生物工程学报杂志

产紫杉醇真菌的研究概况与紫杉醇工业生产的一个新思路

关键词: 紫杉醇  内共生真菌  小孢拟盘多毛孢  树状多节孢  

分离自太平洋红豆杉的天然抗癌药物紫杉醇（Taxol）已在临床上广泛应用，市场需求日益增强，但工业产量受原料红豆杉树木短缺的制约，供需存在巨大差距。1993年，Stierle等分离到一株与太平洋红豆杉共生的真菌．安德烈紫杉菌，证实产生紫杉醇，为利用真菌发酵生产紫杉醇带来可能。通过分析目前工业生产技术存在的问题，总结了产紫杉醇真菌研究的...

修饰血红蛋白作为红细胞代用品的研究进展和挑战

关键词: 红细胞代用品  血红蛋白  修饰  交联  偶联  包埋  

血源紧缺和病毒污染问题推动了血液代用品的研究，以血红蛋白为代表的红细胞代用品成为研究的重点。为克服血红蛋白直接使用的毒副作用，各种修饰技术得到了迅速发展，其中包括双阿司匹林交联、戊二醛交联、棉子糖交联、聚乙二醇偶联、脂质体包埋、生物可降解高分子包埋等。其中一些技术已经形成规模化制备工艺，产品进入临床试验，有的已在个别...

大分子量重组蛋白在丝状噬菌体表面的展示表达及其与小分子相互作用的初步研究

关键词: 噬菌体  表面展示  蛋白质与小分子相互作用  蛋白质表达  活性检测  

利用pHEN1-KM13噬菌粒系统表达融舍蛋白，进而确定大分子量重组蛋白在丝状噬菌体表达的部位及其表达后的生物活性。通过蛋白酶切处理前后噬菌体侵染细菌能力的变化快速地检测大分子蛋白质能否在噬菌体表面展示表达；比较了谷胱甘肽S转移酶及其与三个不同长度连接臂融合的外源蛋白在噬菌体表面的表达和组装，确定了不大于40kD的重组蛋白分子能展...

征稿简则

通过N端替换提高木聚糖酶的热稳定性

关键词: 融合木聚糖酶  木聚糖酶氮端  热稳定性  

以来源于Thermomonospora fusca的耐高温木聚糖酶TfxA和来源于Streptomyces olivaceoviridis的高比活木聚糖酶XYNB为亲本，构建出耐热高比活融合木聚糖酶TB，将佃在大肠杆菌BL21和毕赤酵母GS115中进行表达并对表达产物的酶学性质进行分析比较。分析表明，融合蛋白TB最适pH值为6．0，最适温度为70℃，较XYNB有大幅度的提高；在热稳定性方面，佃明...

大豆ω-3脂肪酸脱氢酶基因GmFAD3C在酿酒酵母中的表达

关键词: gmfad3c  酿酒酵母  

α-亚麻酸（AIA）被称为必需脂肪酸，对人体有一系列的保健作用。ω-3脂肪酸脱氢酶（FAD）催化亚油酸（IA）生成AIA。大豆种子油中AIA含量较高，为了研究大豆”3FAD的功能，用RT-PCR方法从大豆未成熟种子中扩增出GmFAD3C的cDNA，克隆到酵母表达载体p416中，并用醋酸锂法转化酿酒酵母营养缺陷型K601，经筛选鉴定，得到阳性克隆。气相色谱分析脂肪酸...

猪胸膜肺炎放线杆菌血清1型RTX毒素I的N-端表达多肽具有良好的免疫原性

关键词: 猪胸膜肺炎放线杆菌  apxi毒素  原核表达  免疫原性  

ApxI外毒素是猪胸膜肺炎放线杆菌（APP）最重要的毒力因子，为了研究其N端多肽的免疫原性，分剐将apxIA基因的全长编码区（apxIA，3146bp）及其5’端1140bp的片段（apxIA5）克隆到原核表达载体pET-28a，经IPTG诱导后在大肠杆菌中实现了表达，表达产物ApxIA和ApxIAN均以包涵体的形式存在，Western-bIot检测证实两种表达产物均具有免疫反应性。将...

人sBCMA cDNA的克隆、高可溶性融合表达及活性分析

关键词: sbcma  融合表达  增殖抑制  

BCMA是除TACI外BAFF和APRIL共用的另一细胞表面受体。为了研究sBCMA作为拮抗受体的可能及获得活性sBCMA蛋白用做结构功能研究，我们以RT-PCR法从人B系非洲淋巴瘤细胞株Raji总RNA中扩增出人BCMA的全长cDNA，经克隆测序证实所克隆的基因为人BCMA。继而通过嵌套PCR扩增出胞外可溶区（sBCMA，46个氨基酸组成，舍有一个6个半胱氨酸的保守CRD，构成3个...

