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生物技术通报杂志

杂志介绍

生物技术通报杂志是由中华人民共和国农业农村部主管,中国农业科学院农业信息研究所主办的一本北大期刊。

生物技术通报杂志创刊于1985,发行周期为月刊,杂志类别为生物类。

  • 叶绿体转化体系研究进展

    关键词: 叶绿体转化  物种  叶绿体  生物反应器  

    叶绿体转化具有表达效率高,安全性高,遗传稳定,以及多基因可以同时转化等特点。真核或原核的外源基因都能在叶绿体中进行成功表达,至少有20种植物成功的进行了叶绿体转化。叶绿体作为生物反应器具有广阔的应用前景。

  • 植物耐寒机理与耐寒植物新品种培育

    关键词: 耐寒植物  育种  转基因  低温伤害  抗冻蛋白  

    低温灾害是普遍存在的对植物造成严重伤害的自然灾害,研究植物耐寒的分子机理并积极培育耐寒植物新品种对农业等生产活动具有重要意义。主要介绍植物抵御低温时的生理生化变化和关键基因,以及抗冻蛋白在耐寒植物新品种培育中的应用,并探讨植物耐寒育种的发展趋势。

  • 果实表达PGIPs的基因克隆及功能研究进展

    关键词: 果实  pgips  pgs  基因  克隆  抑制  

    多聚半乳糖醛酸酶(PGs)是病原真菌早期侵染植物的一个重要致病因子。多聚半乳糖醛酸酶抑制蛋白(PGIPs)作为植物防御蛋白,能特异性抑制真菌分泌的多聚半乳糖醛酸酶,并通过延长寡聚半乳糖醛酸(OGs)的稳定期激活植物防御反应。综述PGIPs在植物细胞中的定位,PGIPs与PGs之间的作用方式,PGIPs基因的分离与克隆,以及PGIPs对果实感病的影响,并对PG...

  • 低温木聚糖酶的研究进展

    关键词: 低温木聚糖酶  结构  机制  基因工程  

    低温木聚糖酶在低温下仍具有较高酶活力及催化效率,在应用中能减少工艺流程,节省加热或冷却费用,降低耗能,有着中高温木聚糖酶无法比拟的优势。针对低温木聚糖酶的研究现状,包括来源、分子结构与适冷机制、基因工程及应用等方面进行综述。

  • 细菌内依赖TonB的外膜铁转运体的研究进展

    关键词: 铁转运  外膜蛋白  依赖tonb的转运体  嗜铁素  

    铁是细菌所必需的微量营养元素,但由于易被氧化溶解性低,生物体的利用率大大降低。细菌在进化过程中形成多种策略来吸收环境中低浓度的铁,不同类型铁的吸收通过外膜上依赖TonB的转运体(TonB-dependent transporters,TBDTs)完成,TBDTs结合不同形式的铁复合物,通过内膜上的TonB-ExbB-ExbD复合物提供能量完成转运,对其机制的研究一直是微生物基础...

  • 脐血干细胞向不同体细胞分化的研究进展

    关键词: 脐血  间充质干细胞  诱导  分化  组织  

    脐血干细胞是一种具有多分化潜能的原始细胞,具备自我更新和增殖的能力,并能在特定因素的影响或诱导下,向多种细胞或组织分化。脐血来源的间充质干细胞不但可以分化为骨、脂肪和软骨,还可以转变成带有神经、肝脏及骨骼肌特异标记的细胞,并且具有应用到组织损伤修复、基因治疗载体和造血干细胞共移植等方面的潜力。旨在对于脐血干细胞在一定条件...

  • RSAP分子标记技术在园艺植物研究中的应用

    关键词: 园艺植物  分子标记  

    限制性位点扩增多态性(RSAP)是一种基于PCR的新型植物分子标记技术,具有操作简便、结果稳定、效率较高的特点。该技术以植物基因组上广泛分布的限制性位点位为靶标,通过独特的引物设计和PCR扩增程序,无需限制性酶切环节,只要一个简单的PCR,即可产生基于植物限制性位点的多态性标记。阐述了RSAP的原理与流程,对该技术的优势和应用情况做了总结,...

  • 水中病原微生物分子检测技术研究进展

    关键词: 分子检测  水中病原微生物  dna芯片  pcr  

    基于PCR方法的多种分子检测技术已广泛的应用于水体病原微生物的检测中。而以DNA芯片为代表的微型化、快速化手段将是未来检测技术的发展方向,可实现对病原微生物实时和快速的检测。新检测技术的发展有利于建立水体污染早期预警机制,同时,可靠的病原微生物检测方法可降低有害微生物对人类健康的影响。对水体病原微生物分子检测方法及其在水污染...

