微量热法研究10-23脱氧核酶切割反应的热动力学

周国燕 李炫辰 王爱民 蓝浩 邢华 上海理工大学低温生物与食品冷冻研究所 上海200093

关键词:切割反应 微量热法 热动力学 

摘要:选用乙型肝炎病毒(HBV)前区C/C区2031位点的序列作为底物RN段,并合成相应的10-23脱氧核酶,然后用微量热法研究10-23脱氧核酶的热动力学。在近生理条件下,通过微量热法测定10-23脱氧核酶切割反应的热动力学参数。根据热流曲线得出底物RNA不同浓度的反应初速率v0,再作出v-[S]曲线,通过Lineweaver-Burk作图得出10-23脱氧核酶切割反应的最大速率vmax为2.5×10-9mol/(L.s)、米氏常数Km为0.045nmol/L、催化常数Kcat为0.107min-1。

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