作者:徐浩; 张彦明; 冶贵生; 郭抗抗 期刊:《中国预防兽医学报》 2007年第03期
利用质粒载体在细胞内转录并加工成siRNA的方法,设计3对针对猪瘟病毒3'-UTR不同位点的干扰片段,分别与干扰载体pGenesil-1连接,转化DH5a,筛选阳性克隆得到重组干扰质粒pGene-1,pGene-2和pGene-3,脂质体介导转...
作者:张士军; 林军; 焦杨; 蒋伟哲; 黄仁彬 期刊:《中药材》 2006年第12期
目的:观察复方六月雪体外抗乙型肝炎病毒(HBV)的作用。方法:采用血清药理学法进行实验,复方六月雪含药血清作用于HepG2.2,15细胞,分别在第72h和144h收集细胞培养上清液,采用实时荧光定量PCR法检测上清液HBV...
合成肽核酸(PNA)片段,由Oligofectamine^Tm转染至HepG2.2.15细胞与HBV各编码区保守区域相结合.用ELISA方法测定HepG2.2.15细胞中HBsAg、HBeAg滴度,PCR测定HBV DNA含量.通过计算抑制百分率,筛选有效PN段.结果 在500...
作者:刘宏; 王莉君 期刊:《兽医导刊》 2014年第12X期
猪圆环病毒(porcine circovirus,PCV)属圆环病毒科圆环病毒属,是目前为止已知的最小的动物病毒之一。根据致病性、抗原性和核酸序列的差异,可将PCV分为PCV-1及PCV-2两个型。PCV1为非致病性的病毒,由德国学者Ti...
作者:杨磊; 曹以诚; 高强; 葛洪 期刊:《生物技术通报》 2012年第04期
旨在研究靶向于HBsAg的肝脏特异性siRNA,实现核酸药物高靶向性、高特异性基因治疗乙肝。通过重组PCR的方法构建靶向于HBsAg的肝脏特异性表达的siRNA的核酸药物。将目标载体转染HepG2 2.2.15细胞,用ELISA的方法测定转...
作者:郑纪山; 唐雨德; 何长伦; 高健; 常静霞 期刊:《医学研究通讯》 2010年第05期
摘要目的观察HBV感染者的HBcAg肽特异性CD8^+T细胞体外抑制乙型肝炎病毒(HBV)的作用和探讨非溶细胞机制清除病毒的效应分子。方法以HepG2.2.15细胞为靶细胞。用HLA—A匹配的HBcAg肽特异性CD8^+T细胞克隆(效应...
作者:柴瑜; 罗欣; 黄海良; 胡道军; 陶自泽; 张胜权 期刊:《中国生化药物》 2009年第06期
目的研究白介素29(IL-29)体外抗乙肝病毒的效果。方法从RNA水平探讨了IL-29抗乙肝病毒的效果。RT-PCR分析IL-29诱导抗病毒蛋白MxA、2′,5-′OAS、PKR和RNase L mRNA水平表达;同时Western blot分析IL-29激活的信号...
作者:张永红; 贺兴鄂; 唐晓鹏; 王文龙; 罗开忠 期刊:《中国医科大学学报》 2010年第04期
目的观察HepG2.2.15细胞中乙型肝炎病毒X(HBx)基因沉默对酿酒酵母YKL-40蛋白表达的影响。方法构建靶向HBx基因的siRNA真核表达载体pRNAT-HBx和阴性对照质粒,同时设空白对照组,采用Lipofectinamine 2000脂质体转染...
作者:杨芳 杨春 苏建家 曹骥 李瑗 欧超 期刊:《中国癌症防治》 2011年第01期
目的探讨银杏叶提取物对乙型肝炎病毒分泌抗原的抑制作用。方法用不同浓度的银杏叶提取物作用于HepG2.2.15细胞。期间分不同的时间段用MTT法检测银杏叶提取物对HepG2.2.15细胞的毒性作用并收集细胞上清,用酶联免疫吸...
作者:胡慧 王平 胡亚萍 石和元 孔明望 刘萍 期刊:《中华中医药》 2008年第01期
目的:探讨温胆汤改良方含药血清对AD细胞模型JNK、c—iun磷酸化水平的影响。方法:经老化处理的AS5—35(终浓度为5μmol/L)与NG108—15细胞共同孵育24h建立AD细胞模型,运用中药血清药理学方法,以温胆汤改良方含...
