MMP3与Sox9基因对人椎间盘退变髓核细胞调控作用

贾相振; 西永明; 刘勇; 位华卫; 于涛; 齐宗华 青岛大学附属医院脊柱外科; 山东青岛266003; 乳山市人民医院骨科

关键词:基质金属蛋白酶3 性别决定相关高迁移率簇蛋白盒基因9 椎间盘退行性变 

摘要:目的探讨基质金属蛋白酶3(MMP3)基因与性别决定相关高迁移率簇蛋白盒基因9(Sox9)调控在人椎间盘退变髓核细胞中的作用。方法构建MMP3与Sox9慢病毒表达载体,感染人退变髓核细胞,按照处理方式不同分为4组,分别为空白对照组(A组)、MMP3沉默转染组(B组)、Sox9过表达组(C组)以及MMP3沉默+Sox9过表达共转组(D组),各组髓核细胞置于恒温培养箱中培养,定期换液。72h后,通过荧光定量PCR方法检测转染人退变髓核细胞Ⅱ型胶原、蛋白多糖mRNA的表达,通过Western Blot方法检测转染人退变髓核细胞Ⅱ型胶原、蛋白多糖蛋白的表达。结果 B、C、D组蛋白多糖、Ⅱ型胶原蛋白及mRNA表达水平与A组比较明显增高,差异具有显著性(F=84.50~413.09,q=4.57~49.13,P〈0.01);D组蛋白多糖、Ⅱ型胶原蛋白及mRNA表达水平与B、C组比较,差异具有显著性(q=13.72~30.24,P〈0.01)。结论 MMP3基因沉默、Sox9基因过表达可以促进人退变髓核细胞蛋白多糖、Ⅱ型胶原的分泌,延缓椎间盘退变,且二者之间具有协同作用。

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