环丙沙星完全抗原的制备和间接竞争ELISA检测方法的初步研究

赵银丽; 刘庆堂; 藤蔓; 柴书军; 张改平 河南工业大学生物工程学院; 河南郑州450001; 河南省农业科学院动物免疫学重点实验室; 河南郑州450002

关键词:环丙沙星 完全抗原 间接竞争elisa 检测方法 

摘要:为了研究检测环丙沙星(CIP)残留的间接竞争ELISA方法,试验采用1-乙基-3-(3-二甲基氨基丙基)碳化二亚胺盐酸盐(EDC)一步法将环丙沙星分别与牛血清白蛋白(BSA)和鸡卵清白蛋白(OVA)偶联制备免疫原(CIP—BSA)和包被原(CIP—OVA),用免疫原免疫Balb/c小鼠制备血清多克隆抗体(CIPpAb),并对其血清抗体效价、灵敏度、半数抑制浓度(IC50)、特异性等进行测定。结果表明:血清抗体的效价为1:25600,间接竞争ELISA的线性检测范围为O.54~500ng/mL,灵敏度为0.54ng/mL,IC50为8.13ng/mL,与恩诺沙星的交叉反应率(CR)为100%,与达氟沙星的交叉反应率为50%,与其他化合物的交叉反应率均小于0.8%。说明这种研究方法可以同时检测食品中的环丙沙星和恩诺沙星残留。

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