  • 差异蛋白质组学技术在水产动物研究中的应用

    关键词: 差异蛋白质组学  水产动物  应用  

    介绍差异蛋白质组学技术及其在水产动物研究中的应用,其中包括其在环境毒理、养殖及养殖环境、水产动物免疫、发育、神经方面的研究和今后的发展前景等。

  • 细胞凋亡检测方法的研究进展

    关键词: 细胞凋亡  检测  形态学  电泳  酶学  

    细胞凋亡在生命活动中具有重要的地位,多年以来一直都是生命科学领域的研究热点。为了准确、快速的检测细胞凋亡,人们发明了多种方法,并且随着科技的发展和技术的进步,新的检测方法不断涌现。就近年来关于细胞凋亡的一些检测方法进行综述。

  • 蛋白激发子基因peaT1转基因棉花的获得及初步鉴定

    关键词: 蛋白激发子  peat1  花粉管通道  棉花  

    将来源于极细链格孢菌的蛋白激发子基因peaT1克隆到植物表达载体pCAMBIA2300上,成功构建了含有增强子和多联终止子的植物表达载体pCAMBIA2300-G4AS-peaT1。通过花粉管通道法转化棉花,经卡那霉素抗性筛选、PCR和RT-PCR检测获得一株转基因棉花植株,其植株茎粗和成铃数均高于非转基因对照株。

  • 一种同时提取水稻土壤中细胞外和细胞内形态DNA的方法

    关键词: 细胞外dna  细胞内dna  水稻土壤  pcr  

    采用灭菌的水稻田土壤为基质,分别投加细菌基因组DNA和细菌活体,应用该方法提取细胞内和细胞外DNA。结果表明,DNA提取效率平均在75.4%-82.3%,DNA纯度OD260/280在1.75-1.85之间。用细菌16S rDNA通用引物PCR表明,DNA纯度能满足PCR要求,细胞内DNA与细胞外DNA互不污染。

  • 三种提取苹果绵蚜基因组DNA方法的比较

    关键词: 昆虫  dna提取  kac法  盐析法  苹果绵蚜  

    参考国内外昆虫基因组DNA提取的常用方法,选取KAc法、氯仿-异戊醇法和盐析法3种方法对苹果绵蚜(Eriosomalanigerum)基因组DNA进行提取。通过基因组DNA直接琼脂糖凝胶电泳、SSR引物扩增产物的琼脂糖凝胶电泳和聚丙烯酰胺凝胶电泳检测,对3种方法所提基因组DNA的质量进行了比较,并综合分析了提取所需时间及所用试剂的毒性大小等。结果表明,盐析法...

  • 番茄果实特异性启动子的克隆与遗传转化研究

    关键词: 番茄  多聚半乳糖醛酸酶  果实特异启动子  遗传转化体系  

    为了实现外源基因在番茄果实中的高效和特异表达,克隆了番茄果实特异基因多聚半乳糖醛酸酶基因(Poly-galacturonase,PG)的启动子。以中蔬四号番茄为材料,建立并优化了以子叶为外植体的番茄高效再生和遗传转化体系;以GUS为报告基因,构建PG GUS植物表达载体,转化番茄。结果表明,在1.0 mg/L ZT的MS分化培养中,番茄子叶的发芽率最高,芽的诱导率高...

  • 番茄内质网ω-3脂肪酸去饱和酶基因原核表达载体的构建与鉴定

    关键词: 番茄  原核表达载体  

    通过RT-PCR的方法从番茄叶片克隆到内质网ω-3脂肪酸去饱和酶(LeFAD3)基因的部分编码区,该片段cDNA为309 bp,将其克隆到pET-30a(+)载体中,酶切位点分别是BamHⅠ和SacⅠ,构建了原核表达载体pET-LeFAD3,并在大肠杆菌BL21中表达融合蛋白,经IPTG诱导蛋白表达,提取蛋白并采用SDS-PAGE和蛋白质免疫印迹法检测目的蛋白的表达情况。酶切鉴定结果表明...

  • 糖化酶、木聚糖酶融合蛋白在毕赤酵母中的高效表达

    关键词: 糖化酶  木聚糖酶  融合表达  毕赤酵母  

    通过RT-PCR方法,以埃默森篮状菌(Talaromyces emersonii)总RNA为模板,克隆出糖化酶(glucoamylase,amyA)基因的成熟肽编码序列(1 857 bp),编码618个氨基酸;以类芽孢杆菌(Paenibacillus sp.)H10-3基因组DNA为模板,克隆出木聚糖酶(xylanase A,xynA)基因的成熟肽编码序列(636 bp),编码211个氨基酸。通过重叠延伸PCR(SOE-PCR)得到拼接...

