农业生物技术学报杂志是由中华人民共和国教育部主管,中国农业大学;中国农业生物技术学会主办的一本北大期刊。
农业生物技术学报杂志创刊于1993,发行周期为月刊,杂志类别为科学类。
杂志介绍
农业生物技术学报杂志是由中华人民共和国教育部主管,中国农业大学;中国农业生物技术学会主办的一本北大期刊。
农业生物技术学报杂志创刊于1993,发行周期为月刊,杂志类别为科学类。
主管单位:中华人民共和国教育部
主办单位:中国农业大学;中国农业生物技术学会
国际刊号:1674-7968
国内刊号:11-3342/S
发行周期:月刊
全年订价:¥820.00
关键词: bt棉花 靶标害虫 环境影响 抗性治理
Bt转基因棉花于1997年在我国商业化种植,到2006年种植面积已达棉花总面积的70%。环境影响监测表明,Bt棉花有效地控制了棉铃虫(Helicoverpa armigera)和红铃虫(Pectinophora gossypiella)的发生和为害,但盲蝽蟓(Hemiptera:Miridae)类害虫演化上升成为棉田的主要害虫。抗性分析显示,虽然棉铃虫自然种群对Bt棉花抗性基因频率没有明显的...
关键词: 原核表达 纯化 生物学活性
对含有鸡白细胞介素-18(ChIL-18)基因的质粒在大肠杆菌(Escherichia coil)内进行诱导表达,经亲和层析法对表达产物进行纯化,用微量细胞病变抑制法CEF-VSV系统,检测其对SPF鸡脾淋巴细胞诱导产生γ-干扰素(IFN-Y)的活性和其对病毒的抑制效果;用^3H-TdR掺入法和MTT法分别检测其对T淋巴细胞诱导转化和NK细胞杀伤活性的作用。结果表明,经诱...
关键词: 猪 smaf1基因 cdna克隆 表达谱
采用比较基因组学和RT-PCR方法,根据人和小鼠SMAF1基因的保守序列,设计简并引物,克隆了猪SMAF1基因的cDNA序列,大小为256bp(GenBank登录号为DQ191892),包括一个编码81个氨基酸的完整编码区,该序列与人和小鼠的SMAF1基因序列的相似性分别为86%和78%,预测的氨基酸序列与人、小鼠、牛和大鼠SMAF1蛋白的氨基酸序列的相似性分别为81%、67...
关键词: 长的基因表达序列标签 glgi改良 新基因鉴定
将长的基因表达序列标签(LongsAGE)和结合标签的基因序列延伸(GLGI)技术相结合,GLGI的方法进行改良。(1)将原始GLGI方法中正向引物中长为10bp的SAGE标签特异序列改为17bp的LongSAGE标签;(2)针对不同LongSAGE标签,在PCR反应中给定相应不同的退火温度;(3)在PCR反应中用普通的DNA聚合酶代替高保真酶(Pfu):(4)在PCR反应的克隆中...
关键词: 原始生殖细胞 鸡胚 细胞分化 体外培养
从第19期(孵化68-72h)鸡(Gallus domesticus)胚生殖嵴分离原始生殖细胞(PGC),通过PGC-体细胞共培养进行了原代和传代培养,并对PGC做了c-kit免疫组化鉴定。通过改变PGC的体外培养条件:添加或不加胎牛血清(FCS),使用或不使用颗粒细胞饲养层,以诱导PGC的分化,同时分别用神经元烯醇化酶(NSE)和角蛋(keratin)免疫细胞化学法鉴定分...
关键词: 乳腺 上皮细胞 蛋氨酸 蛋氨酸二肽 基因表达
采用组织块培养方法获得奶牛乳腺上皮细胞,通过添加不同浓度的蛋氨酸以及等量的蛋氨酸和蛋氨酸二肽之间的替换,研究其对体外培养的乳腺上皮细胞酪蛋白αs1基因表达的影响。蛋氨酸添加水平为0、20、40、60、80和100μg/mL,结果表明,添加蛋氨酸的浓度为0-60μg/mL时酪蛋白αs1基因表达随蛋氨酸浓度的增加而增强,60-100μg/mL时酪蛋白αs1随蛋氨...
关键词: 异性孪生不育母牛 性染色体嵌合体 pcr技术
根据异性孪生不育母牛性染色体嵌合体是XX/XY,而正常母牛性染色体型为XX这一现象,研究开发了一种基于PCR技术检测异性孪生不育母牛的方法:利用牛1.715微卫星做内标基因检测样品DNA的质量,在此基础上,检测被检母牛体内是否存在Y染色体特异的Sry基因,如果检测出Sry基因,则判定被检测牛是异性孪生不育母牛,如果没有检测出Sry基因,则判定...
