生物技术通讯杂志

双组分核定位信号介导Apoptin定位于肿瘤细胞核

关键词: 肿瘤细胞  磷酸化  正常细胞  细胞核  介导  核定位信号  酶抑制剂  突变体  序列  亚细胞定位  

Apoptin是一种来源于鸡贫血病毒的小蛋白,在肿瘤细胞中定位于细胞核,而在正常细胞中主要分布于细胞质.根据预测,Apoptin分子中有2段序列(NLS1和NLS2)可能是单组分核定位信号.通过基因突变和缺失构建了Apoptin各种不同的核定位信号突变体和磷酸化突变体,利用增强型绿色荧光蛋白(EGFP)作标签,观察了其在肿瘤细胞中亚细胞定位的变化.结果表明,NLS1...

BALB／c小鼠I—A^d αβ链RFP融合双顺反子表达载体的构建及其在COS-7中的表达

关键词: ires  rfp  真核  表达载体  激光共聚焦显微镜  红色荧光蛋白  外源蛋白  表达量  

构建了在β链C端融合红色荧光蛋白(RFP)标签的BALB/c小鼠I-Adαβ链真核双顺反子表达载体pRed-IRES-I-Ad,使用LipofectAMINE2000转染COS-7细胞,用激光共聚焦显微镜观察外源蛋白在细胞中的表达与定位.I-Adαβ分子在COS-7细胞中能够以较高的效率表达,并且在COS细胞中能形成聚集状态.与通常的真核翻译帽子结构起始相比,IRES启动真核翻译系统的效率低于...

鼻咽癌患者的Smad2／4基因突变分析

关键词: 鼻咽癌  基因突变  外显子  

利用PCR-SSCP银染技术对30例鼻咽癌患者的Smad2/4基因的所有外显子进行突变分析,以探讨Smad2/4基因与鼻咽癌发病的可能相互关系.结果在所有病例的所有外显子上没有发现任何类型的突变.Smad2/4基因可能不是鼻咽癌的易感基因,TGF-β/Smad2/4信号通路可能不参与鼻咽癌的发病.

抗整合素β3胞外区噬菌体抗体库的构建及筛选

关键词: 单链抗体  胞外区  噬菌体抗体库  扩增  胶质瘤  et  电转化  重叠pcr  特异性识别  

用RT-PCR的方法从人胶质瘤BT-325细胞中扩增人整合素β3胞外区,并克隆到载体pET-24a中构建表达载体.表达的人整合素β3胞外区经变性、复性和纯化后免疫BALB/c小鼠,提取脾脏总RNA,用RT-PCR技术扩增小鼠抗体重链(VH)和轻链(VL)可变区基因,经重叠PCR(SOE-PCR)将VH和VL连接成单链抗体(scFv)基因,并克隆到噬菌粒载体pCANTAB5E中,电转化至大肠杆菌TGl,经...

重组腺病毒介导hMYH cDNA在原代培养大鼠心肌细胞中的表达及活性测定

关键词: 表达载体  心肌细胞  大鼠  原代培养  重组腺病毒介导  碱基错配  dna  结合活性  活性测定  酶活性  

构建携带hMYH cDNA的重组腺病毒表达载体,制备重组腺病毒,并在原代培养的大鼠心肌细胞中得到了表达,表达的hMYH蛋白具有结合并切割A:8-OXO-G碱基错配的糖苷酶活性,对A:G和A:C错配具有较弱的结合活性和切割活性.该研究为进一步进行hMYH的基因治疗奠定了基础.

基质金属蛋白酶2、9和血管内皮生长因子在碱烧伤小鼠角膜组织中的表达

关键词: 碱烧伤  角膜组织  小鼠  mmp2  mmp9  表达  vegf  转录水平  逆转录  总rna  

采取滤纸片放置法,用1 mol/L的NaOH在小鼠角膜中央进行碱烧伤,建立动物模型.取烧伤前和烧伤后的小鼠角膜制备组织切片,用抗MMP2、抗MMP9和抗VEGF的抗体分别进行免疫组化染色,检测它们在碱烧伤前后的小鼠角膜组织中的蛋白表达情况;提取碱烧伤前和碱烧伤后不同时间点的小鼠角膜组织的总RNA并进行逆转录,以获得的逆转录产物作为模板,用特异的引物和...

