,局部层理紊乱煤层松软。
从以上两个表格对比可以看出,综合自动化放顶煤工作面与普通工作面相比,虽然前期在资金、设备上投入较大(大约多投入3700万元),但自动化综放工作面每月原煤产量增加7万吨,按照每吨450元的售价,价值3150万元,也就是说自动化工作面多投入的3700万元用一个多月的时间就完全收回了。煤炭作为我国现代工业发展的主要能源,供求的不平衡严重影响和制约着我们的经济发展,自动化采煤工作面相比普通工作面每年可以增加84万吨原煤产量,在一定程度上可以环节供需矛盾,满足社会需求,促进经济发展。
(2)资源回收利用率比较:
①电液支架护帮板结构以及立柱自动补压功能,能给工作面顶板和煤壁提供了必要的支护,减轻了顶板和煤壁的破碎程度,基本上杜绝了片帮冒顶的发生,因此在后部放煤时容易将顶煤放净,并能保证煤矸分离提高煤质。根据统计化验,煤质较原来提高50—70大卡/公斤。
②13160工作面电液支架的放煤过程分为两部,先是程序控制自动放煤80%以上,然后由人工结合每架的具体情况进行放煤,见矸关门,达到甚至超过了人工放煤的效果,保证了后部顶煤的完全放落和回收。与普通综放工作面相比,综合自动化放顶煤工作面的回采率可提高2个百分点,每年多生产原煤7万吨,直接经济效益3000余万元。
③排头支架选用ZFC9600型液压端头架,支护高度由2.8m增加到3.5m,工作阻力有7000KN增加到9600KN,加上SAC系统的自动补压功能,使上下端头支护能力得到了加强,上下巷17架ZT2×4000型超前支护液压巷道支架的配套使用,使得上下端头的支护能力得到极大的提高,这就加大了端头支架的放煤量,相比普通放顶煤工作面每放一排煤可增加70吨产量,一个工作面可多出10多万吨煤,原煤回采率可达95% ,回采率提高3个百分点,一定程度上提高了矿井的服务年限。
(3)节能方面:煤炭是不可再生能源,自动化采煤设备和技术的使用在合理利用煤炭资源、节能降耗以及环境保护方面的效果显著。
①变频智能型乳化液泵站,自动启动或闭合设备及调配功率输出,达到节能省电,一班可节约用电 680度,一天节约2000度 ,按这样计算,一年可节约用电72万度,价值约45万元。
②泵站的自动配液功能,使乳化液浓度达到科学合理,即满足了电液系统的使用要求,又降低了阀组、大立柱及各种千斤顶的损坏,一个月可降低材料费5万元。
③与1140V供电相比,电缆投入减少50%,节约资金80多万元,同时电耗下降近11%。
4 社会效益分析:
(1)自动化采煤技术为打造本质安全型工作面,保障职工群众人身安全及设备安全方面发挥了巨大的作用。
①上下巷安全出口使用了巷道支架进行支护,解决了上下端头支护难题,杜绝了上下端头片帮冒顶事故的发生,改善了职工工作环境。SAC型电液系统的成组动作控制功能、支架跟随采煤机自动控制功能以及安全操作功能等,实现了无人操作或远距离操作,极大程度的保证了操作人员的人身安全。支架立柱自动补压功能和护帮板结构保证了支架对顶板和煤墙有效支护,杜绝了工作面片帮冒顶事故的发生。
②自动化设备的实时工况监控、智能故障诊断、工作面矿压监测等实用功能,让井上下都能随时掌握关键部位的工作状态,及时发现设备故障,杜绝了设备事故的发生,极大的降低了设备运行成本,提高了设备开机率。
(2)耿村矿通过对13160工作面对自动化采煤技术的实践和探索,将促进和带动集团公司以及煤炭行业的科技进步,全面提高集团公司及我矿综采技术装备水平。
自动化工作面科技含量高主要体现在:
①集中控制:将采煤机电控系统(随采煤机成套)、支架电液控制系统、工作面三机通信控制系统、泵站控制系统及供电系统有机结合起来,并接入矿井自动化系统的以太网,实现综采工作面设备的集中控制、保护、闭锁、沿线通讯等功能,确保各设备协调、连续、高效、安全运行。
②信息网络化:实现数据上传,在地面调度指挥中心实现对综采工作面设备的远程监控以及各种数据实时显示等功能,并通过计算机网络实现共享,实现生产管理的信息化。这是普通综采工作面所不具备的。