关键词: 绵羊 高繁殖力
采用PCR-SSCP技术检测抑制素α(inhibin α,/NHA)基因5‘调控区和外显子1在高繁殖力绵羊品种(小尾寒羊)以及低繁殖力绵羊品种(中国美利奴绵羊、考力代绵羊和南非肉用美利奴绵羊)中的单核苷酸多态性,同时研究该基因对小尾寒羊高繁殖力的影响。小尾寒羊、中国美利奴绵羊和考力代绵羊在/NHA基因5’调控区发生了1处碱基突变(316C→T),南...
关键词: 定位 基因表达 辐射杂交板
通过辐射杂交板的方法将猪的Tool-like Receptor 4(TLR4)定位在SSC1q2.9→q2.13,它与SW1957紧密连锁(15cR LOD score 15.16)。用RT-PCR表明TLR4 mRNA在猪的睾丸、灰质、肌肉、白质、肾脏、心脏、小肠、胸腺、淋巴结、脾、肺和肝脏等各种组织中广泛表达,在肺中的表达量最高。TLR4 mRNA在肺中的表达量可能与猪肺部疾病有关。
关键词: 鸭 二级结构 同源模建
为了阐明鸭主要组织相容性复合体I(MHCⅠ)的结构并推进其功能研究,采用Full RACE PCR法从鸭淋巴细胞cDNA文库中克隆了鸭MHCⅠ轻链(Anp1-β2m)cDNA,GenBank登陆号为AB246408。随后,采用pMAL-p2X/E.coli TB1原核表达系对Anp1-β2m成熟肽基因进行了可溶性表达,表达的融合蛋白命名为MBP-β2m。融合蛋白经过Amylose树脂亲和层析纯化、Western ...
关键词: 牛 多态性
BoLA-DRB3基因是牛主要组织相容性复合物(major histocompatibility complex,MHC)基因家族中的Ⅱ类基因,它是该基因家族中最主要的功能基因,所编码的MHC抗原与免疫应答和抗病性密切相关。其第2外显子编码抗原的主要功能区。实验采用PCR-RFLP方法对鲁西牛、南阳牛和晋南牛3个群体的BoLA-DRB3基因第2外显子扩增产物进行多态性分析,检测到A、...
关键词: 绵羊 产羔数
设计7对引物,采用PCR-SSCP技术检测抑制素瞰亚基(inhibin βA,INHBA)基因在高繁殖力绵羊品种(小尾寒羊和湖羊)和低繁殖力绵羊品种(多赛特羊、特克塞尔羊和德国肉用美利奴羊)中的单核苷酸多态性,同时研究该基因对小尾寒羊产羔数的影响。结果发现引物1-2、2-2和2-4扩增片段有多态性,其余4对引物的扩增片段均不存在多态性。引物1-2,多赛...
关键词: 斑鳠 西江地理群 遗传多样性 rapd
为了解斑鳠(Mystus guttatus)不同地理种群之间的遗传分化程度,基于RAPD技术,分析了珠江水系西江段野生斑鳠的遗传多样性。利用20个随机引物对30个斑鳠个体的基因组DNA进行了PCR扩增,共扩增出3210条DN段,平均每个个体扩增出107条带。在检测到的107个位点中,多态位点数为48个,占44.9%,仅有一个引物S30没有扩增出多态带。个体间最大的...
关键词: 西红柿原系统素 水稻 转基因植株 伤害信号转导
构建了2个含西红柿(Lycopcrsicon esculentum)原系统素基因的双元载体pNAR304(UbiI5'+Prosystmin+NOS3’)和pNAR305(UbiI5'+prosystemin+NOS3'+PinⅡ5'+PinⅡ+PinⅡ3’),并用根癌农杆菌(Agrobacterium tumefaciens)介导方法将其转入水稻(Oryza sativa)品种秀水63、合江19和日本晴。经潮霉素抗性、PCR和Southern blot确证...
关键词: 淀粉生物合成 淀粉脱支酶 极限糊精酶
构建了含极限糊精酶基因片段反向重复结构的RNAi载体,抑制水稻籽粒中极限糊精酶基因表达获得了极限糊精酶基因功能缺失突变体。经酶切及序列测定证实,成功地构建了胚乳特异表达启动子启动的水稻极限糊精酶基因反向重复结构RNAi载体;通过根癌农杆菌(Agrobactcrium tumefaciens)介导水稻(Oryzasativa sp.japonica)转化,经PCR及Southern杂...
