微生物学报杂志

从贵州白纹伊蚊体内分离到一株2型登革病毒

关键词: 贵州  白纹伊蚊  分离  登革病毒  人类疾病  den  基因序列测定  点突变  系统发育  

从贵州省独山县麻尾镇白纹伊蚊标本中分离到一株病毒,用抗DEN 1-4型单克隆抗体经间接免疫荧光法和RT-PCR产物酶切分型鉴定为DEN-2,并对其 NS1和E基因RT-PCR产物进行部分基因序列测定,与DEN-2 NGC株比较,麻尾株的NS1基因区有7个碱基发生点突变,E基因区有1个碱基的插入,两个序列被GenBank收录,编号分别为AY277402、AY278226;麻尾分离株与其他9株DE...

以减毒沙门氏菌运送的H5亚型禽流感病毒DNA疫苗的构建及其对小鼠的免疫原性

关键词: 减毒沙门氏菌  h5亚型禽流感病毒  dna疫苗  免疫原性  小鼠  ha基因序列  免疫应答  

根据GenBank中已发表的H5亚型禽流感病毒HA基因序列,设计一对引物,通过RT-PCR扩增鹅源H5亚型高致病力禽流感病毒HA基因,测序确认后,将其克隆入真核表达载体pVAX1和asd-pVAX1得到重组表达载体pVAX1-HA和asd-pVAX1-HA.将重组质粒转染P815细胞,经间接免疫荧光试验证实,HA基因在细胞内得到了瞬时表达.进一步将重组质粒转化减毒鼠伤寒沙门氏菌X4550得...

马立克氏病病毒pp38基因上游的一个双向启动子研究

关键词: 马立克氏病病毒  pp38基因  双向启动子  重组质粒  鸡胚成纤维细胞  mdv  

马立克氏病病毒(MDV)pp38基因上游是病毒基因组DNA复制原点.在其两侧均含有启动子TATA-box、CAAT-box等特征性的保守基元,推测是一个天然的双向启动子.为了在体外验证其双向启动活性,本研究以MDVpp38为报告基因,并将其ORF插入到pUC18中,构建了pUC-pp38质粒.将包含该启动子完整区域的789bp序列分别以正反两个方向克隆进pUC-pp38质粒中pp38报告基...

猪水肿病大肠杆菌志贺样毒素Ⅱ型突变体新基因的分子特征

关键词: 猪水肿病  大肠杆菌  基因  菌株np9621  同源性  

从仔猪水肿病样品中分离的一株大肠杆菌菌株NP9621,抽提染色体DNA,构建NP9621的总DNA文库,经菌落原位杂交筛选、限制酶酶切和Southern印迹等分析,获得含有志贺样毒素基因的重组质粒,核苷酸序列分析表明, 该基因的 A亚基与SLT-IIes的同源性为97.6%～98.1%,与SLT-IIc、SLT-IId及EHEC O157:H7产生的SLT-II 的A亚基之间的同源性分别为93.1%、93.0%和...

《微生物学报》综述文章投稿说明

猪Ⅱ型圆环病毒全基因组的克隆及感染性鉴定

关键词: 基因组  克隆  感染性  鉴定  断奶后仔猪多系统衰弱综合征  pmws  

设计合成一对扩增猪Ⅱ型圆环病毒(PCV-2)全基因组的特异性引物,从3份患断奶后仔猪多系统衰弱综合征(PMWS)的死亡仔猪病料中,PCR扩增和克隆了3株PCV-2全基因组序列.将所测序列与已公布的PCV毒株序列进行同源性比较,并绘制系统发育进化树.结果显示,所测毒株间的核苷酸同源性为95.7%～99.4%,与其它毒株的同源性较高,达95.1%以上;ORF1的核苷酸同源性...

第五届世界食用菌生物学及产品大会将于2005年在上海召开

关键词: 第五届世界食用菌生物学及产品大会  上海  上海市农业科学院  

利用杆状病毒Bac-to-Bac系统在Sf9细胞中表达真菌细胞色素P450nor

关键词: 杆状病毒  sf9细胞  表达  真菌  细胞色素p450nor  基因  生物学活性  

利用Bac-to-Bac杆状病毒载体表达系统将真菌细胞色素P450nor基因克隆至转移载体pFastBac1中, 得到重组质粒pFastBac-P450nor, 再将其转化进入含穿梭载体Bacmid的受体菌DH10Bac中发生转座作用, 得到含P450nor基因的重组穿梭载体rBacmid pAc-P450nor.分离提取重组Bacmid DNA, 并转染培养的昆虫细胞Sf9, 得到重组病毒rAc-p450nor.经酶切和PCR 鉴定,...