  • 副溶血性弧菌群体感应蛋白CqsA的原核表达

    关键词: 副溶血性弧菌  群体感应  cqsa  原核表达  

    副溶血性弧菌CqsA是一种推测的信号分子合成酶,其合成的信号分子在群体感应系统中可能具有重要的调控作用。从副溶血性弧菌ATCC17802中克隆cqsA基因,构建重组质粒pET22b-cqsA。测序后转化大肠杆菌BL21进行IPTG诱导表达,使用SDS-PAGE分析融合蛋白的表达状况,并通过6×His-Tag进行Western blotting检测。结果显示,经0.6 mmol/L IPTG诱导4h,目的基因...

  • 定点突变提高D-氨甲酰水解酶的可溶性表达

    关键词: 定点突变  诱导表达  可溶性  酶活  

    采用定点突变的方法对皮氏伯克霍尔德氏菌(Burkholderia pickettii)来源的D-氨甲酰水解酶(D-carbamoylase,DCase)编码基因的3个位点A18、Y30、K34进行突变,并将获得的突变体基因片段构建入高表达载体pET-28b中,转化E.coliBL21(DE3),获得带有组合三突变(A18E/Y30D/K34E)的DCase-SM表达菌株BL21/pET-DCSM。当以IPTG诱导目的蛋白表达时,发...

  • 丙型肝炎病毒核心蛋白稳定表达肝癌细胞株的构建及生物学研究

    关键词: 丙型肝炎病毒  核心蛋白  生物学功能  稳定细胞株  细胞增殖  

    旨在构建稳定表达HCV核心蛋白的稳定细胞系Huh7-Core并进行初步的生物学功能研究。利用PCR技术扩增HCV核心蛋白基因,通过酶切连接反应将目的基因克隆至载体pSEB-3Flag中,将重组质粒pSEB-3F-Core和辅助质粒pAmpho共转染Huh7细胞,经过Blasticidine抗性筛选,建立稳定表达HCV核心蛋白的肝癌细胞系Huh7-Core。采用RT-PCR、Western blot鉴定Huh7-Core...

  • A型口蹄疫病毒VP0基因的克隆及原核表达

    关键词: 口蹄疫病毒  vp0基因  原核表达  

    从实验室冻存的含A型口蹄疫病毒的细胞中提取FMDV总RNA,通过RT-PCR获得cDNA。并根据FMDV全基因组序列设计了一对针对VP0基因的引物,通过PCR扩增得到目的基因VP0并亚克隆入pMD18-T载体。将鉴定出的阳性质粒和表达载体pET32a用BamHⅠ和HindⅢ双酶切回收后连接获得阳性重组质粒pET32-VP0。用IPTG诱导重组质粒表达目的蛋白VP0并用SDS-PAGE进行检测。...

  • 锌螯合物抗体可变区的克隆鉴定、真核表达及重组抗体的三维模建

    关键词: 重金属  单克隆抗体  免疫学检测  序列分析  三维模拟  

    筛选得到能分泌抗锌(Ⅱ)-二乙烯三胺五乙酸(Zn(Ⅱ)-DTPA)的单克隆抗体杂交瘤细胞株2E8E3。经测定,此株细胞分泌IgM,轻链κ型抗体。为了得到该抗体可变区序列,分别在小鼠抗体的信号肽区域和抗体的第一恒定区半胱氨酸残基(Cys)附近选择合适引物,通过RT-PCR方法,得到重(VH)、轻(VL)链可变区序列。将序列进行BLAST分析、SignalP分析、IMG...

  • C2C12成肌细胞诱导肌性分化过程中miR-101a的表达

    关键词: c2c12c成肌细胞  实时定量pcr  肌分化  

    以C2C12成肌细胞为模型,在分化培养基中诱导C2C12建立体外肌性细胞分化模型。以poly(A)3'-端加尾和实时定量PCR方法研究miR-101a在C2C12细胞分化过程中的表达情况。结果发现,在细胞转入分化培养基进行肌性分化的1-5 d中,miR-101a的表达量逐渐增加,提示miR-101a可能在肌肉发生中发挥调控作用。

  • siRNA沉默ERp57对细胞中CRT表达与定位的影响

    关键词: sirna  erp57  钙网蛋白  肺癌细胞  

    探讨ERp57基因表达沉默对人小细胞肺癌A549细胞中CRT表达和定位的影响。利用siRNA技术获得ERp57基因表达沉默的人A549肺癌细胞株,分析该细胞株中ERp57基因以及CRT基因的蛋白表达水平,免疫荧光法检测细胞中CRT的表达和亚细胞定位,荧光法检测细胞凋亡。成功获得ERp57基因表达沉默的人A549肺癌细胞株。在该细胞中,CRT表达上调但仍定位于内质网中。...

