双歧杆菌原生质体的制备与回复研究

张莉滟; 黄勇; 张德纯 广东省人民医院检验科,广东广州510080; 重庆医科大学,重庆400016

关键词:双歧杆菌 原生质体 培养基 浓度 厌氧条件 

摘要:进行了双歧杆菌原生质体的制备与回复相关技术研究,为其基因操作及相关研究提供技术基础。采用浓度分别为1,5,10mg/L Mutanolysin(变溶菌素)对长双歧杆菌进行脱壁处理,以探讨其原生质体形成与时间和酶浓度的关系,然后选用较适宜的酶浓度(5mg/L Mutanolysin)制备其原生质体。并将其倾入自制的双层再生培养基上,观察其在不同环境条件下培养时的回复生长情况。结果表明,长双歧杆菌的细胞壁对Mutanolysin较为敏感,用浓度为5mg/L的Mutanolysin处理长双歧杆菌40min,在普通光学显微镜下即可见90%的原生质体形成,当Mutanolysin浓度为10mg/L时,只需25min其原生质体形成率就达此值。制备的长双歧杆菌原生质体倾入自制的双层再生培养基中,在厌氧条件下能很好地回复生长。

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