烟草花叶病毒运动蛋白cDNA的克隆及融合蛋白的表达

关键词: 烟草花叶病毒  运动蛋白  cdna  克隆  融合蛋白  表达  tmv  核苷酸  同源性  

从烟草花叶病毒(TMV)中提取总RNA,通过反转录-PCR (RT-PCR) 扩增得到其运动蛋白(MP)的基因,将扩增产物克隆到pMD-18T载体上.DNA序列分析表明,所得到的运动蛋白的基因全长为807bp (GenBank接受号AY300161), 与已发表TMV序列(GenBank登陆号为NC-001367)和同属的番茄花叶病毒(ToMV, GenBank登陆号为NC-002692相比核苷酸的同源性分别为98.0%和80.9%,...

芜菁花叶病毒单克隆抗体的制备及检测应用

关键词: 芜菁花叶病毒  单克隆抗体  tumv  寄主  杂交瘤细胞  田间作物  病原  检测方法  

先以芜菁花叶病毒(TuMV)免疫BAL B/C小鼠,然后取其脾细胞使之与SP2/0鼠骨髓瘤细胞融合,经筛选、克隆,获得4株能稳定传代并分泌抗TuMV单克隆抗体(MAb)的杂交瘤细胞,并以之制备腹水单抗.4株单克隆抗体腹水ELISA效价在10-5～10-6之间,仅对TuMV起特异性反应.Western blot分析表明,4株单抗都能与TuMV 34kD的外壳蛋白亚基起特异反应.利用TuMV的多抗兔...

假单胞菌M18rsmA^-突变株的构建及其对Plt和PCA合成的区别性调控作用

关键词: 假单胞菌m18  rsma  藤黄绿菌素  基因  突变株  生物合成  pca  plt  抗生素  植物病原菌  

假单胞菌(Pseudomonas sp.)M18是促进植物生长的根际细菌,能产生吩嗪-1-羧酸(PCA)和藤黄绿菌素(Plt)两种不同的抗生素抑制植物病原菌,保护植物免受病害.运用PCR方法,从M18基因组中,扩增出rsmA基因部分片段,并以该片段为探针,从M18的基因组柯斯文库中筛出阳性克隆,切取带有rsmA基因及两侧序列的1.5kb片段,中间插入编码Kmr的DN段,获得rsmA-体外突...

阿维链霉菌bkdF的基因中断对阿维菌素合成的影响

关键词: 阿维链霉菌  阿维菌素  基因中断  菌株  生物合成  

以阿维菌素 B组分菌株Streptomyces avermitilis Bjbm0006为出发菌株,用PCR方法构建支链α-酮酸脱氢酶基因bkdF(Branched-chain α-keto acid dehydrogenase gene)的重组质粒pHJ5816 (pHZ1358/bkdF&Ermr)对其进行基因中断,得到重组菌株Bjbm5816.经HPLC检测和核磁共振分析发现,Bjbm5816发酵产物产生的单一组分新化合物为OligomycinA.

球孢白僵菌羧基转运蛋白基因BbJEN1及其上游序列的克隆与分析

关键词: 球孢白僵菌  羧基转运蛋白  基因  突变体  病原真菌  产孢机制  

在分析一株球孢白僵菌T-DNA插入突变体T12的Tagging序列的基础上,根据与其具有高度同源性的一条金龟子绿僵菌EST序列(编号为AJ273226)设计简并引物,用YADE法从球孢白僵菌中扩增出该EST的同源序列及其延伸序列.序列分析表明,该片段与粗糙脉孢霉的羧基转运蛋白JEN1具有高度同源性,由此确定该序列为球孢白僵菌羧基转运蛋白JEN1基因的部分序列.然后...

寄生疫霉parA1基因的克隆及在大肠杆菌中的表达

关键词: 寄生疫霉  para1基因  克隆  大肠杆菌  表达  耐热性  蛋白酶k  序列分析  烟草  黑胫病  

根据已报道的寄生疫霉(Phytophthora parasitica)parA1基因的序列设计引物,从4株寄生疫霉中国菌株(3株来自烟草,1株来自刺槐)中克隆到此基因并进行了重组表达.序列分析表明4株寄生疫霉parA1基因序列高度保守.对表达载体pET-30a(+)双酶切,构建表达Parasiticein蛋白的表达载体pET-eli,用CaCl\-2法转化大肠杆菌(Escherichia coli)BL21,通过诱导在大...