  • 西藏牦牛ADD1基因第2外显子的PCR-SSCP检测及序列分析

    关键词: 西藏牦牛  add1基因  

    利用PCR-SSCP和DNA测序方法对帕里牦牛、工布江达牦牛、类乌齐牦牛、康布牦牛、桑日牦牛、巴青牦牛、江达牦牛、斯布牦牛、嘉黎牦牛、桑桑牦牛、丁青牦牛等西藏11个牦牛类群共483头牦牛的ADD1基因(被认为是极可能影响肉质的候选基因)第2外显子序列进行遗传多态性分析。结果表明,66 bp处碱基T缺失和256 bp处A→G突变,共有AA、AB、BB 3种基因型;...

  • 链特异性RT-PCR方法检测口蹄疫病毒负链RNA

    关键词: 口蹄疫病毒  复制中间体  负链rna  感染  

    旨在建立一种快速、灵敏、特异的检测口蹄疫病毒在复制过程中产生的负链RNA的方法。根据口蹄疫病毒(foot-and-mouth disease virus,FMDV)病毒5'-非编码区(5'-UTR)基因序列,设计了5条引物链特异性RT-PCR引物,建立检测口蹄疫病毒负链RNA的链特异性RT-PCR方法。提取FMD病毒RNA,应用设计的正向引物T1-H1做反转录引物,经反转录和RNA酶A消化后,...

  • 双重实时荧光PCR法检测食品和饲料中的鸡源性成分

    关键词: 双重实时荧光pcr  细胞色素b基因  鸡源性成分  内参照  检测方法  

    根据鸡线粒体DNA细胞色素b基因序列和内参照基因PUC18质粒基因序列设计特异性引物和以不同荧光素标记的TaqMan探针。通过对反应条件的优化筛选,建立能同时扩增鸡源性成分和内参照基因成分的双重实时荧光PCR检测方法。设置内参照反应是为了监控反应体系中是否含有PCR反应的抑制物,避免出现假阴性结果。分别以鸡、鸭、鹅、火鸡、牛、羊、猪、鱼、...

  • 牦牛多杀性巴氏杆菌外膜蛋白OmpH的扩增与生物信息学分析

    关键词: 牦牛多杀性巴氏杆菌  外膜蛋白h  二级结构  b细胞抗原表位  功能预测  

    旨在扩增牦牛多杀性巴氏杆菌外膜蛋白OmpH的编码基因,并预测OmpH蛋白二级结构和B细胞抗原表位,从而探讨牦牛多杀性巴氏杆菌外膜蛋白OmpH在免疫保护中所起的作用。对牦牛多杀性巴氏杆菌的外膜蛋白OmpH基因进行PCR扩增及序列测定。应用生物信息学相关软件和方法,对牦牛多杀性巴氏杆菌OmpH蛋白的二级结构和B细胞抗原表位进行预测。牦牛多杀性巴氏杆...

  • NPR1多肽抗体的制备和应用

    关键词: 非表达型病程相关蛋白  序列分析  多肽  合成  多克隆抗体  

    根据NCBI GenBank中报道的NPR1一级结构信息,采用Blastn、Blastx、ExPASy和Protean等软件进行序列同源性和抗原性指数分析,获得三段序列特异性较高的多肽,并从中优选一段序列特异性多肽,采用9-氟甲氧羰基固相合成法获得序列特异性最好的多肽,采用HPLC和LC-MS测定合成多肽的浓度和分子量,试验表明目的多肽纯度达88%、目的多肽分子量为1.92234 kD...

  • 水牛精子蛋白质组双向电泳体系的建立和优化

    关键词: 水牛  精子  双向电泳  蛋白质组学  裂解液  

    建立和优化一种适合水牛精子蛋白质组学研究的双向电泳技术。以水牛精子为研究对象,比较两种不同配方的裂解液,以及不同上样量对其2-DE图谱质量的影响。结果显示,以7 mol/L尿素、2 mol/L硫脲、4%CHAPS、1%DTT、0.5%Cocktail of protease inhibitors为裂解液,24 cm胶条上样量200μg时,可获得较好的精子总蛋白质2-DE图谱。运用ImageMaster 2-Dplati...