关键词: 紫杆柽柳 谷胱甘肽硫转移酶 基因克隆 原核表达 酶活性检测
根据GenBank已公布的植物谷胱甘肽硫转移酶基因EST序列设计引物,利用3'和5'RACE方法,获得紫杆柽柳GST基因(TaGST)全长cDNA序列,全长为1175bp,开放读码区672bp,编码224个氨基酸(GenBank accission No.DQ683363)。其所编码的蛋白与大豆的GST10同源性为48%。利用pET-28a(+)构建了紫杆柽柳(Tamatix androssowii)GST基因的原核表达...
关键词: 番茄 可溶性固形物 caps 分子标记辅助选择
TA1218是野生多毛番茄(Lycopersicoum hirsutum)LA1777的一个近等基因系,带有LA1777第1染色体的含高可溶性固形物基因(QTL)的长1.2cM的染色体片段。研究以TA1218与栽培番茄(L.esculentum)骨干系9706、F1代及回交一代(BC1)为材料,对该染色体片段进行了AFLP分析,并对QTL附近的4个RFLP标记进行了CAPS标记的转化研究,共获得了2个CAPS...
关键词: 花瓣特异性启动子 花青素调节基因lc 烟草 矮牵牛 花色
利用PCR方法从油菜(Bmssica napus)基因组中扩增得到花瓣特异性启动子XY355,构建该启动子与玉米(Zea mays)花青素调节基因Lc的植物表达载体pXY60。通过根癌农杆菌(Agrobacterium tumefaciens)介导,将pXY60分别转化烟草(Nicotiana tabacum)和矮牵牛(Petunia hybrida)。对再生植株进行PCR检测,结果表明,外源基因已经整合到转基因烟...
关键词: 普通野生稻 稻米 加工品质 外观品质 qtl定位
利用以籼稻(Oryza sativa ssp.indica)品种特青为遗传背景的云南元江普通野生稻(O.rufipogon Griff.)(简称元江普野)渗入系为材料,采用单标记回归分析和渗入片段叠代法,对出糙率、整精米率、垩白粒率、垩白度、长宽比等5个品质性状的QTL进行了分析,初步定位了16个QTL,有10个QTL来自野生稻的等位基因能改良群体的品质性状。在第5染...
关键词: 稻米深加工产品 基因组 pcr 十六烷基三乙基溴化铵沉淀法
以4种米粉为原料,每个样品做3个梯度(120、800和2000mg),采用改进的经典酚/仿法、CTAB(十六烷基三乙基溴化铵)沉淀法以及盐酸胍/氯仿法提取基因组,经PCR扩增内标基因(SPS)检测方法的优劣。结果显示,120mg的样品经3种方法提取的基因组均不能扩增出内标基因;800和2000mg的样品只有用CTAB沉淀法提取的基因组(采用相同的模板量)能全...
关键词: 兽用疫苗 支原体 检测
建立了检测兽用疫苗中支原体污染的PCR-ELISA方法,探索其最佳实验条件及优化组合。实验依据GenBank中登录的鸡源支原体和猪源支原体16SrRNA基因序列(登录号:Mg,AY744942;Mhp,AE017244;Mhs,AY973563;Mf,X63377),运用DNAStar软件和Primer 5.0软件设计PCR特异性引物和探针,其中引物用地高辛标记,探针用生物素标记。以培养的支原体中...
关键词: 鸡传染性支气管炎病毒 s1基因 表达 抗原性
利用基因重组技术将鸡传染性支气管炎病毒(IBV)S1基因分段(A和B段)克隆到pGEX—6p-1载体中,用IPTG诱导表达。SDS-PAGE电泳结果显示有明显的融合蛋白表达条带。通过IBV特异性抗体的Western blot检测,两段表达产物均能与抗体发生特异性反应,证明表达产物具有部分抗原性。用Glutathione Sepharose 4B纯化出A段和B段的GST融合蛋白。将纯化得...
关键词: 禽网状内皮组织增生病病毒 酶标法
用网状内皮组织增生病病毒(Reticuloendotheliosis virus,REV)感染SPF鸡造成免疫抑制状态,用双抗体夹心ELISA对鸡脾淋巴细胞γ-干扰素(IFN-γ)的分泌量进行了测定。结果显示,SPF雏鸡接种REV后,除呈现生长缓慢症状外,并出现了中枢免疫器官严重萎缩等免疫抑制状态的典型表现。IFN—γ ELISA显示,REV感染后7d(7dpi),脾淋巴细胞IFN-γ的分泌...