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重组α-半乳糖苷酶的制备工艺研究

关键词: 血型  毕赤酵母菌  红细胞  新生  菌株  蛋白浓度  比活性  重组酶  疏水层析  

α-半乳糖苷酶是B→O血型改造研究中的关键工具酶.在获得了可分泌表达α-半乳糖苷酶的基因工程毕赤酵母菌株的基础上,进行了工程菌株在5 L发酵罐中的发酵.发酵液上清中α--半乳糖苷酶活性为80～150 U/mL,蛋白浓度为3～4.5 mg/mL,比活性约为20～30 U/mg.发酵液采用超滤、阳离子交换层析、疏水层析和阴离子交换层析等纯化方法,建立起了规模化生产重组...

马抗SARS—CoV免疫球蛋白制备的研究

关键词: 抗sa  免疫球蛋白  治疗  ars  灭活  v抗原  中和抗体  制备  铵盐  工艺  

用纯化灭活的SARS-CoV抗原免疫马匹,采集血浆加入S/D灭活/去除病毒,用硫酸铵盐析沉淀提取抗SARS-CαVIgG,再经胃酶切、柱超滤等工艺制备马抗SARS-CoV免疫球蛋白.研制的马抗SARS-CαV免疫球蛋白制品中和抗体效价达1:6 400以上、F(ab')2纯度在90%以上.建立了高效、稳定、效果好的马抗SARS-CoV免疫球蛋白生产工艺,为SARS的治疗和预防提供了可靠的保证...

驱虫斑鸠菊注射液治疗白癜风的作用机制研究

关键词: 小鼠  b细胞  治疗  t细胞  驱虫斑鸠菊  注射液  cd19  抗体活性  流式细胞法  酪氨酸酶基因  

探讨驱虫斑鸠菊(VW)注射液治疗白癜风的作用机制.进行以下实验探讨VW对小鼠免疫功能的影响:淋巴细胞转化试验测定小鼠脾T、B细胞增殖活性;脾细胞介导羊红细胞定量溶血分光光度法测定B细胞生成抗体活性,流式细胞法测定B细胞上CD19表达活性;迟发型超敏反应(DTH)试验测定T细胞活性、[3H]-TdR掺入法测定T细胞分泌IL-2活性等.用酶学方法研究VW对小鼠...

植物激素对棉花体细胞胚胎发生的诱导及调节作用

关键词: 体细胞胚胎发生  棉花  胚性愈伤组织  发育  ba  胚胎发生  植物激素  增殖  抑制  诱导  

选用11种激素研究了外源激素对棉花胚性愈伤组织增殖、胚胎发生和发育的调控作用.结果表明不同激素对棉花胚性愈伤组织增殖、胚胎发生与发育的影响不同.除2,4-D和BA对棉花胚性愈伤组织的增殖影响不大外,其他激素对棉花胚性愈伤组织的增殖均具有抑制作用,且具有一定的时间效应,同时还受基因型的影响.激素对棉花体细胞胚的形成和发育的影响极大,2,...

平菇种内原生质体分离与融合杂交育种技术的研究

关键词: 平菇  原生质体  杂交育种技术  适应性强  种内杂交  丰产  栽培试验  优生  拮抗  新菌株  

将16个平菇资源品种的菌丝体,在25℃、pH 5.8～6.0环境下,分别用1.5%溶菌酶加0.6 mol/L KCl稳渗剂溶解其细胞壁2 h,原生质体数得量最高.将获得的原生质体两两配对成39个组合,在30℃、pH 9、0.6 mol/L KCl稳渗剂、不加融合促进剂CaCl2和PEG6000的融合条件下,得到种内杂交融合子5株.其中4株融合子再生出菌丝体和子实体;同皿接种实验显示,新菌株与...

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大蒜有性胚培养首次成功

关键词: 首次  癌细胞  胃内  大蒜  巨噬细胞  阻断  制剂  胚培养  生草  蒜头  

大蒜(Alium sativum L.)为二年生草本植物,营养丰富,鲜食可做佐餐菜和调味品;配合现代栽培和保鲜贮存技术,可使蒜头、蒜薹、蒜苗周年供应;加工可作调味品、食品、饲料添加剂.