  • 土壤放线菌P3-2的分类鉴定及抗菌活性研究

    关键词: 链霉菌  菌株鉴定  抗菌活性  

    对从贵州土壤微生物中筛选到的放线菌菌株P3-2进行了分类学和抗菌活性的研究。采用多相分类法,对该菌株的形态特征、培养特征、生理生化特性以及16S rDNA基因序列进行了研究。结果表明,放线菌P3-2菌株属于链霉菌属;16SrDNA序列长度为1 456 bp,序列分析和系统进化树分析表明其序列与Streptomyces recifenis ST100的同源性最高,为99.4%。但与S.rec...

  • 芽胞杆菌Q13和Q14在猕猴桃叶面的定殖及其对叶面菌群的影响

    关键词: 猕猴桃叶枯病  芽胞杆菌  定殖  微生物分离纯化  分子鉴定  

    为了进一步明确芽胞杆菌Q13、Q14菌株对猕猴桃叶枯病的生防作用,分别对芽胞杆菌Q13、Q14菌株在猕猴桃叶面上的定殖作用及其对叶面其他微生物种类和数量的影响进行了考察。结果表明,在田间条件下,芽胞杆菌Q13、Q14能在猕猴桃叶面定殖,但随时间的变化呈下降趋势;在无降雨等恶劣天气影响的情况下,该菌能在猕猴桃叶面有效定殖8 d左右,8 d后叶面检测...

  • 缢蛏种群遗传多样性的周年变异分析

    关键词: 缢蛏  遗传多样性  遗传分化  线粒体dna  

    利用线粒体COI标记分析了福建省宁德市漳湾镇横屿村滩涂5个月份缢蛏群体(S3,S5,S7,S9,S11)的遗传结构,以期评估不同月份时期种群的遗传多样性差异。基于线粒体COI基因的结果表明,5个缢蛏群体的平均核苷酸差异数位于2.7836-3.6894之间,核苷酸多样性指数位于0.0050-0.0066之间,遗传多样性水平大致表现为S3和S5群体较高于S7和S9群体,明显高于S11...

  • 骨唾液酸蛋白通过整合素α_vβ_3调控ILK信号通路

    关键词: 骨唾液酸蛋白bsp  ilk信号通路  

    旨在探究骨唾液酸蛋白(BSP)是否通过整合素αvβ3对整合素连接激酶(ILK)信号通路进行调控。BSP基因沉默乳腺癌MDA-MB-231细胞,流式细胞仪在细胞水平检测BSP不同水平的细胞株中整合素αvβ3的表达量。Western blotting检测磷酸化ILK水平的变化,MTT法检测细胞增殖能力。与对照组231BO-Scrambled细胞相比,BSP基因沉默组231BO-BSP27细胞中整合素αvβ3...

  • 干细胞相关因子在子宫内膜息肉中的表达

    关键词: 子宫内膜息肉  凋亡  ipo13  

    探讨ipo13、c-kit、CD146、bcl-2和bax在子宫内膜息肉(endometrial polyp,EP)和正常内膜组织中的表达差异及临床意义。收集本院2010年3-7月行宫腔镜手术取得的40例子宫内膜息肉(病例组)与40例正常内膜组织(对照组)。采用实时荧光定量PCR技术(RT-PCR)检测ipo13、c-kit、bcl-2和bax mRNA的表达;免疫组织化学S-P法检测ipo13、CD146、bcl-2...

  • 紫杉醇对人肝癌SMMC7721细胞NDRG1表达及增值的影响

    关键词: smmc7721细胞  ndrg1  紫杉醇  细胞增殖  

    旨在探索紫杉醇对人肝癌SMMC7721细胞NDRG1表达的影响,及紫杉醇对肝癌SMMC7721细胞系增殖的抑制作用。分别提取紫杉醇处理前后SMMC7721细胞的RNA,进行逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR),判断紫杉醇处理前后肝癌细胞中NDRG1表达的情况;采用蛋白印迹技术(Western blotting)分析紫杉醇处理前后肝癌细胞中NDRG1蛋白表达的情况;应用不同浓度紫杉醇处理...

  • 2011年度生物领域重大科技进展

    关键词: 科技进展  生物领域  科学研究  蔓延速度  变异频率  艾滋病  hiv  

    按照惯例,国际著名杂志《科学》(Science)在今年的最后一期中对2011年度的重要科学研究进展进行了总结。现将与生物学研究相关的进展介绍如下。1.艾滋病的治疗。艾滋病是一种全球性疾病,蔓延速度快,死亡率高。由于病原菌HIV的变异频率非常高,使得世界不同地区甚至同一感染个体不同时期HIV的基因组都有较大差

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