关键词：绿脓杆菌外毒素 重组免疫毒素 原核表达 

摘要：目的 构建大鼠γ干扰素诱导蛋白10（IP-10）基因和绿脓杆菌外毒素衍生物PE38KDEL基因的原核融合表达载体，并对其表达进行鉴定。方法通过PCR获得本实验所需要的IP-10基因片段，通过酶切含有PE38KDEL的质粒PRKL459K获得绿脓杆菌外毒素衍生物PE38KDEL基因，再通过适当的酶切及连接反应，构建IP-10与PE38KDEL融合基因的原核表达载体pET-32a（＋）-IP-10-PE38KDEL，重组质粒经限制性内切酶、PCR及DNA序列测定证实构建成功后，转化感受态大肠杆菌B121，经WIG诱导表达，表达产物经SDS-PAGE及Western-blotting分析证实其相对分子质量和特异性。结果酶切分析、PCR及DNA序列测定证实，IP-10-PE38KDEL融合基因被成功克隆入原核表达载体pET-32a（＋），并在大肠杆菌中稳定表达，表达产物的相对分子质量与预期值相符，且所表达蛋白可被抗PE的特异性抗体识别。结论成功构建了原核表达载体pET-32a（＋）-IP-10-PE38KDEL，其融合基因在大肠杆菌中高效表达，为进一步研究其功能奠定了基础。

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