③大量新设备的投入使用:SAC电液控制系统、变频控制开关、集中控制系统、乳化液泵站自动配液、软化水装置等,具有较高的科技含量,提高了井下设备的自动化程度,很好的促进了安全生产。达到了“多上设备少上人”的目的,诠释了“人的生命至关无上”的意义,为集团公司的科学发展和可持续发展做出了卓越贡献。
工作人员英语水平及业务素质的要求
人员的因素是保证生化检验质量的前提。医院各级领导要提高认识,引起重视。进口全自动生化分析仪的操作界面大都是英文,对工作人员的英语水平就要有一定的要求,以适应工作的需要,科室领导要能合理安排工作人员;经过专门的技术培训,应掌握仪器的性能工作原理,仪器的参数设置和试剂的准备,熟悉仪器各部件结构,仪器的保养与维护及一般故障的排除,培训完毕考核合格后才能上岗。近两年,我国正在逐步实行大型仪器使用培训的上岗考核制度,这也能进一步提高我们工作人员的业务素质。
为全自动生化分析仪提供良好的工作环境
全自动生化分析仪的运行必须要有一个好的工作环境。包括稳定的电流、电压和接地保护的电源系统。适应仪器工作范围的温度和湿度,实验室的洁净度等。应当配置UPS保护电源,用来应对突然断电的情况。要有一个相对独立稳定的工作环境。任何环境的变化都有可能影响到仪器的稳定性,从而影响到检测结果的精密度和准确度,因此要及时观察做好记录以便出现问题及时得到纠正。
全自动生化分析仪的维护与保养
全自动生化分析仪的维护与保养包括仪器的清洁、清洗液的配制、每天光度计的检测,杯空白的测定、每天开机、关机对石英比色杯的清洗,加样针头的定期彻底清理等。工作人员应有高度的责任心,严格按照操作规程操作。仪器在使用间隔一段时间后,要为其工作轴承元件抹油,保护工作元件的正常运行。建议在每隔一年使用期限与供应商取得联系,派专职的工程师为仪器做一个全面的保养以维护仪器的性能稳定及延长仪器的使用寿命。同时每年定期对仪器进行了校准,以保证其灵敏度达到试验的要求。
标准品的正确选择和使用
由于生化试剂存在批间差异,在使用不同批次的试剂时,应及时校准仪器。实践证明,使用定值洪冻干标准血清比使用水溶液标准要好,原因可能是定值冻干血清与样品(血清)成分更接近,水溶液标准不具有血清的黏稠性,在吸样针吸样时血清与水溶液在吸样针的黏度不一样会造成误差;另一方面反应速度不同,水溶液反应速度比血清快,而造成误差。在使用定值冻干标准血清时,准确吸取重蒸水稀释复溶,轻轻颠倒混匀,避光放置30~60分钟使用。
试剂的管理
目前试剂种类较多,仪器配套试剂、进口试剂、国家试剂等等,不同的生产厂家、不同型号的全自动生化分析仪对试剂的要求不完全相同。原则是建议使用仪器配套的系列试剂产品。使用其他试剂,应先进行样准,使仪器性能做到最佳。总的来讲,进口试剂优于国家试剂,表现在试剂的稳定性、线性,储存使用前配置等。试剂的存放要有专用冰箱,建立冰箱温度每日登记制度,以保证试剂的贮存条件达到要求,对试剂要定期清理,及时处理过期试剂。
完善室内质控制度
室内质控是各实验室为了监测和评价本室工作质量,以决定常规检测报告能否发出所采取的一系列检查、控制手段。旨在检测和控制本室常规工作的精密度,并检测其准确度的改变,提高本室常规工作中批间和日间标本检测的一致性。因此,室内质控工作每天必不可少。一段时间内必需选择同一厂家性能稳定的质控品。质控品的稳定性受到多种因素影响,比如质控品的运输条件、贮存条件、检测条件等。在试剂质量和标准品得到保证的前提下,对每一批质控品多次检测,获得本室的检测均值作为其靶值,建立本室的质量控制体系,厂家经出的靶值可作为参考。为了避免有些标本结果偏离线性范围而导致失控,应采用高、低不同浓度的质控血清。在完善室内质控的基础上积极参加室间质评,只有认真做好室内质控才能保证获得好的室间质评成绩。
正确对待室间质量工作及反馈的信息
