生物化学与生物物理进展杂志

胰岛素折叠、结合与稳定性的核磁共振研究

关键词: 胰岛素  折叠  结合  稳定性  核磁共振  

Insulin is one of the most important hormonal regulators of metabolism. Since the diabetes patients increase dramatically, the chemical properties, biological and physiological effects of insulin had been extensively studied. In last decade the development of NMR technique allowed us to determine the solution structu...

以转录因子AP-1为靶的decoy核酸体内外抗肿瘤研究

关键词: decoy核酸  肿瘤  转录调控  

合成了双链寡聚核苷酸——decoy核酸，其与靶转录因子AP-1有高亲和性，可进入细胞作为decoy顺式元件，通过抑制特异的转录因子和调控区域的结合，调控基因转录而改变基因的表达．在体内外抗肿瘤试验中。decoy核酸有显著抑制肿瘤细胞增殖的作用，可以成为潜在性的肿瘤基因治疗药物。

STAT3入核的核定位序列研究

关键词: stat3  入核  核定位序列  转录因子  

STAT3(signal transducers and activators of transeription)是胞浆中的潜在转录因子，在细胞因子、生长因子等外界信号分子的刺激下发生磷酸化和二聚化进入细胞核，结合在基因特定的启动子上调控转录．目前对STAT3的磷酸化和二聚化都相当清楚，但对其怎样进入细胞核还知之甚少,入核分子一般都有一段碱性氨基酸的核定位序列(NLS)，但通过比较ST...

黑色素皮质素受体激动剂的高通量筛选模型研究

关键词: 黑色素皮质素受体  报告基因  激动剂  高通量筛选  

为了建立黑色素皮质素受体(MC4R)激动剂的高通量筛选方法，将人的MC4R基因质粒(hMC4R／pCDNA3．1)与报告基因质粒(3×CRE／3×MRE／SRE-LUC)按1：5的比例共转染到HEK293细胞，通过G418筛选，建立了稳定的MC4R激动剂筛选细胞株．利用MC4R内源激动剂α-MSH探索和优化了每孔接种细胞数目、激动剂孵育时间、溶剂DMSO终浓度、荧光素酶底物浓度等筛选条件...

硅-玻璃聚合酶链式反应微芯片对β-葡糖苷酸酶基因的扩增

关键词: pcr微芯片  mems技术  表面处理  生物芯片技术  

聚合酶链式反应(PCR)微芯片是基于微机电系统(MEMS)制作，在微芯片上进行PCR反应，实现生物样品扩增的一项新技术，介绍了硅-玻璃PCR微芯片的设计和制作、微反应腔的清洗和表面处理、借助外置温度控制系统进行PCR扩增反应以及扩增产物在琼脂糖凝胶电泳下的检测分析，实现了对β-葡糖苷酸酶(GUS)基因的有效扩增，扩增时间由原来的90min缩短到现在...

一个糖尿病肾病相关新基因的筛选、克隆和序列分析

关键词: 基因芯片  糖尿病肾病  mdnr411基因  

利用Affymetrix寡核苷酸基因表达谱芯片对2型糖尿病肾病模型动物——db／db小鼠的肾脏基因表达谱进行了研究。在此基础上，利用末端快速扩增法和RT-PCR方法，对筛选出来的一个糖尿病肾病相关表达序列标签(EST)进行了cDNA克隆和表达分析．得到了一长为1．4kb的cDNA，并暂时命名为mdnr411(mouse diatbetic nephropathy related mRNA No．411)。序...