科学出版社生命科学编辑部精品书推荐（微生物类）

利用Tn5-1063转座诱变法分离苜蓿中华根瘤菌042BM noeB基因的研究

关键词: 根瘤菌  豆科植物  基因  共生作用  苜蓿  结瘤突变株  发光酶活性  转座子  氨基酸序列  

采用三亲本杂交方法将带有Tn5-1063(含luxAB)的质粒pRL1063a导入苜蓿中华根瘤菌(Sinorhizobium meliloti)042BM,进行转座子插入诱变,在含有氯霉素、卡那霉素的TY平板上筛选接合子.通过结瘤试验,从1000个突变株中,筛选到3个结瘤突变株042BMR5、042BMR11和 042BRM29.它们都表现出发光酶活性,表明转座子正向插入到基因组中的某个启动子下游.Souther...

神经营养素-3基因的人工合成及其在毕赤酵母中的分泌性表达

关键词: 基因  人工合成  毕赤酵母  分泌性表达  偏爱密码子  真核蛋白表达系统  

《微生物学报》第八届编辑委员会名单

应用膜反向斑点杂交技术快速检测结核分支杆菌耐乙胺丁醇基因型的研究

关键词: 膜反向斑点杂交  结核分支杆菌  乙胺丁醇  embb基因  药物耐受性  结核病  

应用膜反向斑点杂交技术快速检测结核分支杆菌对乙胺丁醇(EMB)耐药性.设计与合成用于检测结核分支杆菌耐EMB基因embB的寡核苷酸探针,点于硝酸纤维素膜上,与结核分支杆菌临床分离株生物素标记的聚合酶链反应(PCR)产物进行反向斑点杂交,并与PCR-单链构象多态性(PCR-SSCP)和PCR-直接测序(PCR-DS)结果比较.对81株结核分支杆菌临床分离株进行分析,31...

极耐热性阿拉伯糖苷酶基因的表达、纯化及酶学性质研究

关键词: 耐热性  阿拉伯糖苷酶  基因  表达  纯化  酶学性质  海栖热袍菌  克隆  大肠杆菌  

采用PCR从海栖热袍菌(Thermotoga maritima)克隆出编码极耐热稳定性阿拉伯糖苷酶基因,以pET-20b为表达质粒,与其C末端6个组氨酸标签序列融合,在大肠杆菌中得到高效表达.基因表达产物通过热处理和亲和层析柱纯化后,酶纯度达电泳均一.纯化重组酶稳定性检测表明,阿拉伯糖苷酶活性最适作用温度和最适作用pH分别为90～95℃和pH 5.0～5.5,在pH 4.2～8....

细菌除草剂黄单胞菌反枝苋致病菌的筛选

关键词: 杂草  反枝苋  根际土壤  细菌除草剂  黄单胞菌  致病菌  蛋白核小球藻筛选模型  酶抑制剂模型  

从杂草反枝苋根际土壤中分离到大量的根际细菌,利用谷氨酰胺合成酶抑制剂模型和蛋白核小球藻筛选模型进行快速、高效的初筛,并结合温室盆栽复筛,筛选出一株具有较强除草活性的细菌-野油菜黄单胞菌反枝苋致病变种.温室盆栽试验表明,该黄单胞菌对反枝苋、荠菜等双子叶杂草具有较强的抑制作用.

微量元素对大肠杆菌生长和乙酸生成的影响研究

关键词: 微量元素  大肠杆菌  菌体生长  乙酸  代谢  培养基  

大肠杆菌DA19的代谢特性与培养基中添加微量元素有较大的关系.在基本培养基中,当氮源限制时,添加微量元素可以在一定程度上改善DA19菌体的生长,提高菌体得率YX/G,大大减少乙酸的生成;当氮源充分时,与不添加微量元素相比,DA19在添加微量元素后,菌体浓度大大增加,虽然葡萄糖消耗速率加快,但产乙酸仍然很少,只有不添加时的13%,YX/G提高至少60%.基本...

降解山楂汁中柠檬酸酵母菌的筛选及其降酸特性研究

关键词: 山楂汁  柠檬酸  黄酮  酵母菌  筛选  生物降解  发酵  

采用酸碱滴定法和高效液相色谱法对山楂汁中主要有机酸进行分析,结果表明柠檬酸占总酸的83.5%;分别以柠檬酸和山楂黄酮为唯一碳源,筛选能降解柠檬酸而不利用山楂黄酮的酵母菌,结果获得6株菌;再以山楂汁为培养基进行复筛,得到一株酵母菌,该菌能有效降解山楂汁中柠檬酸而对山楂黄酮的影响较小;经鉴定这株菌属于毕赤酵母属,定名为Pichia sp.Y1.发酵...