一种快速鉴定转基因植物纯合体的新方法

关键词: ct值  快速鉴定  实时pcr  杂合  转基因后代  纯合子  状态  转基因植物  植株  幼苗  

植物转化中鉴定转基因植物的整合性是一个很重要的步骤,常规方法是对独立分离的转基因T1代植株产生的T2代进行转基因分离比率研究,以检测T1代的转基因整合状态,不仅费时费力,而且浪费了T1代资源.本文介绍一种应用双重定量实时PCR技术鉴定转基因植物纯合子的新方法:以T1代植物DNA为模板,根据转基因后代的Ct表型值鉴定其转基因整合状态,Ct值接近2...

柞蚕蛹卵巢细胞的初代培养

关键词: 柞蚕蛹  初代培养  培养基  生长状态  细胞原代培养  卵巢细胞  维持  细胞聚集  细胞形态  胎牛血清  

采用MGM-448加20%胎牛血清作培养基对柞蚕蛹卵巢进行组织块培养,细胞可维持良好的生长状态达2个月之久.在此期间,细胞形态不一,且细胞聚集产生分化现象.本研究证明MGM-448培养基对柞蚕细胞原代培养来说是比较理想的培养基.

荔枝基因组DNA的提取

关键词: 荔枝  基因组dna  褐化  ctab法  防止  取材  抽提  有效方法  pvp  影响  

介绍一种提取荔枝基因组DNA的有效方法,即在传统CTAB法的基础上,于CTAB抽提液中加入1%的PVP.影响荔枝基因组DNA提取质量的因素有3个:第一是取材,第二是磨样与温育时间,第三是防止褐化.

2例PCR扩增失败的分析与探讨

关键词: 引物  脑啡肽  巢式pcr  pcr扩增  大鼠  目的基因  失败  核基质结合区  pcr产物  片段  

根据GenBank报道的序列设计引物,PCR扩增克隆玉米乙醇脱氢酶1(Adh)核基质结合区序列及大鼠脑啡肽基因.扩增的序列电泳分析条带与预期的片段大小基本一致,但测序分析均为非目的片段,为非特异PCR产物,一例为非靶序列间的重复序列配对造成,一例为一侧引物单独引起,重新设计引物,采用巢式PCR获得了目的基因片段.

注射用重组人尿激酶原冻干粉针剂进入Ⅲ期临床研究

关键词: 国家级  注射用  冻干粉针剂  临床研究  上海  人尿  尿激酶原  张江  跨国制药公司  功能开发  

上海天士力药业有限公司地处中国药谷——上海市张江高科技园区，是一家蓬勃兴起的生物制药企业。上海市张江高科技园区是中央政府批准设立的国家级高新技术产业开发区，是浦东重点功能开发区，园区特设的张江生物医药产业园区是我国国家级生物医药产业园区，迄今为止，已有9个国家级医药科研机构和多家跨国制药公司入驻张江。

狂犬病病毒分子生物学研究进展

关键词: 狂犬病病毒  分子生物学基础  发病  感染  分子生物学研究  人兽共患传染病  死亡  毒力  基因组结构  免疫  

狂犬病是由狂犬病病毒引起的一种重要的人兽共患传染病,一旦发病,100%死亡,目前尚无有效的治疗方法.本文主要综述了狂犬病病毒基因组结构特点及其形态、结构与功能,并详细阐述了狂犬病病毒与毒力、感染及免疫有关的分子生物学基础.

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多功能转录因子CTCF研究进展

关键词: 肿瘤  表达  核转录因子  app基因  研究进展  突变  x染色体失活  系统发生  igf2  

CTCF是一种多功能的真核转录因子,它可以抑制c-myc基因的表达,增强app基因的启动子活性,调控H19/Igf2的印记,作为鸡β-球蛋白等多个基因结构域的绝缘子成分,以及作为X染色体失活的候选蛋白等.CTCF与BORIS的交互表达和雄性生殖细胞的系统发生有关.CTCF的缺失和突变可能导致肿瘤的发生.

树突状细胞和癌症的免疫学治疗

关键词: 树突状细胞  免疫学治疗  肿瘤  癌症疫苗  dc疫苗  辅助t细胞  早期阶段  调控  毒性  

树突状细胞(dendritc cells,DC)是一种抗原提呈细胞,能特异地引发和调控机体免疫.它具有抗原呈现功能而不损害免疫系统,不仅能够激活CD4+辅助T细胞和CD8+细胞毒性T细胞,还能活化B细胞和自然杀伤细胞.已有的研究让人们看到了癌症疫苗的希望,但还处于早期阶段,有许多尚未确定的因素.因此有关DC疫苗用于对肿瘤的保护性和治疗性免疫还有待于进一步的...