答读者问

番茄LeHsp110／ClpB基因的分子克隆及其对植物耐热性的影响

关键词: 热激蛋白  clpb  耐热性  叶绿体  

HSP100／ClpB是Clp蛋白家族的一员，具有分子伴侣功能，与细胞“获得耐热性（acquired thermotolerance）”相关。从番茄cDNA文库中筛选到长度达3144bp的cDNA，依据最长的开放读码框推导出的多肽含980个氨基酸残基，分子进化分析结果表明该蛋白属于HSP100／ClpB家族，因其计算分子量为110kD，所以命名为LeHSP110／ClpS。实验证明，LeHsp110／Clp...

抑癌蛋白PTEN的原核表达、抑癌活性研究和抗体制备

关键词: pten  原核表达  抑癌活性  多克隆抗体  

PTEN是具有蛋白质和酯类双重特异性磷酸酶活性的抑癌蛋白，在肿瘤治疗中具有广阔的应用前景。鉴于原核表达PTEN蛋白并用于抑癌实验的研究尚未见报道，因此尝试利用大肠杆菌表达有活性的PTEN蛋白，检测其抑癌效果。利用本室克隆的PTEN基因cDNA和原核表达载体pET-44a（＋）分剐构建带6xHis和Nus标签的两种诱导型原核融合表达载体pET-PTEN和pET-Nus...

重组猪胸膜肺炎放线杆菌毒素ApxI对小鼠的急性毒性和免疫保护性研究

关键词: 胸膜肺炎放线杆菌  重组apxia  小鼠  急性毒性  免疫保护性  

研究了猪胸膜肺炎放线杆菌毒素Ⅰ重组表达蛋白（包括粗提包涵体和经复性处理的重组蛋白）对小鼠的急性毒性以及免疫保护性，并和天然毒素Ⅰ（由APP血清10型菌的培养物上清提取）做了对比。在急性毒性试验中，3种蛋白均以200μg/只的剂量腹腔注射小鼠，并分别于24h、7d和14d后眼眶放血致死，检测血常规和血液生化相关指标。结果表明，3种蛋白均不...

中性内切型纤维素酶在毕赤酵母中高水平表达的研究

关键词: 中性内切型纤维素酶  毕赤酵母  高水平表达  

中性内切型纤维素酶在纺织及造纸工业具有重要的应用，为了进一步提高从我国草菇中克隆的一种新的中性内切型纤维素酶（EG1）在Pichia pastoris中的表达水平，我们进行了提高基因拷贝数及高密度发酵等多种手段实现其高水平表达的研究。在前期研究的基础上，利用对已整合eg1的重组子再转化的方法，从含有2000μg／L Zeocin的YPDSZ平板上筛选到高抗...

辽宁碱蓬甜菜碱醛脱氢酶基因（BADH）启动子分离及序列分析

关键词: 辽宁碱蓬  甜菜碱醛脱氢酶  启动子  序列分析  

根据已知的辽宁碱蓬BADH cDNA5’端序列设计两个基因特异的反向引物（BR1，BR2），通过衔接头PCR获得了BADH基因起始密码子上游265bp的序列。根据所获得的序列设计两个基因特异的反向引物（BR3，BR4），用BR2、BR3、BR4分别与4个简并引物配对，通过TAIL-PCR扩增，获得了约2kb的序列。经Sequencer软件拼接上述两段序列。获得了BADH基因起始密码子...

瑞氏木霉表达黑曲霉葡萄糖氧化酶

关键词: 瑞氏木霉  黑曲霉  葡萄糖氧化酶  同源重组  

利用高表达分泌纤维素酶的真菌瑞氏木霉表达重组的黑曲霉葡萄糖氧化酶。在大肠杆菌DH5a中构建瑞氏木霉纤维素酶CBHI启动子和CBHI信号肽基因-黑曲霉葡萄糖氧化酶基因，瑞氏木霉纤维素酶CBHI终止子，构巢曲霉的甘油醛3磷酸脱氢酶启动子-大肠杆菌抗潮霉素B磷酸转移酶基因-构巢曲霉色氨酸C终止子-pUC19（命名为pCBHGOD）质粒，线性化后用瑞氏木霉纤...

本刊加入《中国学术期刊（光盘版）》声明

IL-10 18-57-PE40高效表达、纯化及细胞活性之研究

关键词: 纯化  细胞毒性  

以IL-10的功能短肽（40肽，即IL-10第18号至57号氨基酸）为导向部分与PE40（绿脓杆菌外毒素除去受体结合区后的剩余部分）融合分别构建了IL-10 18-57-PE40的胞质和胞周质表达质粒，其中，IL-10 18-57-PE4O在Rosettablue（DE3）中以高效胞质可溶形式表达，在BL21（DE3）pLysS中以胞周质分泌形式表达；表达宿主菌Rosettablue（DE3）超声波破碎后，...

