皮质酮对原代培养的海马神经元及其Ca^2+/CaMKⅡ的影响

孙臣友; 刘能保; 李宏莲; 张敏海; 刘少纯; 刘向前; 程少容; 李晓恒; 洪小平; 李辉 华中科技大学同济医学院; 解剖学系组织胚胎学教研室; 武汉; 430030

关键词:皮质酮 海马神经元 大鼠海马 表达 原代培养 

摘要:在培养液中加入10-7、10-6和10-5浓度(mol/L)的皮质酮,采用MTT染色测定、Fura-2/AM的荧光标记以及Western印迹的方法,观察了不同浓度的皮质酮作用下海马神经元形态学和细胞存活率的变化以及胞浆内游离钙离子浓度[Ca2+]i和CaMKII表达的变化规律,探讨其对原代培养的大鼠海马神经元及其Ca2+/CaMKII的影响和可能的机制.结果发现:10-6、10-5浓度的皮质酮对海马神经元的形态学影响较大,与对照组比较,细胞存活率明显降低;[Ca2+]i分别为113.1022±16.9716、155.3794±20.7727;CaMKII的表达也明显减少;三者的变化均显著(P<0.01),而10-7浓度的皮质酮对上述指标影响不大(P>0.05).此外,相关性分析表明:[Ca2+]i和CaMKII的表达呈现负相关(P<0.05).以上结果提示,皮质酮对大鼠海马神经元的作用存在浓度依赖效应,浓度越高,对大鼠海马神经元的损伤越大,同时也验证了皮质酮是啮齿类动物的主要的应激激素.

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