鼠疫耶尔森氏菌基因表达的环境调节

关键词: 鼠疫耶尔森氏菌  基因表达调控  烈性传染病  跳蚤  病原菌  宿主  研究现状  适应环境  循环过程  媒介  

鼠疫耶尔森氏菌是烈性传染病鼠疫的病原菌,该菌在媒介(跳蚤)和宿主(哺乳动物)之间的循环过程中,基因表达适应环境谱的变化.本文介绍鼠疫耶尔森氏菌适应环境信号如不同温度、离子浓度、pH等条件下的基因表达调控研究现状.

EB病毒及其疫苗的研究进展

关键词: eb病毒  疫苗  基因表达  靶抗原  预防和治疗  潜伏感染  相关疾病  选择  潜伏期  基因产物  

EB病毒广泛存在于人群中,它的潜伏感染与多种疾病密切相关,包括鼻咽癌等恶性肿瘤,研制疫苗用于EB病毒相关疾病的预防和治疗十分必要.本文综述了EB病毒的结构及基因表达特点、EB病毒潜伏期感染基因表达及潜伏期基因产物的功能,以及研制EB病毒疫苗的靶抗原的选择.

利用巴斯德毕赤酵母表达外源蛋白的研究进展

关键词: 表达系统  外源蛋白  巴斯德毕赤酵母  外源基因  基因工程技术  转化  优化策略  研究进展  影响  因素  

随着基因工程技术的迅速发展,已有数百种外源蛋白利用巴斯德毕赤酵母表达系统获得了成功表达表达系统的优点、系统的构成,外源基因转化该表达系统的方式及表达特点,阐述了该系统在生产外源蛋白并重点分析了影响外源蛋白在该表达系统中表达的因素及优化策略等.

重组工程系统研究进展

关键词: 体内  靶分子  et  大肠杆菌  打靶载体  bac  内源性  重组工程  双链  dna分子  

大肠杆菌的同源重组依靠内源性的RecA蛋白.RecBCD降解双链线性DNA分子,因此必须构建环状质粒打靶载体才能完成体内重组,操作过程繁琐,所需同源臂长.最近建立起的依赖于Rac噬菌体的ET重组系统和基于λ噬菌体的Red重组系统,可有效利用线性DN段作为打靶分子,对大肠杆菌染色体DNA和BAC、PAC载体中包含的真核细胞基因组DNA进行基因敲除、敲入、替换、...

筛选差异表达基因方法的新进展

关键词: 基因表达  差异表达基因  筛选  新进展  cdna微阵列  基因芯片  rda  发育阶段  杂交  

了解不同细胞或同类细胞在不同发育阶段、不同生理状态下的基因表达状况,可以为研究生命活动过程提供重要信息.以差别筛选、削减杂交等基本方法为出发点,研究基因表达差异的方法不断完善,先后出现了DDRT-PCR、RDA、SSH、cDNA微阵列(基因芯片)、基因表达的系统分析(SAGE)等技术.本文着重对这些方法的优缺点及改进进行论述和评介,并对技术的发展趋...

基于PCR的cDNA基因克隆技术研究进展

关键词: cdna代表性差异分析  编码产物  研究进展  分离  est  基因序列  克隆技术  race  dna分子  

RT-PCR、锚定PCR、cDNA末端快速扩增(RACE)、step out RACE、DDRT-PCR、cDNA代表性差异分析、抑制性削减杂交等都是建立在PCR基础之上的cDNA分子克隆技术.本文介绍各种技术的优缺点、应用以及与同类技术进行比较,这些技术现在已经成功应用于大量EST的分离、cDNA文库的构建、编码产物未知的差别表达基因的分离以及全长cDNA基因序列的克隆等方面.

基因工程技术在降解农药中的应用

关键词: 工程菌  农药  降解  降解酶  

综述了基因重组、原生质体融合、外源基因、降解酶和固相反应器等基因工程技术在降解农药中的研究及应用进展,提出了几种高效降解农药的基因工程菌的构建策略和构建手段.