目前在我国的医院等级评审制度中将检验科室间质评成绩作为医院达标的指标之一。室间质量评价由第三方机构采用一系列的办法连续地、客观地评价各实验室的试验结果,并发现实验室本身不易发现的不准确性,了解各实验室之间结果的差异,帮助其校正,使其结果具有可比性。我们在认真做好室内质控的同时[1],一定要正确对待室间质评工作及反馈的信息。每次室间质都要由科室认真独立完成,并如实报告检测结果。当收到反馈单后要认真分析反馈单中所反映出的问题,积极查找原因,采取措施提高测定结果的准确性,提高不同实验室之间测定结果的可比性。
标本分析前的质量管理
标本分析前的工作由各科医师、护士及检验科人员等共同完成。因环节较多是很容易出问题的,也是全面质量控制工作中最难控制的环节,我们要主动与临床沟通,包括患者的准备、标本采集的方法、数量,特殊样品的留取、按时送检等。当检验科工作人员接到标本时要认真核对,不合格的标本要重新采集。发现标本有黄疸、脂血、溶血等对检测结果有影响的情况,应注明在报告单上,以便医师在分析报告时可结合标本信息去分析。
建立检测结果审核制度
在审核报告单之前,要认真分析室内质控情况,对当天检测结果的可信度作出判断,对报告单逐一审核,检查数据有无不合理的情况。符合复查条件的一定要进行复查后再发报告。遇到特殊情况,应与临床及时沟通,查找原因,确保结果的可靠性。
以上几个方面是一个整体,分析前、中、后环环相扣,缺一不可,只有全面做好各环节的质量管理,才能为患者发出真实可靠的报告[2]。
随着电子信息技术的不断进步,临床检验亦在不断更新,成为当今医学领域进步最快的学科之一,其中临床免疫检验的推陈出新更是佼佼者。免疫检验已由全手动操作,逐步过度至班自动化操作,目前我国部分经济发达地区先进医院已优先步入全自动化阶段。本文就免疫检验自动化的概念、目前发展现状、以及未来发展规划作一简单总结。
1免疫检验自动化的概念
"自动化",顾名思义为计算机操作取代人工手动操作。而免疫自动化,即运用计算机技术参与免疫检验操作、调定的技术。其中包括样本调控、试剂掌控等免疫检验基本操作过程;检验结果与数据自动处理,以及故障自动报警系统与自救系统等。
2当前免疫检验自动化发展现状
免疫检验技术的不断进步是适应我国当前医疗环境的自我完善。众所周知,医少患多不仅仅是临川科室的突出问题,在检验科,检验医师与待检样本比例严重失调是大多数医院检验科面临的一大难题,故如何提高检验效率是迫切需要解决的问题。
免疫检验自动化具有高效、高灵敏度等优点,其在检验科的应用价值已逐渐凸显,虽然该技术在我国起步较晚,但其发展及其迅速。我国免疫检验自动化系统起步于上世纪70年代,至今40余年间逐步成熟。多年的临床经验证实,免疫检验自动化技术具有高灵敏度、特异度,且对于干扰因素的分析和排除能力强于手动操作,能有效避免误差的发生[1]。
3免疫自动化技术进展
3.1免疫标记测定自动化系统的进展 免疫标记是运用抗原抗体反应的原理,对目标AG/AB或介导AG/AB进行标记,从而根据对待测目标进行追逐、测定的技术,常用的标记手段有荧光素、放射性同位素、酶等,并可根据标记手段的差异分为免疫荧光技术、放射免疫测定技术以及酶标技术等等。前两种免疫标记技术目前应用频率较高,有很高临床应用价值,但亦有一定缺陷,如放射性同位素价格昂贵,对人体具有致癌和致畸作用等;而应用荧光素的免疫荧光标记技术耗时较长,实现全自动化有一定难度。免疫标记技术另一大突破是化学免疫技术的发现,其标记物为花光物质。虽然该技术起步较晚,但由于其高信度、效度优点,有效避免了耗时常和生物有机体放射毒性等弊端,已成为当前免疫标记技术的领军项目。
总体而言,免疫标记技术具有高灵敏度、高特异性等优点,在激素水平测定,各种类型肝炎病毒AG/AB测定以及肿瘤标志物水平等多种蛋白类物质的测定中具有及其重要的应用价值。
3.2免疫浊度测定自动化 免疫浊度是在光学手段辅助下,根据抗原抗体复合物能增加透明液体浊度的原理,通过分析液体浊度推断目标AG/AB含量的技术。根据光学手段的差异,可将免疫浊度测定技术分为散射比浊法和透射比浊法两大类,下面逐一介绍。
3.2.1散射比浊法 散射比浊法是将一定波长的光束,对混有抗原抗体复合物的溶液照射,光束垂直通过溶液时,在照射致AG/AB复合物时会发射不同角度的折射,而折射的角度与AG/AB复合物的量、微粒大小相关,故可以通过散光光度自动分析处理系统,测定溶液中AG/AB复合物以及目标抗原的含量。
