高糖及TNF-α对RAW264.7细胞向破骨细胞分化的影响

侯念宗 刘文宙 陈炳豪 陈皓 Aditya 宋卫东 广州中山大学孙逸纪念医院骨外科 510120

关键词:高糖 raw264 7 破骨细胞 糖尿病足 

摘要:目的观察高糖及TNF-α的培养条件对RAW264.7细胞向破骨细胞诱导分化的影响。方法在正常、高糖(30mmol/L)及TNF-α(10μmol/L)条件下培养RAW264.7细胞后,加入浓度为100ng/mL的细胞核转录因子κB受体激活物的配体(receptor activator of NF-κB ligand,RANKL)为诱导剂,诱导RAW264.7向破骨细胞分化;诱导9天后,抗酒石酸酸性磷酸酶(TRAP)染色,比较各组TRAP+细胞数,RT-PCR及Western Blot检测各组破骨细胞标志基因CTR和MMP-9的表达。结果不同的培养条件下RANKL均能诱导RAW264.7分化为成熟的破骨细胞,其中TNF-α环境中RAW264.7形成的TRAP+阳性细胞数、CTR和MMP-9的表达最高,而在高糖环境下最低。结论 TNF-α可以促进RAW264.7向破骨细胞分化,而高糖对这个过程可能是抑制作用,这一现象符合Ⅰ型和Ⅱ糖尿病患者骨质破坏的表现;高糖及TNF-α的培养条件下RANKL对RAW264.7的作用可模拟糖尿病足病变微环境中OC的诱导分化的过程。

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