科技论文中常见的一些格式

关键词: 自然科学  论文  格式  正体  斜体  计量单位  

富锌酵母的选育及培养条件研究

关键词: 富锌酵母  选育  育种  发酵条件  菌株  培养基  

对402株不同种属的酵母菌株进行了出筛、复筛、单倍体分离、诱变,从亲株Y-6-16-18(a met)(Saccharomyces cerevisiae)和Y-378-4-15(α leu)(Sacharomyces kluyveri)的杂交菌株中选育到一株富锌酵母菌株(编号为ZGH-374).并初步优化了发酵条件:培养基为80g/L糖浓度的麦芽汁、10g/L蛋白胨、锌添加量400μg/mL,pH 6.0,装液量40mL/250mL三角瓶,接种量10...

T90-1木霉菌的筛选和对草莓灰霉病菌作用机制的研究

关键词: 木霉菌  筛选  草莓灰霉病菌  作用机制  几丁质酶  变异  重寄生方式  

木霉菌(Trichoderma)作为一种重要的生防因子,可以产生几丁质酶降解植物的多种病原真菌细胞壁.利用低能离子束注入木霉菌使其产生变异,再通过初筛选和复筛选两个过程,获得T90-1木霉菌株,并用草莓灰霉病菌(Botrytis cinerea Pers.)来检验T90-1防治真菌病害的能力.发现该菌株通过侵染、缠绕等多种重寄生方式,并分泌降解病原真菌细胞壁的物质,使病...

石油生物催化脱硫菌Agrobacterium tumefaciens UP3的分离筛选

关键词: 二苯并噻吩  dbt  菌株  根癌土壤杆菌  土壤  石油  生物催化脱硫  筛选  降解  

从胜利油田被原油污染的土壤中筛选到一株能有效降解模型化合物二苯并噻吩(DBT)的菌株.根据常规的形态分析、生理生化性状及16S rDNA序列分析,将其鉴定为根癌土壤杆菌(Agrobacterium tumefaciens UP3).该菌不能以十二烷、十六烷、液体石蜡和萘作为唯一碳源和能源生长,具有工业应用的潜力.对该菌株DBT降解能力的初步研究表明,54h内可将500mg/L的D...

基于SPE法的新型DNA提取微芯片的制作和研究

关键词: spe  dna提取  微芯片  固相提取法  硅微加工工艺  

在生物医学和临床诊断中,DNA提取是关键的步骤。随着生物分析仪器的小型化和芯片化，有必要制作DNA提取芯片。固相提取法（Solid-Phase Extraction,SPE法）是近年来实验室常用的DNA提取方法，其操作简单，时间消耗少，但是基于SPE法制作的微芯片报道较少，利用硅微加工工艺制作DNA提取芯片，并使用SPE法进行PCR产物中DNA提取实验及大肠菌培养液...

顶头孢霉pcb AB-pcbC双向启动子区域的克隆与应用

关键词: 顶头孢霉  双向启动子  dna片段  转化子  克隆  博莱霉素  透明颤菌血红蛋白  抗性  基因  

用PCR方法从丝状真菌顶头孢霉中克隆出全长1.3kb的pcbAB-pcbC双向启动子DN段,通过转化子对博莱霉素的抗性证明了该启动子在顶头孢霉中的双向启动功能.另外,利用所克隆的pcbAB-pcbC双向启动子构建了一个用于顶头孢霉转化的质粒pYG13,并成功地将该质粒转化入顶头孢霉.pYG13含有博莱霉素抗性基因和透明颤菌血红蛋白基因(vgb), Southern杂交和CO结合...

木质素过氧化物酶基因（LipH8）的克隆及在甲醇毕赤酵母中的表达

关键词: 黄孢原毛平革菌  rna  克隆  甲醇毕赤酵母  木质素过氧化物酶  异源表达  cdna  

以黄孢原毛平革菌(Phanerochaete chrysosporium)RNA为模板,克隆LipH8基因片段,研究LipH8基因在甲醇毕赤酵母中的表达.构建了甲醇酵母表达质粒pMETA-LipH8载体,并将其线性化后用电穿孔法导入Pichia methabolica PMAD16,部分阳性克隆的PCR结果表明LipH8基因已经整合到甲醇毕赤酵母染色体上,经摇瓶培养筛选出表达水平较高的酵母工程菌株.胞外木质...

昆虫病原线虫共生菌杀虫毒素研究进展

关键词: 昆虫病原线虫  共生菌  肠杆菌科  杀虫毒素  口服毒性  基因  

对昆虫病原线虫共生菌杀虫毒素的种类、与口服毒性有关的杀虫毒素以及口服毒性与杀虫毒素基因的关系等研究进展进行了综述,并对未来的研究方向提出了作者的见解.