散射比浊法免疫浊度测定技术具有高效、敏感等优点,尤其是对于血浆蛋白含量的测量,精确度较高。该技术主要缺点为其要求与目标待测抗原发生反应的介质抗体质量要求高,主要为避免AG/AB复合物微粒大小参差不齐对自动处理系统产生的结果误差。
3.2.2透射浊度法 透射浊度法的原理是一定波长的光束在透过混有抗原抗体复合物的溶液时,会被其吸收,从而在光路方向收集光强度,并计算原光束强度与溶液中光束强度差即为溶液吸光度,溶液吸光度与AG/AB复合物微粒数目有关。
全自动生化分析仪中运用透射浊度法进行溶液分析的较多,该技术适用度广,对抗体和试剂无特殊要求,只要溶液中AG/AB复合物分子微粒大小适合、AG/AB复合物量足够均可采用该方法测定。
除上述免疫标记测定自动化系统、免疫浊度测定自动化外,多种自动化免疫分析仪器亦在临床免疫检验中广泛应用,其应用的技术亦较为先进。而当前常用的自动化分析仪器有AXSYM全自动快速免疫分析系统、Vitros ECi全自动增强化学发光酶免分析仪系统、auto DELFIA全自动时间分辨荧光免疫检测系统等。
现行临床免疫检验应用较多,特别是在肿瘤的发生、发展、复发及存活期期间,多依靠免疫检验帮助临床判断患者的当下情况,并未患者的治疗提供帮助。而在免疫检验自动化的发展过程中,也经历了诸多的变化,随着医疗设备的不断发展,免疫检验自动化也得到了巨大的进步,经过多年的研究,免疫检验自动化分析的操作步骤也在逐渐减少,检查报告结果更加准确详细,免疫检验已经从微量检测进一步发展为超微量检测[1]。而对免疫检验自动化进展总结分析,也具有较强的现实指导意义。
1免疫检验自动化的概念以及现状
1.1 临床免疫检验自动化的概念 免疫自动化检验指的是计算机控制检测仪器进行免疫检测分析,不需要人工操作。主要涉及三方面的工作:①加样品、分配试剂、以及洗涤和检测的自动化。②检测数据的自动化处理。③提示操作人员仪器出现故障以及解决办法[2]。
1.2现状分析 今年来临床免疫检验的工作量逐步增大,传染性疾病对检验人员的构成的风险不断加大,对检验工作的效率也提出了很高的要求,因此临床上免疫检验的自动化要求已经刻不容缓。自动生化分析技术在七十年代应用于临床检验实验室,经过二十年的发展,至九十年代免疫检验分析技术已经发展的越来越成熟,其中时间分辨荧光检测技术、化学发光检测技术等先进的分析技术不断的应用于临床免疫检验,这些检验技术灵敏度高、特异性好,抗干扰能力较强。
随着临床检验技术的不断发展,极大的促进了免疫检验技术的自动化的发展,很多自动化的分析仪应用于临床,大大降低了检验人员的工作强度,缩短了分析的流程,提高了检验结果的特异性以及准确性和灵敏度,所以自动化检验备受临床医学检验人员的青睐。
2临床免疫检验自动化的发展
2.1标记免疫检验技术的自动化发展 标记免疫指的是采用酶、放射性同位素等物质标记抗原或者抗体发生抗体、抗原反应。已经广泛应用于临床。由于其标记方法不尽相同,主要可以分为:放射免疫技术、酶标记技术、免疫荧光标记技术。其中临床检验中使用最广泛的是放射免疫技术和免疫荧光标记技术。但是两者都有明显的缺点,免疫荧光标记技术比较费时而且不能进行定量和自动化,放射免疫技术检测所需仪器复杂且价格昂贵,对人体危害比较大。酶标记技术则是一项易于操作的一项新技术,具有无需特殊设备、适用范围广泛、检测周期短等优点。
免疫标记检测技术主要具有两方面的优点:灵敏度高,测定目标由待测物转变为待测物上的微量标记物质,利用其放大效应,大大降低了待测物的检测下限,可进一步发展到超微量检测。特异性高,从传统的有机或者无机试剂发展为抗体和抗原,使得检测的特异性显著提高,随着酶试剂、稀土元素等更加灵敏、高效的标记物质的出现,免疫标记检测技术发展迅速,已经成为了临床免疫检验检测各种激素、肝炎抗体、肿瘤标记物等微量蛋白物质的主要检测分析手段[3]。