“活体生物反应器”研究新进展

关键词: 生物反应器  活体  研究进展  人体基因  

本刊曾介绍了生物反应器研究的新进展（2005，21（5）：808），这里再作几点补充。

重组CHO-GS细胞降低氨毒副作用的代谢研究

关键词: 重组cho细胞  谷氨酰胺合成酶  无血清培养  代谢  氨  

在重组CHO-GS细胞无血清批培养过程中，由于GS系统的引入，使氨对细胞的毒副作用显著降低，从而引起细胞生长和代谢途径发生变化。当起始氨浓度为1．42mmol／L时，细胞最高密度可达到15．6×10^5cells／mL，随着氨浓度的增加，尽管细胞生长受到一定的抑制，但在氨浓度为12．65mmol／L时，细胞密度仍可达到8．9×10^5 cells／mL。当起始氨浓度从0．...

流体动力对HEK293细胞的细胞团形成及细胞生长和代谢的影响

关键词: 流体动力  hek293细胞  细胞团  生长  代谢  

利用HEK293细胞在悬浮培养中具有聚集成团的体外培养特性，在250mL的Bellco的搅拌培养体系中，以HEK293细胞团的粒径、细胞数、细胞活力、葡萄糖比消耗率（qgle）、乳酸比产率（qlac）和乳酸转化率（Ylac/gle）为观察指标，考察HEK293细胞在搅拌速度分别设置为25、50、75和100r／min的培养条件下的细胞团形成、粒径分布以及细胞生长和代谢。HEK2...

2006年生物医学类核心期刊联合征订启事

农杆菌转化的小冠花发状根的诱导及其植株再生

关键词: 小冠花  发根农杆菌  发状根  体细胞胚胎发生  植株再生  

用野生型发根农杆菌15834菌株感染小冠花15日龄无菌苗子叶和下胚轴切段，建立了高效的发状根培养及其体细胞胚胎发生再生体系。发状根可直接从受伤的外植体表面产生，也能在外植体诱导的愈伤组织上发生，在无外源激素的MS固体和液体培养基上，转化根能自主生长，表现出典型的发根特征。用适宜浓度的乙酰丁香酮处理对数生长期的农杆菌菌液2h，感...

科学出版社生命科学编辑部新书推介

大孔树脂固定化脂肪酶及在微水相中催化合成生物柴油的研究

关键词: 大孔吸附树脂  固定化  脂肪酶  生物柴油  

以不同大孔树脂吸附法固定化假丝酵母99-125脂肪酶，在微水有机相中的应用表明非极性树脂NKA是最佳的固定化栽体。分别以正庚烷及磷酸盐缓冲液作为固定化介质，发现在正庚烷介质中树脂NKA的固定化效率能够迭到98．98％，与采用磷酸盐缓冲液作为介质相比，固定化酶的水解活力和表观酶活回收率分别提高了4．07和3．43倍。考察了在微水相中固定化酶...

《生物工程学报》加入“万方数据——数字化期刊群”的声明

噬菌体展示日本血吸虫SSj14单抗的模拟抗原表位及其免疫保护性研究

关键词: 日本血吸虫  噬菌体展示  ssj14单抗  模拟抗原  白细胞介素12  

为获得日本血吸虫保护性单抗SSj14的模拟抗原表位，研究其对日本血吸虫的免疫保护作用。用纯化的SSj14单抗筛选噬菌体随机12肽库，对33个克隆进行ELISA验证，获得30个阳性克隆，DNA序列分析表明这30个克隆分属11个多肽序列，分析比较发现这些多肽具有“H-N／Q-X-S-P／F-X-X-L-A-T”的相似基序。进而选取3个阳性单克隆及混合阳性噬菌体克隆进行We...

2006年中国微生物学会及各专业委员会学术活动计划表

mPem蛋白相作用分子的筛选与鉴定

关键词: mpem  gal4酵母双杂交系统  mdfic  

mPem是同源异型框基因，其C末端编码同源异型域。为进一步研究mPem蛋白在胚胎发育和生殖组织发育过程中的作用，利用GAL4酵母双杂交系统筛选小鼠7d胚胎cDNA文库，共获得3个与mPem蛋白相作用的分子。其中之一为Mdtic，一种新的转录调控因子。进一步的酵母双杂交和体外GST-Pull down试验再次确认两者之间的相互作用。Mdtic与mPem蛋白之间的相互作...