用激光共聚焦显微术检测哺乳动物卵母细胞中纺锤体相关蛋白的方法

关键词: 卵母细胞  哺乳动物  激光共聚焦显微术  纺锤体  

哺乳动物卵母细胞是发育生物学和细胞生物学的重要研究对象．激光共聚焦显微术是检测卵母细胞中纺锤体相关蛋白的有用技术，但是针对哺乳动物卵母细胞的特点需要做许多调整以得到理想结果．其中，卵母细胞的准备、固定、透膜、脂类抽提、抗体孵育步骤十分关键．另外，不同物种的卵母细胞也有差异，在进行激光共聚焦研究时需要做出相应的调整。

一种人胰岛素类似物的制备、鉴定与活性研究

关键词: 胰岛素类似物  单体胰岛素  原核表达  生物学活性  糖尿病  

采用PCR方法，将人胰岛素分子B链B10位His突变为Glu，在B25和B26位之间插入Glu，构建了[B10Glu，B25-Glu-B26]胰岛素原融合蛋白基因．利用通用型质粒pBV220构建表达载体，在大肠杆菌DH5α中表达，表达蛋白为包含体形式，约占菌体总蛋白的20％，～30%，经过复性、凝胶过滤等步骤得到胰岛素原融合蛋白，用胰蛋白酶和羧肽酶B酶切，经过DEAE离子交换...

表达幽门螺杆菌粘附素保守区的减毒鼠伤寒沙门菌免疫治疗作用的研究

关键词: 幽门螺杆菌  粘附素保守区  减毒鼠伤寒沙门菌  治疗性疫苗  

富含脯氨酸小蛋白-2在小鼠子宫中的表达及调节

关键词: 富含脯氨酸小蛋白  子宫  应激  情周期  妊娠  分娩  

富含脯氨酸小蛋白(Sprrs)参与构建复层扁平上皮的角化细胞壳(CE)，它们在子宫单层上皮中的作用还不清楚．采用RNA印迹和半定量RT-PCR方法，研究了Sprr2在小鼠动情周期和妊娠子宫中的表达及其激素调控．实验结果发现：Sprr2在动情前期和动情期表达上调，而动情后期和间情期表达下调。在妊娠初期表达迅速下调，直至临产期表达重新受到诱导并在产后...

多样性指标用于基因中剪切位点的识别

关键词: 剪切位点  多样性增量  二次判别法  外显子  内含子  基因  

根据基因剪切位点处的碱基保守性特征，和附近位点的碱基组成和关联特征，应用多样性指标和二次判别分析，对几类模式生物的基因结构进行统一的分析和预测，能够较好地识别外显子和内含子及其边界．计算结果表明，对于4类物种，线虫(C.elegans)，拟南芥(A.thaliana)，果蝇(D.melanogaster)和人类(Human)，核苷酸水平的识别精度为92．5％～97．1...

生物活组织的背向二次谐波成像

关键词: 二次谐波  显微成像  生物组织  糖尿病  

光学二次谐波成像技术由于具有三维高分辨率、不需要荧光标记、对生物样品的杀伤效应小等特点，在生物医学研究上具有广阔的应用前景．在双光子荧光成像基础上，实现了适合对厚组织样品观测的背向光学二次谐波成像，探讨了背向二次谐波成像的特点和影响因素．通过对多种生物组织样品进行大量实验，发现胶原纤维和肌肉纤维均可以产生很强的背向二...

神经芯片技术的研究进展

关键词: 神经芯片  微机电器件  多电极阵列  神经元突触  

神经芯片是一种用硅微加工技术制造的微机电器件。活体的哺乳动物神经元细胞在神经芯片上培养存活，通过外加电路的控制，人们可以方便地对活体神经元进行检测，研究其在外加激励模式下的响应，整个研究过程是选择性的、实时的、连续的．简要评述了神经芯片技术的研究进展，并对其前景作了展望。

Quorum Sensing及其研究进展

关键词: 细菌群体  行为调控机制  quommsensing  发病机制  细菌代谢产物  

Quomm sensing(QS)是近来受到广泛关注的一种细菌群体行为调控机制．由于不少人体或植物病原菌的发病机制受QS机制的调控，很多细菌代谢产物也受到该机制的控制，QS系统已成为医学、生物工程学等多领域的研究热点，在QS的调控过程中，细菌分泌一种或多种自诱导剂(autoinducer，也称信息素pheromone)，然后通过感应