军事医学杂志

TRIM基因家族一个新成员的克隆及功能研究

关键词: 胚胎发育  rna干扰  trim家族  

目的：克隆小鼠早期胚胎发育相关的新基因uTRIM,研究其胞内亚定位及功能。方法：通过数字差异显示搜索到可能和小鼠早期胚胎发育相关的新基因uTRIM,用RT-PCR方法从体外培养的小鼠囊胚中分离得到其全长cDNA;将其克隆到绿色荧光蛋白表达载体pEGFP-N1中,在HEK293细胞内表达后确定uTRIM分子的亚细胞定位。用RNAi对其在胚胎发育早期的功能进行初步的...

丝/苏氨酸蛋白激酶Plk1和转录阻遏子NAC1存在相互作用

关键词: plk1  nac1  酵母菌  双杂交系统技术  相互作用  

目的：研究与丝/苏氨酸蛋白激酶Plk1（polo-like kinase1）相互作用的分子。方法：通过酵母双杂交技术初步确定可能与Plk1存在相互作用的靶分子,进一步通过蛋白分子的细胞亚定位、体内免疫共沉淀和GST-pull-down分析Plk1与候选蛋白之间的相互作用。结果：细胞亚定位表明,Plk1与转录阻遏子NAC1（transcriptional repressor nucleus accumbens-1,t...

用Red重组系统快速敲除大肠杆菌aroL和aroK基因

关键词: red重组系统  基因敲除  大肠杆菌  聚合酶链反应  质粒  莽草酸激酶  

目的：利用Red重组系统构建aroL和aroK缺失的大肠杆菌工程菌株。方法：本研究应用PCR扩增两翼与目的基因上下游同源的、含有氯霉素抗性基因片段,电击转化大肠杆菌BW25113。在阿拉伯糖诱导下,含有质粒pKD46的菌株DH5α表达λ噬菌体的3个重组蛋白,利用含同源臂的氯霉素抗性片段分别替换目的基因aroK和aroL,并进一步利用FTP位点专一性重组将氯霉素抗...

银翘散加减治疗儿童病毒性发热56例

关键词: 病毒性感染  发热  银翘散  

儿童呼吸道病毒性感染发热常发生于冬春两季，特点为突发高热，伴头痛、全身肌肉关节疼痛不适等。这种病毒性感染具有一定的传染性，需及时治疗。作者应用银翘散加减治疗该病取得了较好临床疗效，现报道如下。

温度对粘质沙雷菌蛋白质表达谱的影响

关键词: 粘质沙雷菌  灵菌红素  蛋白质组  电泳  凝胶  双向  温度  

目的：研究粘质沙雷菌在不同温度下蛋白表达谱的差异,为探讨温度对生理特性和代谢产物的影响奠定基础。方法：采用双向电泳技术对25℃/37℃培养的粘质沙雷菌蛋白表达谱进行了比较和分析,差异蛋白点经过胶内酶切后进行MALDI-TOF质谱鉴定,所得到的肽指纹图谱用Mascot进行检索。结果与结论：共鉴定到31个差异点对应于23种蛋白。其中,S-腺苷甲硫氨酸...

HLH缺失型Id2候选相互作用蛋白

关键词: id2  酵母菌  双杂交系统技术  蛋白相互作用  

目的：筛选可以与螺旋-环-螺旋（HLH）结构域缺失的Id2相互作用的蛋白。方法：用重叠延伸PCR方法将Id2中的HLH结构域缺失,并插入到pGBKT7载体,构建BD：Id2-DBM-δHLH融合诱饵质粒;构建MCF-7细胞的dscDNA文库;采用共转化方法进行1d2-DBM-δHLH相互作用蛋白的酵母双杂交筛选,采用PCR方法扩增阳性克隆中的AD：cDNA序列并测序;将获得的AD：cDNA质粒分...

不同亚基组成的N型钙离子通道电学特性研究

关键词: 爪蟾卵母细胞  n型钙离子通道  电生理学  

目的：建立不同辅助亚基与功能亚基重组体瞬时表达的N型钙离子通道细胞模型,观察不同亚基组成的N型钙离子通道的电学特征,揭示不同辅助亚基对功能亚基的调节作用。方法：将N型钙离子通道亚基α1B/α2δ/β1b的cDNA分别体外转录为cRNA后,注射至去除滤泡膜的非洲爪蟾卵母细胞中,表达48h后使用双电极电压钳技术记录其电流。结果：向注射N型钙通道cRNA的...

