关键词：重组腺病毒 免疫调控 

摘要：目的制备表达人成熟miR-155的重组腺病毒，检测该免疫调控分子在肺癌细胞A549的表达及其生物学活性。方法以正常人基因组DNA为模板，PCR扩增约1000bp完整的pri—miR-155基因序列，克隆到T载体pTA2上，测序证实后，正向亚克隆人腺病毒穿梭载体pAdTrack—CMV中，构建pAdTrack—CMV／pri —miR-155重组质粒，与pAdEasy-1腺病毒骨架质粒重组并扩增后转染293FF细胞，进行重组腺病毒的包装、扩增，对其进行安全性、滴度的测定。用此腺病毒感染A549细胞，采用RT—PCR法检测成熟miR-155的表达，双报告基因法检测其干扰活性。结果构建的人pAdTrack—CMV／pri—miR-155重组质粒经酶切及测序鉴定正确；用此腺病毒感染A549细胞后，RT—PCR检测成熟miR-155表达较无关序列病毒感染对照组显著增强。腺病毒感染A549细胞后，通过转染后双报告基因检测相对萤光素酶活性较对照组降低，显示此腺病毒感染A549细胞后，可有效表达成熟miR-155，并具有生物学活性。结论成功制备人pri—miR-155重组腺病毒，并在感染肺腺癌细胞A549后高效表达成熟有活性miR-155。

免疫学杂志要求:

{1}请在文稿后面注明稿件联系人的姓名、工作单位、详细联系地址、电话（包括手机）、邮编等信息，以便联系有关事宜。

{2}作者对来稿的真实性及科学性负责。依照《中华人民共和国著作权法》的有关规定，本刊可对来稿做文字修改、删节。凡有涉及原意的修改，则提请作者考虑。修改稿逾期3个月不寄回者，视作自动撤稿。

{3}中文标题一般不超过20字，正文层次标题应简短明确，可不编号；如需编号，各层次一律用大写数字连续编号，依次为：一、（一）、1、（1）等。

{4}参考文献著录采用数字加方括号编序集中列于文后，其著录格式如下：序号、主要作者、文献及载体、出版项（出版者、出版年月）

{5}选用３~８个词或词组反映论文的中心内容，同时应翻译为相应的英文关键词。题名、作者姓名、作者单位、摘要、关键词的英译置于文末。

注：因版权方要求，不能公开全文，如需全文，请咨询杂志社