藻红蛋白光敏剂研究进展

关键词: 藻红蛋白  光敏剂  光动力学治疗  光疗法  肿瘤细胞  给氧  肿瘤治疗  红藻  吸收光谱  特异性  

光动力学治疗法作为一种新的肿瘤治疗方法,近年来发展十分迅速.从红藻中提取的藻红蛋白可以作为光动力学治疗法的一种新的光敏剂.本文概述了我国红藻藻红蛋白资源概况、光疗法和光敏剂作用机理及其研究发展历史与现状,重点阐述了藻红蛋白光敏剂的应用现状、前景和发展趋势,并认为藻红蛋白是光动力学治疗法中一种非常有前景的光敏剂.藻红蛋白在49...

硫酸软骨素研究现状

关键词: 硫酸软骨素  软骨素  生产工艺  

硫酸软骨素是从动物软骨中提取的黏性多糖,在医药、化妆品和食品工业上有广泛的用途,市场前景广阔.本文对硫酸软骨素的性质和用途做了简要的介绍,并阐述了近几年硫酸软骨素生产工艺的发展状况.

生物工程实验室与转基因植物的安全性评价

关键词: 转基因植物  生物工程  生物安全  生物技术  安全性评价  

本文阐述了生物技术和生物安全的科学涵义,对生物工程实验室以及转基因植物潜在的生物安全问题做了详尽的说明,并提出了相应的防范措施和建议,对生物工程特别是转基因植物的前景进行了分析展望.

苏云金芽孢杆菌毒力检测方法综述

关键词: hplc法  免疫分析法  电泳法  毒力  外毒素  检测方法  含量  苏云金芽孢杆菌  生物测定  伴孢晶体  

苏云金芽孢杆菌是目前世界上研究最多、产量最大、应用最广的生物杀虫剂,它具有专一性强、对人畜无害、防治效果好以及生物降解无残毒等优点.本文综合叙述了苏云金芽孢杆菌的毒力检测方法,包括生物测定法、HPLC法、免疫分析法、质谱法和电泳法,其中生物测定法是国际标准方法,已被普遍采用;HPLC法、免疫分析法、质谱法和电泳法是检测伴孢晶体或外...

植物几丁质酶的基因工程与分子生物学研究进展

关键词: 植物  几丁质酶基因  基因工程  分子进化  酶分子  分子生物学研究  抗真菌  抗病性  生理活性  应用前景  

植物几丁质酶具有广泛的生理活性,尤其在植物的抗病性方面具有重要作用,因而植物几丁质酶基因工程成为目前抗真菌基因工程研究的热点.本文介绍了植物几丁质酶基因结构的研究进展,综述了植物几丁质酶基因工程和微生物产几丁质酶转入植物的基因工程研究成果,概述了植物几丁质酶分子比较和分子进化研究,并展望了植物几丁质酶基因工程的应用前景.

延长果实保鲜期的基因工程研究进展

关键词: 果实保鲜  细胞壁水解酶  腐烂  果实成熟  采摘  转基因  基因工程  相关研究进展  延长  体内  

乙烯对果实成熟和衰老具有强烈的促进作用,是造成水果采摘后腐烂的根本原因.本文主要综述了近几年来采用转基因或反义RNA技术,将乙烯生物合成与分解过程中所需酶的基因和细胞壁水解酶基因转化到植物体内,从而延长果实保鲜期的相关研究进展.

抗菌生物材料的研究进展

关键词: 生物材料  瓣膜  人工肾  导尿管  抗菌能力  人工器官  细菌性感染  聚砜  聚醚砜  改性  

生物高分子材料(医用缝合线、导尿管等)及人工器官(心瓣膜、人工肾等)的应用日益广泛,使用过程中引发的细菌性感染导致诸多严重后果,不容忽视.基于感染机理,人们通过对生物材料表面进行不同的改性,如通过阻止细菌黏附达到抗菌效果、通过干扰细菌细胞的组成取得杀菌效果等,研究了不同的抗菌机理.本文综述了新型有机高分子抗菌剂的发展,提出对生物...

光纤倏逝波生物传感器及其应用

关键词: 生物传感器  光纤  倏逝波  

介绍光纤倏逝波生物传感器的基本原理、常用试验方法、基本仪器构建及应用进展.光纤倏逝波生物传感器是基于光波在光纤内以全反射方式传输时产生倏逝波的原理,以生物分子作为敏感元件进行检测的一类新兴传感器.光纤倏逝波生物传感器有望应用于环境监控、食品卫生监控、临床疾病监测、DNA检测和生物战剂检测.

《生物技术通讯》2004年分类索引

《生物技术通讯》理事会