2.2 免疫浊度检测的发展
2.2.1 透射浊度检测法 免疫浊度的测定可以通过检测光源光路方向透射光的强度,分析其与测定溶液溶度的关系的方法。透射光的吸光度与待测定免疫物质的量呈现正相关,抗体量固定时,根据待测定免疫物质的吸光度,计算出相应抗原的量,这种方法的优点是只要试剂合适,在普通的生化分析仪上就可以进行全自动化的分析,可以使得人体液中的特异性蛋白质测定的准确度和灵敏度显著提高,检验流程更加简洁。
2.2.2散射浊度检测法 散射浊度检测法指的是波长一定的光照射溶液,当遇到抗原抗体复合物分子时,复合物颗粒导致光线折射,出现偏转,其偏转角度与光线波长以及复合物分子的大小和量有很大关系。光强度与抗原抗体复合物含量成正比,散射光强越强,那么形成的抗原抗体复合物也就越多。这种方法的优点是检测范围宽、检测速度快、敏感度高,但是要求所检测的抗体质量比较高。
3免疫检验自动化的总结
免疫检验自动化的主要技术参数主要有:临床检验中的抗体、抗原需具有高度的特异性和亲和力;检验中的固体载体一般为磁性微球,以达到增加免疫反应的面积的目的;自动化分析仪都要结合相关的计算机软件对测定的数据进行转化和分析。新的分析仪设计智能化程度不断提高,其自动化程度不断发展,已经成为了新时期临床免疫检验的最重要的检验方法之一。在不断的临床实践过程中,对临床免疫检验自动化的发展进行深入的研究。随着科学技术的不断进步,一些高灵敏度、高精确度的免疫检验技术将会广泛应用于临床,提高临床免疫学检验的效率,促使检验技术不断向着更高质量的方法发展。
参考文献:
参考文献:
[1]李群.公共图书馆常用自动化管理系统比较研究[J].图书情报工作,2013(57):275-277
[2]百度文库.汇文图书管理系统与别的图书管理系统分析[EB/OL].,2015/9/15
1 研究方法和技术路线
主要对高通量ELISA法检测系统对多种传染性疾病(主要是HIV、HCV、TP、HBsAg、HBcAg)标本的检测进行研究,主要进行全自动免疫分析仪与其他全自动酶免分析系统的结果差异分析,以及临界值的合理界定,比较两套系统的优劣。研究过程中两者均采用相同的试剂,相同的测试编程,最后比较两者所测结果的稳定性、准确性,借以分析两者操作步骤的差异,确定最为标准的高通量ELISA检测各步骤操作规程,以期待为临床提供快速可靠的结果。
2 主要技术指标
酶联免疫吸附试验(ELISA)理论上只要能获得某一抗原纯品或相应的抗体制剂,即可对其相应的抗体或抗原进行ELISA测定。因此,几乎所有的可溶性抗原、抗体系统均可用该技术进行检测,其特点是实验结果具有较高的敏感性和特异性,最小可测值达ng甚至pg水平,但易受诸多测定因素(如包被抗原、抗体的质量,微孔板表面的吸附性能等)的干扰。与放射免疫分析相比,ELISA技术优点是标记试剂相对比较稳定,且无放射性危害。
因此在血源病原体(抗原和抗体),检测人类多种传染性疾病方面ELISA检测技术有着不可比拟的优势,高通量ELISA检测的系统化标准化可以大大减少ELISA法的影响因素,提高检测的准确性。
高通量酶免分析系统的标准化、系统化与网络化是全实验室自动化系统的重要组成部分,包括样本(前处理)模块、分析中(质量控制)处理模块、酶免分析后处理模块、软件信息模块等,是迈向全面实验室自动化建设的重要基石。
主要包括:
2.1 样本处理自动化 主动标本识别条码阅读功能;更高的标本处理效率;更少的劳动强度;职业暴露机会最小化;通过减少人为失误、增加加样精度与准确性来改善分析质量,采用批量或随机组合进行多种组合与多种模式检测。
2.2 高通量全自动酶免分析系统的标准化、系统化 多任务、多通道完全实现平行处理过程,特别是自由任务资源管理系统,可以随时增加(急诊)任务菜单,实现最优反应过程(试验质量)和最大化分析生产力。
