生物化学与生物物理进展杂志

细胞筛选平台在人类功能基因组研究中的应用

关键词: 功能基因组  高通量  高内涵  细胞筛选技术  

人类基因组全序列的精细图已完成,当前生命科学面临的重要任务就是如何将基因组序列信息转化为基因的功能信息,了解生命活动的分子机理,改善人类健康,为生物技术发展提供动力.在一系列功能基因组研究新技术中,高通量(high-throughput)和高内涵(high-content)的细胞筛选技术平台已经显示出巨大潜力,发挥着越来越重要的作用.通过在体外培养的哺乳...

自体吞噬——Ⅱ型程序性死亡

关键词: 自噬  自噬体  溶酶体  atg  

自噬(autophagy)是广泛存在于真核细胞内的一种溶酶体依赖性的降解途径,在饥饿的条件下,它可以调节细胞内长寿命蛋白和细胞器的降解,降解产物再被细胞重新利用.因此自噬在细胞发育、细胞免疫、组织重塑及对环境适应等方面有着十分重要的作用.近来发现,自噬还参与降解病原微生物、抵御感染的过程,称之为异噬.对自噬的分子机制和调节以及其在生理...

幽门螺杆菌与2005年诺贝尔医学奖

关键词: 诺贝尔医学或生理学奖  幽门螺杆菌  胃炎  消化性溃疡  

今年的诺贝尔医学或生理学奖授予Robin Warren和Barry Marshall两位坚韧不拔且敢于挑战传统观念的科学家.奖励他们所做出的非凡的和出人意料的发现:慢性胃炎、胃溃疡以及十二指肠溃疡主要是由幽门螺杆菌感染所导致的.

科学出版社生命科学编辑部新书推介

PF40的亚细胞定位研究

关键词: 定位  分枝  内质网  

pf40基因是从谷子未成熟种子cDNA文库中获得的,与水稻、拟南芥的离子通道蛋白同源性很高,具有8个跨膜区.该基因转入烟草,可使烟草分枝增多,将其转入谷子,可使谷子分蘖增多.构建pf40与绿色荧光蛋白gfp的融合基因,转入烟草进行稳定表达,通过荧光显微镜和激光共聚焦显微镜观察研究其亚细胞定位,发现荧光主要集中在内质网.将pf40不同缺失区段的4个片...

高通量蛋白质组学研究中一种基于GO的蛋白质功能分析策略

关键词: 生物信息学  蛋白质组学  表达谱  go  蛋白质功能  

挖掘高通量实验数据蕴含的生物学意义是蛋白质组学研究面临的一大挑战.基于等级化结构化的词汇表GO(Gene Onto1ogy)和相关数据库中的蛋白质功能注释,发展了一种对蛋白质组学研究中得到的表达谱(Expression profile)进行功能分析的策略.在对蛋白质表达谱进行功能注释的基础上给出蛋白质表达谱中蛋白质功能的分布,同时给出感兴趣功能类别的统计信...

SARS冠状病毒S蛋白受体结合结构域的表达及其表位作图

关键词: 表位  

严重急性呼吸综合征(SARS)是一种新出现的人类传染病,该病的病原是SARS冠状病毒(SARS-CoV).S蛋白是SARS冠状病毒的一种主要结构蛋白,它在病毒与宿主细胞受体结合以及诱导机体产生中和抗体中起重要作用.研究表明S蛋白与受体结合的核心区域为第318～510氨基酸残基的片段.首先克隆并用pGEX-6p-1载体融合表达了该受体结合结构域,并且通过蛋白质印迹...

日本血吸虫期别差异表达基因文库的构建及分析

关键词: 日本血吸虫  期别  差异表达  基因文库  

为从期别差异表达基因分析入手研究血吸虫的生长发育机制,应用抑制性消减杂交(suppressed subtractive hybridization,SSH)技术首次构建了日本血吸虫尾蚴、虫卵和成虫的期别差异表达基因文库.经消减效率分析和三种文库克隆的EST的期别差异性鉴定,表明所建文库质量较高,为在整个基因组水平分离血吸虫的差异表达基因提供了重要材料.由三个文库选择...

蛋白质酪氨酸磷酸化在抗失巢凋亡的癌细胞中的失调变化

关键词: 失巢凋亡  src同源结构域2  酪氨酸磷酸化  癌细胞  

失巢凋亡是细胞与细胞外基质脱离发生的一种特定的凋亡方式.癌细胞抗失巢凋亡或失巢生存能力可以使之在转移过程中生存.业已发现癌细胞失巢生存与PI3K-PKB/Akt、MAPK这两条重要信号途径有关,但是PI3K-PKB/Akt、MAPK通路的上游酪氨酸激酶途径还不甚清楚.为此设计了一种基于SH2-pTyr特异性结合特性的功能性筛选方法,以期发现癌细胞失巢生存相关的...