应用亲合层析结合液相色谱串联质谱法发现结核分枝杆菌H37Rv的新的糖蛋白

关键词: 液相色谱串联质谱  结核分枝杆菌  刀豆素a亲和层析  

目的：应用刀豆素A（ConA）亲合层析结合液相色谱串联质谱法（HPLC-MS）发现结核分枝杆菌H37Rv的新的糖蛋白。方法：收集生长2周的结核菌培养液,经过滤浓缩得到培养滤液蛋白（culture filtrate protein,CFP）。应用ConA亲合层析法纯化CFP中的糖蛋白,经SDS-PAGE电泳结合考马斯亮蓝染色后,对蛋白条带进行胰蛋白酶消化。应用HPLC-MS检测消化后的糖...

基于报告基因的PPRE转录调节模型的建立及应用

关键词: 过氧化酶体增殖物激活受体  过氧化酶体增殖物反应元件  转录因子  非诺贝特  吡格列酮  基因  质粒  

目的：建立基于报告基因的靶向PPRE的转录调节模型,并观察不同浓度的PPAR特异性配体对上述模型的影响。方法：PCR扩增获得乙酰辅酶A氧化酶（ACO）启动子上包含PPRE的片段,构建重组报告质粒pGL3-PPRE,将此质粒单独或与PPARa或γ的真核表达质粒（pSG5-PPARα、pSG5-PPARγ）共转染到HEK293细胞中,通过测定荧光素酶（Luc）活力来分析非诺贝特对PPARα激...

关于投稿的统计学要求

TK基因慢病毒载体质粒的构建及慢病毒表达系统的建立

关键词: 单纯疱疹病毒胸苷激酶基因  慢病毒载体  质粒  9l细胞  

目的：构建人单纯疱疹病毒胸苷激酶（HSV-TK）基因的慢病毒载体质粒,并建立其慢病毒表达系统。方法：利用酶切分别获取目的基因TK片段及慢病毒pLenti6/V5载体片段,将目的基因插入载体相应酶切位点,构建pLenti6/V5-TK质粒。构建的重组质粒经PCR、酶切及测序鉴定。利用慢病毒表达系统（ViraPower^TM Lentiviral Expression Systems）,将重组质粒与...

肝特异性假病毒转运系统的构建

关键词: 肝特异性  病毒载体  乙型肝炎病毒  基因转运  

目的：探索一种针对慢性乙型肝炎的特异性长效基因治疗手段。方法：改造乙型肝炎病毒（hepatitis B virus,HBV）为基因治疗载体,敲除其所有的开放阅读框（open reading frames,ORFs）,同时保留包装信号序列,并且插入增强绿色荧光蛋白（enhanced green fluorescent protein,EGFP）作为报告基因。同时构建辅助细胞系,为上述病毒载体（假病毒）提供...

pp32表达引起人肝癌细胞HepG2形态改变

关键词: 肝肿瘤  磷蛋白类  基因表达  

目的：研究pp32在肝癌细胞中的作用。方法：采用RT-PCR的方法钓取pp32全长基因。脂质体介导的方法将pp32基因导入HepG2细胞。观察细胞形态,血清依赖性和接触抑制等细胞表型,测量细胞生长曲线,检测ALP、LDH、γ-GT、ALB和AFP等生化指标。结果：成功钓取了pp32全长基因,筛选获得pp32稳定表达的HepG2细胞株。pp32表达使HepG2细胞伸出细长突起,但不影...

小鼠脾脏树突状细胞的分布与形态学观察

关键词: 树突状细胞  脾  cd11c  cd205  共刺激分子  

目的：认识脾脏树突状细胞的含量、分布及形态特征。方法：运用光镜、电镜观察,免疫组化标记（CD11c、CD205、CD80与CD86、I-A^b）与免疫荧光标记方法,观察小鼠脾脏树突状细胞的含量、分布与形态结构。结果：小鼠脾脏白髓与红髓中散在分布着体积较大的不规则形树突状细胞,含量以白髓边缘区最多,依次为白髓和红髓脾索。CD11c^＋DC约占脾脏细胞总...

人格拉利素新抗菌肽的抗菌作用研究

关键词: 人格拉利素  抗菌肽  抗菌药  氨基酸序列  

目的：进一步证实人格拉利素（hGlyrichin）抗菌肽的抗菌功能。方法：根据人格拉利素的氨基酸序列,设计并合成了19个氨基酸长度的多肽（pCM-19）,采用试管法和菌落生成法分析该肽对靶细菌生长的影响。结果与结论：pCM-19溶液与不同靶细菌共孵育后,明显抑制了细菌的生长,对实验室常用的BL-21工程菌和多种致病菌（包括杆菌、球菌）的生长都有抑制...