关键词: 乙肝表面抗原基因 载体构建 百脉根 转化
利用PCR成功的从乙肝患者血清中扩增出乙肝表面抗原基因,并构建了含有此基因的植物表达载体pBHB。用根癌农杆菌(Agrobacterium tumefaciens)介导叶盘法将乙肝表面抗原基因转入百脉根(Lotus comiculatus),从转化植株中提取DNA做PCR检测、Southern杂交,阳性结果验证了目的基因已整合到百脉根的基因组中,转化效率为20%,证实转化的载体真...
关键词: 番茄黄化曲叶病 台湾番茄曲叶病毒 bs分离物 分子特征
广东汕头番茄(Lycopersicon eseulentum)上发生的黄化曲叶病毒病,田间症状表现为病株明显矮化、病叶褪绿黄化、叶小且卷曲和叶质较脆硬。对该病毒代表分离物(BS)基因组DNA-A克隆和测定结果表明,其全长为2740nt(GenBank accession No.DQ237918),具有菜豆金色花叶病毒属(Begomovirus)病毒基因组典型特征,为闭合环状单链DNA,有6个ORF...
关键词: 枯草芽胞杆菌 抗病毒活性 表面活性素 脂肽
利用烟草花叶病毒(Tobacco mosaic virus,TMV)的枯斑寄主和系统侵染寄主测定了枯草芽胞杆菌(Bacillus subtilis)SN-02的发酵滤液对TMV的抑制作用,同时对抗病毒物质的表面活性剂特性及化学成分进行了分析。在心叶烟(Nicotiana glutinosa)上的抗病毒活性结果表明,SN-02的发酵滤液与TMV混合接种,枯斑抑制率达98.54%,接种前喷施的预防...
关键词: 玫瑰黄链霉菌 几丁质酶 克隆 表达
应用PCR扩增克隆到玫瑰黄链霉菌(Streptomyces mseoflavus)的几丁质酶基因chiC的整个催化域部分,将其与包含信号肽区、纤维素结合区、几丁质结合区三个结构功能域的链霉菌(S.lividans)chiC基因片段相连接,插入pET23b(+)质粒上,构建表达载体pLCH,用来转化大肠杆菌(Escherichia coli)JM109(DE3),转化子进行破壁之后在胶体几丁质...
关键词: 枯草芽胞杆菌 木聚糖酶 同源重组 整合
以木聚糖酶基因为研究对象,构建了枯草芽胞杆菌(Bacillus subtilis)稳定的高效表达系统。采用PCR方法从芽胞杆菌(Bacillus sp.)基因组DNA中分别扩增出完整和不带启动子的木聚糖酶(xynA)基因;利用芽胞杆菌的强启动子,即S-层蛋白的启动子,通过SOE(splicing by overlapping extension)法连接到xynA基因上得到重组基因S-xyaA,将xynA和...
关键词: 弹性蛋白酶 分批培养 动力学模型 拟合
对70L发酵罐内Bacillus sp.EL31410分批发酵动力学模型进行了研究。在Logistic方程和Luedeking-Piret方程的基础上,建立了弹性蛋白酶分批发酵动力学模型。根据实验数据确定了模型参数,得到菌体生长动力学模型为dx/dt=0.180(1-x/9.77)x,弹性蛋白酶生产动力学模型为dp/dt=-dx/dt+4.278x以及葡萄糖消耗动力学模型-ds/dt=0.03dx/dt-7.53x。将...
关键词: 里氏木霉 甘露聚糖酶 毕赤酵母
以里氏木霉(Trichoderma reesei)RNA为模板,采用RT—PCR扩增的方法获得不带自身信号肽man1基因的cDN段。构建了重组表达载体pPIC9K-man1,重组质粒SacⅠ线性化后用PEG(聚乙二醇)法导入毕赤酵母(Pichia pastoris)菌株GS115中,通过PCR和表型鉴定表明,man1基因已经整合到毕赤酵母染色体上。经大量筛选,获得高效分泌表达甘露聚糖酶的毕赤...
关键词: lactobacillus reuted pyr8 亚油酸异构酶 大肠杆菌 活性检测
以bcrobacillus reuteriPYR8菌株基因组为模板,利用PCR方法扩增出亚油酸异构酶(linoleate isomerase,LI)基因,亚克隆到pET30a中构建原核表达载体pET30a-LI,并转化入大肠杆菌(Escherichia coli)BL21(DE3)中。其重组菌株在37℃条件下,经1.0mmol/L IPTG诱导表达重组LI蛋白,该蛋白以包涵体形式存在,表达量占菌体总蛋白的39.2%。采...