作者:刘军 黄正明 王选举 田丹 曹文斌 期刊:《解放军药学学报》 2010年第01期
目的观察绿原酸对2.2.15细胞分泌HBsAg、HBeAg的抑制作用。方法以2.2.15细胞为研究对象,通过细胞毒性实验确定绿原酸对细胞的最大无毒浓度,在最大无毒浓度以下将药物用培养液对倍稀释成250、125、62.5μg/ml,加入2.2....
作者:朱晓莹 王燕菲 期刊:《右江民族医学院学报》 2012年第04期
目的探讨阳离子脂质体介导绿色荧光蛋白质粒转染HepG2.2.15细胞的转染效率。方法以阳离子脂质体包裹绿色荧光蛋白质粒转染HepG2.2.15细胞,观察不同配比的脂质体与绿色荧光蛋白的转染率。结果对照组未见绿色荧光...
作者:王学兵 魏战勇 崔保安 李长雷 徐端红 陈红英 期刊:《中国畜牧兽医》 2008年第12期
本试验利用水煮醇提方法提取金银花的主要成分绿原酸,通过观察PK-15细胞病变效应(CPE)来评价绿原酸不同加药方式(先加药后接种病毒,先接种病毒后加药)对猪细小病毒(PPV)的体外作用效果。结果表明,在安全浓度范...
作者:邓益斌 张梁 王燕菲 期刊:《基础医学与临床》 2010年第04期
目的探讨乙型肝炎病毒S基因反义锁核酸(LNA)片段在HepG22.2.15细胞内的抗病毒效果及有效LN段筛选。方法设计合成互补于HBVS基因mRNA翻译起始区同一位点的4条不同序列长度LN段,以阳离子脂质体介导,作用于HepG22.2.1...
作者:周秀敏 李军 黄祖瑚 林菊生 金由辛 期刊:《实用肝脏病》 2008年第02期
目的探讨HBx基因在肝细胞癌侵袭转移中的作用。方法利用psiRNA-hHlneo质粒,构建针对HBx基因的shRNA表达载体psiRNA1、psiRNA2、psiRNA3,并转染HepG2.2.15细胞,用逆转录聚合酶链反应检测shRNA对HBx基因mRNA表达...
作者:田宏 吴锦艳 龚真莉 郑海学 孙世琪 尚佑军 刘湘涛 谢庆阁 期刊:《畜牧兽医学报》 2008年第04期
从猪水疱病全长感染性cDNA中,应用PCR技术扩增到SVDV结构蛋白P1基因,并在目的片段的5′端引入Kozak序列(Kozak,1987),定向克隆于逆转录病毒载体pBABE puro。经PCR、酶切和序列分析鉴定,获得阳性重组质粒。将...
作者:任广立 方颖 张卫云 马恒颢 许蔓春 欧巧群 罗爱武 王鲜艳 彭智勇 白雪帆 期刊:《中华实用儿科临床》 2008年第22期
目的了解基于载体的siRNA对HepG2.2.15细胞中HBV的抑制作用,观察特异性siRNA载体对细胞的毒副作用及可能的非靶向效应,探讨新的抗病毒治疗手段。方法根据GenBank收录HepG2.2.15细胞系中HBV基因全序列,设计构建针对HB...
作者:王三龙 蔡兵 崔承彬 阎少羽 吴春福 期刊:《药物分析》 2008年第02期
目的:探讨中药单体吉九里香碱是否通过诱导HCT-15细胞凋亡而发挥其抑制肿瘤细胞增殖的作用。方法:采用MTT法检测细胞增殖抑制作用;采用透射电子显微镜观察细胞凋亡的形态学变化;库尔特全自动颗粒粒度分析药物引...
作者:吉守祥 鞠怀强 向阳飞 李深 王一飞 期刊:《中药材》 2011年第03期
目的:从28种藏药提取物中筛选体外抗乙型肝炎病毒(HBV)活性。方法:采用CPE法观察药物对HepG2.2.15的无毒浓度(TC0),并在此基础上采用ELISA法检测药物对HepG2.2.15表达乙型肝炎表面抗原(HB-sAg)和乙型肝炎E抗...
作者:杨坤 贾雷 魏思思 江凤娟 期刊:《中成药》 2011年第11期
目的观察苷泰胶囊对乙肝病毒复制的抑制作用。方法使用鸭乙肝炎病毒使1日龄的北京鸭感染,造模7 d后给药(ig),使用斑点杂交法检验用药后(5、10 d)及停药5 d后血清中的DHBV DNA含量;以转染的2.2.15细胞为模型,分别...