双肾藤醇提物降血糖活性的研究

关键词: 双肾藤  降血糖  四氧嘧啶  胰岛素  

目的：研究双肾藤乙醇提取物对四氧嘧啶糖尿病小鼠的降血糖作用。方法：采用85%乙醇煎煮双肾藤,获得其提取物。采用四氧嘧啶诱发糖尿病,建立糖尿病小鼠模型。双肾藤提取物灌胃给药,第一周剂量为1000ms/kg,第2和第3周剂量为500ms/kg,二甲双胍为阳性药（250mg/kg）。每天测定小鼠饮水量和耗食量,给药7d和20d测定小鼠血糖及血浆中总胆固醇、甘油三...

新CpG寡聚脱氧核苷酸体内抗肿瘤与增强免疫活性研究

关键词: cpg寡聚脱氧核苷酸  黑素瘤  免疫活性  白细胞介素12  免疫球蛋白e  

目的：探讨新设计CpG寡聚脱氧核苷酸（ODN）在小鼠体内的抗肿瘤作用及其对荷瘤小鼠免疫功能的影响。方法：建立C57BL/6小鼠腹腔、皮下荷黑素瘤肿瘤模型,腹腔注射CpGODN,观察荷瘤鼠生存时间、肿瘤生长曲线,计算抑瘤率。用酶联免疫吸附试验（ELISA）检测小鼠血清中白细胞介素（IL）12和免疫球蛋白E（IgE）含量;^3H-TDR掺入法检测脾脏B细胞、T细胞...

拉米呋啶治疗慢性乙肝实验指标动态观察

关键词: 乙型肝炎病毒  核酸定量  拉米呋啶  

目的：通过乙肝病毒（HBV）核酸定量、HBV血清学标志物（HBV-M）、ALT、AST指标的监测,观察慢性乙型肝炎患者服用拉米呋啶的疗效。方法：选择986例慢性乙型肝炎患者,治疗组786例,服用拉米呋啶治疗药物（100mg/d）,对照组200例,未服用治疗药物,两组定期采血作HBV-DNA定量、HBV-M、肝功能检测。结果：治疗1年后治疗组391例HBV-DNA阴转（〈10^4cps/...

Syk表达对乳腺肿瘤细胞侵袭迁移作用的影响

关键词: 脾源性酪氨酸激酶  乳腺肿瘤  肿瘤侵袭转移  

目的：探讨脾源性酪氨酸激酶（spleen tyrosine kinase,Syk）在人乳腺癌细胞中的表达及其对肿瘤细胞侵袭迁移能力的影响。方法：RT-PCR法、免疫荧光法检测不同侵袭能力乳腺癌细胞株——MCF-7（低侵袭性）和MDA-MB-231（高侵袭性）Syk mRNA及蛋白的表达;采用脂质体介导的方法,将Syk基因导入Syk（-）乳腺癌细胞株,利用Transwell小室法检测Syk基因...

33例全关节结核的关节镜治疗经验总结

关键词: 关节结核  关节镜术  关节清理术  药物敏感性试验  

目的：探讨应用关节镜治疗全关节结核的方法和疗效。方法：收集1995年2月至2006年5月经关节镜治疗的33例全关节结核病例,其中肩关节结核4例,肘关节结核3例,髋关节结核5例,膝关节结核18例,踝关节结核3例。镜下对关节彻底清理,对干酪样坏死组织或脓液进行结核杆菌培养和药物敏感性试验,术毕置管冲洗。术后关节腔用抗结核药物冲洗1～2周,肩、肘关节...

介导感觉生理功能的瞬时受体电位通道蛋白（TRP）家族研究进展

关键词: 瞬时受体电位通道蛋白家族  感觉生理  信号转导  蛋白质转运  

瞬时受体电位通道蛋白（TRP）家族由一类特殊的阳离子通道蛋白组成,在神经细胞及其他非兴奋细胞中有重要作用,其中在介导多种感觉生理功能方面的作用尤其显著。TRP结构与功能的深入研究为阐明感觉生理功能的分子机制提供了重要线索。本文综述TRP家族在温度感受、机械刺激感受、光感受和化学信号感受等方面的研究进展。

离心机转速的写法及相对离心力的正确表示

肝组织中肝富集转录因子及其调控网络的研究进展

关键词: 基因表达调控  转录因子  肝富集转录因子  肝细胞核因子  

肝脏是机体重要的实质性器官,肝富集转录因子及其相互作用构成的复杂调控网络精确地控制着肝脏的早期发育及其各项功能的发挥。目前依据其结构特征将肝富集转录因子分为7大家族,这里着重介绍这7类肝富集转录因子的结构特征、在肝组织中的生理功能及其调控网络的新进展。

FHL2蛋白的研究进展

关键词: fhl2  lim结构域  功能  相互作用蛋白  肿瘤  

FHL蛋白是分子结构中仅含有4个半LIM结构域的蛋白质家族,人类FHL蛋白有4个成员：FHL1、FHL2、FHL3及ACT。它们通过LIM结构域与某些结构蛋白、激酶、转录调控因子等多种蛋白质相互作用,对某些基因的表达、细胞分化与发育、细胞骨架形成等发挥重要调控作用。FHL2是其中研究最深入的成员。本文介绍FHL2的结构特征、组织和细胞中的分布、FHL2与其他...