荷包牡丹碱和马钱子碱对小鼠皮层及下丘听神经元声反应潜伏期的影响

关键词: 听觉神经元  反应潜伏期  特征频率  声强  荷包牡丹碱  马钱子碱  

频率和强度是声音的两个重要参数,通常以听觉神经元动作电位发放频次编码这两个参数.研究表明,声反应潜伏期也可编码声音频率和强度,但尚不清楚潜伏期编码这两个参数究竟发生于哪一级听觉核团.如果声音参数由同级中枢编码,则这样的编码方式可能发生改变.反之,如果编码方式未发生变化,则意味着声音信息是由低位神经元编码的.GABA和甘氨酸(Gly)是...

hVEGF165和嵌合水蛭肽融合基因的构建、表达和活性检测

关键词: 血管内皮生长凼子  水蛭肽  融合基因  载体构建  基因表达  

根据抗PTCA或支架后再狭窄的基因治疗需要多基因治疗的特点,用基因重组技术构建了hVEGFi65和嵌合水蛭肽(fused hirudin,FH)融合基因,并克隆到真核表达载体pcDNA3.0中,通过脂质体介导将pcDNA3.0/hVEGF165-FH转染到人内皮细胞株(ECV304)中,RT-PCR及蛋白质印迹证明融合基因hVEGF165-FH在ECV304细胞中得到表达(分子质量为24ku左右).通过体外活性检测...

G-蛋白Rab3a对神经生长抑制因子（GIF）抑制神经元细胞生长作用的影响

关键词: rab3a  gif  相互作用  大鼠海马神经元细胞培养  mtt还原测定法  

为了深入研究Rab3a和神经生长抑制因子(GIF)的相互作用,在大鼠海马神经元细胞原代培养体系中,用MTT还原法定量研究了Rab3a对GIF神经生长活性的影响,发现Rab3a可以替代脑提取物而使GIF发挥神经生长抑制活性.接着又利用多克隆抗体方法研究了GIF与Rab3a的相互作用,结果说明Rab3a是GIF发挥神经生长抑制活性所必需的蛋白质,并且它们的相互作用受空间...

更正

ATP调控大鼠胰腺β细胞胰岛素分泌的双重作用

关键词: 胞外atp  胞内钙离了浓度  膜电容  胞吐  胰岛素  

实验以大鼠胰腺β细胞为研究对象,采用荧光测钙和全细胞膜片钳膜电容测量技术,研究ATP对胞内钙离子信号和细胞分泌的影响,并初步探讨了其作用机制.实验表明:胞外ATP刺激通过动员细胞内thapsigargin敏感的钙库Ca2+释放,使大鼠胰腺β细胞内的游离钙离子浓度显著升高,细胞外的ATP信号对β细胞胰岛素分泌有双向调节作用,其一,主要通过降低去极化引起的...

运用mRNA体外展示技术筛选胸苷酸合成酶RNA亲和肽

关键词: mrna体外展示  筛选  胸苷酸合成酶  亲和肽  

以体外选择方法筛选不同功能的核酸、肽和蛋白质是近年的研究热点,mRNA体外展示是一种新兴的高效多肽选择技术,其基本原理是通过含嘌呤霉素寡核苷酸的Linker使mRNA与它编码的肽或蛋白质共价结合,形成mRNA-蛋白质融合体,这一方法已用于多种功能肽的鉴定.以mRNA体外展示技术进行了由大容量多肽库中(＞1013)筛选胸苷酸合成酶(thymidylate synthase,...

幼年大鼠视皮层神经元对闪光刺激的反应特性

关键词: 适应性  信噪比  兴奋性突触  抑制性突触  视皮层  关键期  

哺乳动物视觉系统的发育延续到出生后,大鼠出生后3～5周是视觉系统发育的关键期.在关键期中,视皮层的兴奋性和抑制性突触连接逐渐成熟,形成有效的皮层内回路.为了观察发育关键期大鼠视皮层神经元的反应特性与成年大鼠的异同,使用胞外单细胞记录的方法对比研究了幼年和成年大鼠对闪光刺激的视觉反应特性.结果显示:与成年大鼠相比较,幼年大鼠视皮...

肿瘤发生受免疫监视么？

关键词: 肿瘤  免疫监视  甲基胆蒽  

机体的免疫系统,尤其是胸腺来源的T淋巴细胞是否能够识别并特异地清除体内随机出现的恶变细胞,对肿瘤的发生行使"免疫监视",长期以来一直是免疫学界一个悬而未决的关键问题.近年来,由于生物技术的迅猛发展,基因敲除小鼠的问世,人们发现T淋巴细胞及其产物γ-干扰素等的缺陷可以导致机体对化学致癌物甲基胆蒽(methylcholanthrene,MCA)的敏感性增强....