马蹄金悬浮细胞系的建立与优化

何勇; 田志宏; 郑用琏 华中农业大学生命科学技术学院; 武汉; 430070; 长江大学生命科学学院; 荆州; 434025; 长江大学生命科学学院; 荆州; 434025; 华中农业大学生命科学技术学院; 武汉; 430070

关键词:马蹄金 胚性悬浮细胞 均匀设计 优化 生长调节剂 

摘要:以马蹄金下胚轴愈伤组织为外植体,采用均匀设计探讨了不同生长调节剂和培养基对细胞悬浮培养的影响,建立了马蹄金悬浮细胞系.结果表明,不同生长调节剂组合的培养基对马蹄金悬浮细胞的干重和生长速度有显著影响,以B5培养基作悬浮培养的基本培养基效果较好,用B5+0.5 mg/L 2,4-D+0.1 mg/L6-BA+0.5 mg/L KT+2.0 mg/L α-NAA作为悬浮培养基,对悬浮细胞的干重增长和生长速度效果较好,经固化培养后,愈伤组织生长良好.悬浮细胞生长的时间进程是,起始培养的第6天前,细胞增殖十分缓慢;第6~12天期间生长迅速;第14天后基本停止生长.培养基的pH值迅速下降时是细胞增殖缓慢的时期;当培养基的pH值开始升高时,细胞增殖也显著加快.

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