关键词：16srdna 管家基因 不常见菌株 序列分析 

摘要：目的建立细菌16SrDNA序列分析技术并探讨其在临床不常见细菌鉴定中的应用价值。方法收集经全自动微生物分析系统鉴定其可靠率在99％及以上的常见细菌10株和常规方法难以鉴定或少见菌17株。通过PCR扩增16SrDNAv3．v4区基因片段并进行序列测定，序列与16SpathDB2．0数据库上已知细菌的16SrDNA序列进行比对分析确定细菌种属。当v3．v4序列片段不能明确鉴定细菌时，结合16SrDNA长片段测序及管家基因dnaJ和rpoB的序列做进一步分析。结果经16SrDNAv3．v4区序列分析，10株（100％）临床常见菌都能鉴定到种水平，其可靠性大于98．0％。17株不常见菌株中，10株（58．8％）细菌只与1种菌相似性大于98．0％，成功鉴定到单个种水平；6株（35．3％）细菌与不止1种菌的相似比大于98．0％；1株菌与已知菌相似性在96．0％～98．0％之间只能鉴定到属（棒状杆菌）。进一步结合16SrDNA长片段及管家基因dnaJ和rpoB的序列分析，所有菌株均可鉴定到单个种水平。结论结合16SrDNA和管家基因序列分析，可用于临床常见及不常见细菌的分子鉴定。

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