关键词:重组色素上皮细胞衍生因子 表达 培养基 融合蛋白
摘要:目的观察不同种培养基中重组人色素上皮衍生因子(rPEDF)融合蛋白的表达。方法将前期研究已构建的pET28a-PEDF原核表达重组体转化E.coli BL21大肠杆菌表达宿主菌,酶切鉴定阳性菌落后,分别在M9和LB培养基中用异丙基β-D硫代半乳糖(IPTG,Isopropyl-beta-D-thiogalactoside)诱导表达,SDS-PAGE电泳检测表达的PEDF蛋白,美国I mage-Pro Plus分析系统进行蛋白定量分析。结果 LB和M9培养基中均获得相对分子质量约54×10^3的rPEDF融合蛋白。但LB培养基获得的是rPEDF融合蛋白的包涵体,目的蛋白占总蛋白含量为21.046%,M9培养基获得的是可溶性的rPEDF的融合蛋白,目的蛋白占总蛋白含量的12.31%。结论不同种培养基中均有rPEDF融合蛋白的表达。
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