2.3 设立高精密的质量控制系统,确保每一批次检验结果的准确性与精密度 高通量酶免分析系统的标准化不仅是一个测定系统或试剂的量值溯源,其还涉及到临床标本的采集运送和保存、检测系统或试剂的性能验证、检测程序、仪器设备的维护和校准、结果的分析报告和解释等的标准化,对ELISA的测定在医学实验室的应用,在借助必要的自动化分析仪器设备的基础上,进行系统化、标准化,将极大地提高检测结果的准确性以及其对临床疾病诊疗的有效性,并大大降低患者的医疗费用,我院以已开展传染病的ELISA法检测多年,目前主要是乙型肝炎表面抗原、艾滋病抗体初筛、梅毒抗体、丙肝抗体、丙型肝炎核心抗原的检测,主要使用意大利产ALISEI全自动酶免分析仪,并且实施了严格的实验室质量控制制度,操作人员经过严格的岗前培训考核合格并取得相关传染性疾病的检测资格证书,严格进行室内质量控制并定期参加省室间质量控制,医院通过了ISO2001认证,并拥有强大的科研团队和技术力量支持。
3 国内外研究综述
ELISA是目前国内临床检验科室最为常用的免疫检验方法,常用于一些重要检测项目如传染病或感染性疾病病原体的抗原和特异抗体、肿瘤标志物等常规检测,其检测结果的精准度直接影响到临床诊断、治疗检测和预后评估。要保证检测结果的精准度,实现在不同实验室间检验结果的一致性,检验结果必须要有溯源性。检验结果能否实现溯源性,取决于检测系统,即完成检测所需要的仪器、试剂、校准品和操作程序的组合。要对检测过程中的各组分进行严格的标准化尤为重要。一直以来,我国政府对ELISA检测的相关传染病十分重视,如艾滋病、梅毒等,但是在ELISA标准化方面所做的工作还不足。这就导致了检测结果容易出现假阳性、假阴性,大大降低了治疗质量,也损害了人民群众的身体健康,给患者和医疗机构造成了不可估量的损失。
中图分类号Q819 文献标识码 A 文章编号 1674-6708(2014)123-0174-02
自1950年来,专家学者开始研究仿生学,生物在几万年的进化中自然有很多优秀的生物控制系统。所以参照生物进化机制,人们提出了很多新型方法解决以往难以解决的工程问题,例如:遗传学算法、神经网络控制等等。生物中的免疫系统能够有效识别出抗原,并进行系统记忆,再次遇到同类型抗原时能够直接产生响应抗体,从而能够对外界的物质及时反应,在动态的环境中表现出稳定的特质,所以专家参考免疫系统设计出人工免疫系统,解决生活生产中的识别问题。下面以MOCVD系统为例,对免疫反应机理在该系统中的温度控制的作用进行分析。
1 免疫反馈与系统控制
免疫系统虽然复杂,但是抵抗外界因素和自我适应能力非常强,免疫优化算法也是根据这个机理解决实际问题,外来抗原对应问题、抗体对应问题的解。在控制系统中,我们可以将系统中可能出现的问题对应抗原,根据仿生学,定下总原则:识别出抗原并设计出对应抗体解决问题。若是采用数学方法表示,就是记录下抗原子集以便识别,抗体则是抗原子集的非集。
在自动化应用领域,免疫反馈机理也是能够解决很多从前不能有效解决的问题的。例如故障检测,传感器感应到故障后,能够反馈给处理器,处理器分析后能够自动分析出故障解决方式并记录下该故障,将故障解决方法传送到故障区,使之能够自动解决排除故障,随后感应器感应到故障已经解决,便停止传递故障信号,从而处理器也停止发送处理信号,留下本次故障的记忆,设备正常运行。若是再次出现同样的故障,处理器便可以根据相关记忆直接处理,省去很多时间,提高工作效率。
2 MOCVD系统温度控制简介
MOCVD系统用于高质量半导体材料的生长,包括第三主族到第五主族的化合物、第四主族的半导体、金属合金薄膜等等。材料的生长过程中温度是比较重要的影响因素,温度高低、保温时间、升温速度都会直接影响到材料的生长状况。所以,材料的生长过程中必须控制好温度。在大规模的工业生产中,温度是很难控制在规定范围内的,一直是生产中的难题,虽然国内外一直在进行相关问题研究,但是成果很少。
由于研发困难,专家学者们也在多方向寻求解决方案,直到引入了生物免疫反馈机理,将传统的PI温度控制模式和新进技术进行了有效组合,改进了控制系统,大大加强了系统温度控制功能。
3 MOCVD系统的免疫反馈控制分析