关键词: 克隆 酶活测定
实验通过PCR程序从提取的土壤总DNA中扩增出草甘膦N-乙酰转移酶基因(gaf),酶解后插入大肠杆菌(Escherichia coli)表达载体pGEX-6p-1,获得克隆株。基因测序表明,与GenBank中的AX543338核苷酸序列有99.3%的同源性。将GAT经亲和层析纯化后,对该酶的酶学性质进行了初步分析,结果表明,该酶的最适温度为30℃,最适反应pH7。检测了6种金属...
关键词: 植物防御 诱导抗虫基因 基因调控 信号传输途径
植物的诱导抗虫基因可分为3类,即防御基因、防御物质合成基因和信号途径基因,综述了这3类基因的种类及其功能。植物诱导抗虫基因除了受昆虫和损伤诱导外,还受植物激素茉莉酮酸酯、水杨酸、阿司匹林、脱落酸和乙烯,以及其它信号物质的调控,这些信号物质的调控途径组成了复杂的植物防御的信号传输网络。植物诱导抗虫基因的研究将为害虫防治提...
关键词: 胚乳 异时性 等位变异 基因组印记
综述了作物种子胚乳中等位基因表达多态性的研究进展,介绍了基因组印记现象及其对作物种子胚乳性状的表观遗传及种子发育的影响。
关键词: 猪 骨骼肌 转录组 基因表达系列分析
基因表达系列分析(SAGE,serial analysis of geneexpress)技术(Velculescu et al,1995)是一种高通量基因表达分析技术,目前已在人、动物、植物、微生物等许多研究领域广泛应用(Renuand Narendra,2004)。LongSAGE是Saha et al.(2002)对原始SAGE技术的进一步改良。本研究将该技术用于猪骨骼肌转录谱分析,成功地构建通城猪胚胎骨骼肌L...
关键词: 绵羊 卵母细胞 体外胚胎生产 成熟培养 体外受精
体外胚胎生产能够扩大胚胎来源,降低胚胎生产成本,同时有利于种质资源的国际间交流和拯救濒危动物,因此受到广泛关注(桑润滋,2002)。但目前完全体外化生产胚胎还有很多尚未解决的问题,如囊胚率较低、质量差。本研究着重于系统地探讨体外受精中的一些影响因素,以期为改善绵羊体外胚胎生产技术提供有用的参考依据。
关键词: 卵母细胞 玻璃化冷冻 染色体 纺锤体
通过冷冻体外培养成熟的猪MⅡ卵母细胞,分析了不同冷冻方案对卵母细胞形态、纺锤体微管和染色体形态结构影响,探讨冷冻前后猪卵母细胞超微结构的变化,以及玻璃化冷冻对卵母细胞后续发育能力的影响。
关键词: 小鼠 精子 冻干 胞浆内精子注射
精子冷冻是保存动物种质资源和扩繁良种的一种有效方法,在家畜上有比较好的实际应用。但实验小鼠的精子冷冻有一定的难度。随着小鼠胞浆内单精子注射技术(ICSI)的出现,可以弥补小鼠精子冷冻技术的不足。Wakayama和Yanagimaghi(1998)用ICSI技术尝试了冻干精子生产小鼠的可行性,并且取得了成功。Liu et al.(2004)又证明冻干精子也能通过...
关键词: 荷斯坦牛 乳蛋白基因
奶牛乳中的体细胞数是一个遗传力很低的数量性状。奶牛的体细胞评分(somatic cell score,SCS),是由体细胞数(somatic cell count,SCC)得来(SCS=log2 SCC),与乳房炎有较高的遗传相关(0.60~0.80)(Banos et al.,1990),是目前对奶牛乳房炎进行监测的有效方法之一(储明星等,2001)。由于SCS遗传力的平均值仅有0.12,难以用常规...
关键词: cbf1基因 转基因烟草 花器官变异
CBF1(C—repeat—binding factor1)基因来源于拟南芥的一个受低温调节的转录因子基因,能激活一系列其它低温相关基因的表达,从而提高植物的抗冻能力(Jaglo-Ottosen et al..1998)。在研究中发现转CBF1基因烟草后代的部分群体中出现了明显的表型变异,主要表现为花器官的变异。为了探明这些变异是否是因为外源基因在受体基因组中插入的位...
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