三种非阿片小肽对吗啡耐受调节的研究进展

关键词: 吗啡耐受  内皮素a受体拮抗剂  前体速激肽  黑皮素4受体拮抗剂  

吗啡等阿片类镇痛药反复使用造成的镇痛耐受是临床上的一大难题。近期的研究表明,内皮素、P物质前体分子-前体速激肽及黑皮素等三种非阿片小肽与吗啡镇痛和耐受密切相关。内皮素通过内皮素A受体（ETAR）、黑皮素通过黑皮素4受体（MC4R）分别以不同机制调节吗啡镇痛并能够预防其耐受的发生,而前体速激肽则可能是调控吗啡镇痛和耐受的关键分子,本...

依达拉奉防治缺血性脑损伤研究的新进展

关键词: 依达拉奉  自由基清除剂  缺血性脑卒中  新生儿缺血缺氧性脑病  联合治疗  

近年来,依达拉奉脑保护作用的研究取得了很大进展,尤以对缺血性脑卒中和新生儿缺血缺氧性脑病的防治研究最为深入,而联合治疗策略也得到了广泛的重视。本文就近5年这些热点研究的新进展进行综述。

肿瘤-睾丸抗原研究进展

关键词: 定义  分类  表达特点  临床试验  

肿瘤-睾丸抗原又称CT抗原,是一类在多种肿瘤组织中表达而在正常组织中除睾丸外不表达的抗原,因而是很有前途的肿瘤疫苗候选抗原。本文就目前肿瘤-睾丸抗原的定义、分类及其在肿瘤组织及正常组织中表达的特点和作为疫苗的临床研究进展作一综述。

肿瘤放射治疗与免疫治疗联合应用的研究进展

关键词: 肿瘤  放射疗法  免疫疗法  抗原  

放射治疗（radiation therapy,RT）是一种重要的癌症局部治疗手段,免疫治疗是肿瘤全身系统性治疗方法之一,二者联合应用可以起到很好的协同抗肿瘤作用。本文将对RT与免疫治疗联合应用治疗肿瘤的研究进展进行综述。

重组人粒细胞集落刺激因子和重组人白介素11对3.5Gy照射狗的治疗作用

关键词: 放射损伤  造血因子  急性放射病  重组人白介素11  重组人粒细胞集落刺激因子  造血干细胞  

急性放射病的主要病理变化是骨髓造血功能受到严重抑制，外周血白细胞和血小板极度缺乏，由此而引起的感染和出血是导致患者死亡的主要原因。重组人粒细胞集落刺激因子（rhG—CSF）和重组人白细胞介素11（rhIL-11）能刺激骨髓等造血器官生成白细胞和血小板，为了观察rhIL-11和rhG-CSF联合给药对重度骨髓型急性放射病的治疗作用，给临床同类患者...

MMP-9、VEGF在非小细胞肺癌中的表达及其临床意义

关键词: 癌  非小细胞肺  基质金属蛋白酶  血管内皮生长因子类  

非小细胞肺癌（non-small cell lung cancer，NSCLC）是最常见的恶性肿瘤之一，由于发病率高，并缺乏有效的治疗手段，现已成为恶性肿瘤最主要的死亡原因。大量研究证明，NSCLC的侵袭与转移是造成其不良预后的主要原因。癌细胞要完成转移需要经过多个环节，有多种因素的参与，其中细胞外基质的降解、肿瘤新生血管的形成是肿瘤转移的重要原因。

剖宫产后子宫腹壁瘘合并子宫内膜异位症1例分析

关键词: 剖宫产  腹壁瘘  子宫内膜异位症  

1 病例资料 患者，27岁。孕4产2人流2。主因剖宫产术后75d，腹壁切口不愈合反复渗血、流脓2月余于2006年7月7日就诊。既往月经规律，末次月经：2006年6月15日。既往史：2005年12月诊断为原发性血小板减少性紫癜（ITP），血小板最低达19×10^9／L，服用泼尼松40mg／d，1周后血小板恢复正常。

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急性左心功能衰竭89例救治体会

关键词: 左心功能衰竭  急性  治疗  

急性左心功能衰竭为急救工作中常见的内科急症，起病急骤，多有诱因存在。病程凶险，临床表现错综复杂，如不及时抢救，常可导致患者死亡，已成为老年人住院和死亡的主要原因。鉴于该病的不良预后，现将近年来我院救治的89例急性左心功能衰竭患者救治资料回顾性分析，报告如下。