在MOCVD系统中,通过PLC控制实际温度,在石墨基座下端有相应的测温装置,用来测量温度并显示在温控器上,经过大量实验分析可知,升温的过程是自衡的非振荡过程,由于滞后时间较长,采用PI控制,计算出相应的比例和积分参数。只采用PI控制器整定出的参数并不能满足工程的超调量和反应速度的相关要求,会使系统响应速度过快,从而造成超调量过大。但在实际的温度系统控制中并不要求过快的响应速度,而是对于超调量有着比较严格的要求。所以,选定参数时要综合考虑相应速度和超调量,保证实际控温时能够满足实际要求。
通过进行仿真实验研究,得出,只要参数选择合理,免疫控制器的加入能够有效抑制超调量,即在同样的参数下,加入免疫系统控制器能够减小系统超调量。即在MOCVD系统或其它相似的系统中串联进免疫控制器后,能够有效改善原有性能,特别是抑制超调量。
4 免疫反应机理在控制领域的应用现状
免疫优化算法已经取得了一些领域上的成功,例如:规划问题、网络设计、故障诊断等等,尤其是控制领域。
4.1 免疫系统解决识别问题
免疫系统能够通过抗体解决抗原侵入问题,即便是首次遇见的抗原,该系统也能通过自身的设计产生出针对性的抗体。即面积系统能够跟随环境进行进化,是动态的系统。给出基本算法:
1)随机产生B细胞;
2)引入抗原;
3)运行下列算法,直到终止:
(1)从抗原群体中任选一个;
(2)将抗原插入到B细胞网络中;
(3)选择该B细胞邻域指定范围所有B细胞;
(4)对选中的B细胞计算每一个的免疫相应程度;
(5)按照反应程度排序;
(6)消除反应较差的5%;
(7)产生25%的新B细胞;
(8)选定5%的B细胞加入到免疫系统中。
这种算法能够有效识别DNA序列。
4.2 采用免疫原理的优化算法
优化算法将抗原和抗体对应目标函数和搜索空间的解,按照抗原抗体间的关系选定解,当抗体数量过大时,产生抗体细胞会分化为记忆细胞和抑制细胞,减少抗体增加,加深对应的局部记忆。这种算法能够对研究全局进行快速优化。
4.3 高级智能控制器的行为模拟
智能控制器的设计和人工免疫网络系统具有非常相似的四个层次,即:鲁棒反馈控制对应天然免疫防御、根据误差准则判据进行参数自适应控制对应T细胞激活B细胞响应、目标函数优化自适应控制对应抗原激活T细胞响应、目标函数会随条件变化而发生变化使其适应全局优化对应微噬菌体也会对其他抗原产生反应。这种高度的一致性能够让专家学者通过研究免疫系统,探索高层次智能系统的新形式。
5 结论
将免疫反馈机理应用到温度控制系统中后有效改善了整个系统的温度控制,该系统还能进一步继续探讨,找出更合适的相关参数,所以,专家学者还应不断探索研究,设计出更加合理有效的控制系统。
参考文献
【Abstract】ObjectiveToexploreareliablemethodforthedeterminationofinsulin.MethodsGatherfastingagglutinatingblood,centrifugalizethemrespectivelytogettheserum,whichweredirectlysetoninstrumenttodetermine.ResultsLinearrang:0~335.0mIU/L,senitivity:themeanquantumof0mIU/LIRI,10.1mIU/LIRI,152.0mIU/LIRIand335.0mIU/LIRIwere3808,30350,357399and684567.Specificity:whenthecontrolserumwasdetermined,themeasurevlaluewaswithinthestandarddeviation(SD),95%-105%.Precision:N=60CV≤5%.ConclusionChemiluminescenceisareliable,stablemeasurementmethodfordeterminationofinsulinwithhighsensitivity,precisionandspecificity.