爱思唯尔出版集团简介

关键词: 出版  集团  简介  信息产品  电子产品  数据库  医学  经营  公司  

爱思唯尔（www.elsevier.com）是一家经营科学、技术和医学信息产品及出版服务的大型出版集团。通过与全球的科技与医学机构的合作，公司每年出版1800多种期刊和2200本新书，以及一系列创新性的电子产品，如SeienceDirect、MD Consult、文摘型数据库、在线参考书目和特定学科入口网站等。

利用异化金属还原菌构建含糖微生物燃料电池

关键词: 异化金属还原菌  微生物燃料电池  生物质  葡萄糖  

环境中的一些微生物通过还原金属氧化物进行无氧呼吸，而石墨电极与金属氧化物相似，也可以作为这类微生物呼吸作用的最终电子受体，利用这类微生物构建微生物燃料电池，以糖类物质为燃料，对电池产电情况、产电原理进行研究。实验结果表明，以Rhodoferax ferrireducens为产电微生物，在外接电阻510Ω条件下，以葡萄糖为燃料，常温下产生的电流密...

重要通知

一些氨基酸对产甘油假丝酵母甘油生产的促进作用

关键词: 氨基酸  产甘油假丝酵母  甘油生产  emp途径  tca循环  中间代谢物  

以EMP途径与TCA循环中间代谢物的添加为对照，研究在尿素为氮源的产甘油假丝酵母发酵过程中添加氨基酸对甘油产量的影响。结果表明：对甘油产量有强促进作用的氨基酸有谷氨酸、谷氨酰胺、天冬氨酸、天冬酰胺、甘氨酸、赖氨酸、酪氨酸、脯氨酸、组氨酸和丝氨酸，其最适添加浓度在0．26～0．45g／L之间，丙酮酸、α-酮戊二酸、草酰乙酸、柠檬酸和琥...

科学出版社生命科学编辑部新书推介

采用最小二乘支持向量机的青霉素发酵过程建模研究

关键词: 生化建模  支持向量机  青霉素发酵过程  在线预报模型  

生化过程通常是严重非线性和时变的复杂动态系统，而且重要过程参数缺少在线测量仪表，对其建立机理模型往往非常耗时和困难。采用最小二乘支持向量机（LS-SVM）并以Pensim仿真平台为例对青霉素发酵这一典型生化过程进行建模研究。给出了LS-SVM参数的调整策略和分析结果，建立了青霉素产物浓度、菌体浓度和底物浓度等重要过程变量的在线预报模型...

尺寸均一的壳聚糖微球的制备及其作为胰岛素控释载体的研究

关键词: 壳聚糖微球  尺寸均一  控制释放  膜乳化  胰岛素  

采用新型微孔膜乳化技术制备了栽胰岛素的壳聚糖微球。研究表明，要制备粒径均一的壳聚糖微球，必须将亲水性膜修饰成疏水性；制得的微球粒径和所采用的膜孔径之间存在很好的线性关系，使得微球粒径可控；以胰岛素为模型药物，主要考察了交联荆用量和交联时间对微球表面形态、药物包埋率和微球体外释药特性的影响。结果表明当氨基与醛基的摩尔比...

渗透压对硝化作用的影响

关键词: 渗透压影响  硝化作用  气升式内循环硝化反应器  

在气升式内循环硝化反应器中研究了渗透压对硝化作用的影响。保持进水氨氮浓度420mg·L^-1进水渗透压逐渐从4．3×10^5高到18．8×10^5Pa，硝化反应器的氨氮转化率稳定在93％～100％。将进水渗透压进一步提高到19．2×10^5Pa，氨氮转化率降至69．2％。渗透压对硝化作用的影响具有突发性，临界值在18．8×10^5～19．2×10^5Pa之间。受高渗透压胁迫时，...

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谷氨酰胺对微囊化重组CHO细胞生长代谢及内皮抑素表达的影响

关键词: 谷氨酰胺  微囊化  cho细胞  代谢  内皮抑素  

微囊化技术是一种有发展潜力的生物技术，在细胞移植和药物控释等方面具有广泛的应用。然而由于目前微囊化细胞规模化培养技术还不成熟，阻碍了其在临床治疗中的推广与应用。为了了解微囊化重组CHO细胞的生长代谢特性为今后规模化培养优化提供技术参考，考察了主要氮源物质谷氨酰胺对微囊化重组CHO细胞生长代谢及内皮抑素表达的影响。结果显示：...

微流控分析芯片在医学领域的应用

关键词: 微流控分析芯片  基因检测  蛋白质分析  细胞分析  

微全分析系统（p-TAS）又称为芯片实验室，自从Manz等于20世纪90年代首次提出这一概念以来，经过十余年的发展μ-TAS已成为生物分析的一个独立领域并被学术界所认可。微流控分析芯片作为μ-TAS发展的主要方向以其快速、高效分析，低消耗和微型化等特点发展非常迅速。在此结合微流控分析芯片在医学领域的应用状况，着重从基因检测、蛋白质分析和细...