【Keywords】insulin;quantum;preproinsulin;proinsulin;chemiluminescence
胰岛素(IRI)是一种蛋白质激素,这是由胰岛中的β细胞所合成、储存和分泌的。IRI的功能是调节血液中葡萄糖的浓度水平。IRI初期是在β细胞中,以一种大分子量(分子量为1200)前胰岛素原的形式存在。前胰岛素原是一条由110氨基酸组成的单链前体。前胰岛素原被切除掉24个氨基酸序列后形成胰岛素原(分子量为9000),胰岛素原是胰岛素和C-肽的前体[1]。IRI是由两条氨基酸链组成的。最初,IRIA链是由21个氨基酸组成,B链是由30个氨基酸组成;而C-肽是由31个氨基酸组成。IRI是随餐后血液中葡萄糖的浓度高低而产生应答的。
IRI水平虽然不是糖尿病患者常规诊断方法,但是IRI水平的检测对于空腹低血糖患者、普通人群中的胰岛素耐受患者、β细胞分泌功能异常患者的意义非常大[2,3]。
1材料与方法
1.1原理IRI的测定是一种直接化学发光技术和双抗体两点夹心免疫分析法相结合的测定方法。第一种抗体称为标识抗体,是由单克隆抗胰岛素抗体标记吖啶酯形成的;第二种抗体称为固相化抗体,是由单克隆抗胰岛素抗体以共价键的方式与顺磁性颗粒相结合形成的。血清中的胰岛素与相应抗体发生免疫反应后产生光量子,其光量子数的多少与血清中胰岛素的浓度成正比,经标准曲线计算即可求得血清IRI的浓度水平。
1.2仪器与试剂仪器:BAERACS-180型全自动化学发光免疫分析仪。试剂(双试剂)及标准液由广州宝迪有限公司提供。
1.3方法取血清于样品杯中,置全自动化学发光免疫分析仪上,调整好检测参数:血清25μl+第一试剂50μl于37℃孵育5min,加第二试剂250μl于37℃孵育2.5min,用蒸馏水对反应杯进行分离、抽吸、清洗,最后分别加300μl酸试剂和碱试剂到反应系统中进行反应发光,读取光量子数,再根据标准曲线,计算出结果。
1.4标准曲线制备采用两点定标法,将标准血清0.0mIU/L和138.0mIU/L安放于仪器的定标位置上,编入测定程序,上机测定自动打印出标准曲线。
2结果
2.1精密度取混合血清分成两份,一份当天测定60次,结果IRI的值为22±0.8mIU/L,其对应的CV值为1.8%;另一份做批间试验,测定10次,测定统计值为21±1.2mIU/L,其对应的CV值为2.8%。
2.2灵敏度0mIU/L的IRI,其平均光量子数为3808,10.1mIU/L的IRI,其平均光量子数为30350,152.0mIU/L的IRI,其平均光量子数为357399,335.0mIU/L的IRI,其平均光量子数为684567。IRI测定的范围为0~335.0mIU/L。
2.3回收试验在IRI为25mIU/L的血清中分别加入浓度为1mg/L的胰岛素原、浓度为500μg/L的C-肽、浓度为1mg/L的胃泌素、浓度为1mg/L的胰高血糖素、浓度为1mg/L的胰泌素进行回收试验,分别测得其回收率为:100.8%,95.1%,96.6%,100.2%,101.6%。
2.4线性分析对一份定值血清稀释不同浓度,观察测定体系光量子数的变化量,即为IRI与光量子数的关系。结果显示:IRI在本法的测定范围是0~335.0mIU/L。当IRI大于335.0mIU/L时,开始偏离线性。因此对浓度高的标本必须先进行适当的稀释,然后测定。
2.5干扰试验当溶血(Hb>5g/L)、黄疸(胆红素>0.2g/L)时,对结果干扰甚微。
2.6正常参考值取100份经我院体检合格者的血清,其中男50份,女50份,年龄19~55岁,平均37岁。检测结果IRI:20.5±17.5mIU/L。男女之间差异无显著性(P>0.05)。
3讨论
目前定量测定IRI的方法不多,过去一般用放射免疫法,该法测定步骤繁琐,为半自动化操作,测定时间长达3天,测定范围窄,且使用试剂具有放射性,对操作人员造成身体伤害及对周围环境形成污染。现在基本已被化学发光免疫法所代替,该法测定步骤简单,为全自动化操作,测定时间短,全过程最短为半小时即可完成,而它使用的试剂安全无放射性,为一般化学试剂,对操作人员无伤害,对周围环境污染甚微。不过它也有缺点:其试剂为抗体试剂,有效期短,容易失效,定标周期短,一般为2周。在试剂的有效期内和定标周期内,对血清标本进行测定,其结果非常准确可靠。综上所述,化学发光免疫法测定胰岛素(IRI)是目前首选的方法。
【参考文献】