微生物学通报杂志

复合诱变和抗性筛选利迪链菌素高产菌株

关键词: 利迪链霉菌  利迪链菌素  复合诱变  抗性筛选  

为解决利迪链霉菌生产能力低的问题，以Streptomyces lydicus AS4．2501-P28为出发菌株，应用紫外和吖啶橙诱变，结合抗生素的抗性筛选，得到稳定高产的S．lydicus AS4．2501-L8，发酵水平达到177．0μg／mL，较出发菌株提高了96．2％。

论文中有关正、斜体的约定

以比生长速率时间曲线为基础的生物群体生长数学模型

关键词: 数学模型  群体生长  比生长速率  

构建了一个描述限制性环境条件下生物群体生长规律的数学模型。模型中比生长速率（p）是时间（t）的函数。模型可以很好地拟合多种生物或生物细胞群体生长的延迟期、指数期和稳定期。该模型参数少，模型参数生物学意义明确，计算简单。

远志内生真菌分离鉴定及活性筛选

关键词: 远志  内生真菌  分离  鉴定  活性筛选  

从两个不同生长时期野生远志中分离内生真菌菌株88株，隶属于28个属，研究了各菌株对3种指示菌的拮抗作用。结果表明，远志不同生长时期不同部位的内生真菌数量、分布、种群存在差异，其优势属为Alternaria Nees。茎中内生真菌种类较多。88株内生真菌中有73株菌至少能拮抗1种指示菌，占总菌数的83．0％。4株抗性较强的菌株分别隶属于Trichotheci...

专论与综述论文的撰写要点

牛流行热病毒糖蛋白G1抗原表位在毕赤酵母中的表达和抗原性鉴定

关键词: 牛流行热病毒  g1抗原表位  毕赤酵母  表达  鉴定  

从包含牛流行热病毒G蛋白基因的质粒pMD—G中克隆G1抗原表位区基因，亚克隆进表达载体pPIC9K，构建重组载体pPIC9K—G1，线性化后电转化毕赤酵母GS115，通过G418压力和PCR法筛选阳性重组酵母进行诱导表达。经SDS-PAGE、脱糖基化分析、Western blot、ELISA、兔体免疫实验和特异性分析，表明该基因在GS115中表达并进行了适度的糖基化，表达蛋白有...

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REMI介导电转化产甘油假丝酵母

关键词: 产甘油假丝酵母  遗传转化  remi  

为了分离耐高渗和甘油代谢相关基因，以Zeocin为选择标记，利用REMI技术电转化产甘油假丝酵母Candida glycerinogenes。考察了7种限制性内切酶对转化的影响，选择HindⅢ进一步优化了转化的几个条件。结果表明，在OD600≈1．3时收集细胞，在1．5kV电压下，感受态细胞浓度为2．0×10^9个细胞／mL，100U HindⅢ时，能获得129个转化子／μg DNA的较高...

氨基糖苷类抗生素JI-20A发酵过程的磷酸盐控制

关键词: 磷酸盐  发酵  碱性磷酸酯酶  丙酮酸  

磷酸盐初始浓度6．1mmol／L～9．6mmol／L有助于菌体的生长，但抑制氨基糖苷类抗生素JI-20A的合成。在产物合成期磷酸盐浓度控制在1．1mmol／L以下可提高碱性磷酸酯酶活力，降低丙酮酸浓度，促进氨基糖苷类抗生素JI-20A合成。

不同碳源对小球藻Chlorella zofingiensis异养产虾青素的影响

关键词: 小球藻  碳源  虾青素  

研究了葡萄糖、蔗糖和果糖对小球藻（Chlorella zofingiensis）异养生长及产虾青素的影响，结果表明，在糖浓度为20g／L时，细胞生长较快，但干重较小，虾青素含量较低；在糖浓度为50g／L时，细胞生长较慢，但干重较大，虾青素含量较高。3种碳源中蔗糖和葡萄糖效果较好，在蔗糖浓度为50g／L时，虾青素含量和产量分别达到0．94mg／g和9．61mg／L...

一株番茄青枯菌拮抗菌的鉴定及抗病效果初探

关键词: 番茄青枯菌  拮抗菌  生理生化  16s  rdna  抗病效果  

从形态、生理生化、16SrDNA3个方面确定了番茄青枯菌拮抗菌株3-1—16的分类地位。光学显微镜下观察到菌体为杆状细胞，革兰氏染色均匀，并可见菌体染成蓝紫色。透射电镜进一步观察到细胞内有许多颗粒状物质，无伴胞晶体。Biolog鉴定，3-1、16与巨大芽孢杆菌（Bacillus megaterium）具有最高相似率为98％。16SrRNA分析，3-1-16与巨大芽孢杆菌MO31...

产氢红杆菌类胡萝卜素含量和组分分析

关键词: 产氢红杆菌  类胡萝卜素  

类胡萝卜素在调节光合细菌产氢中具有重要作用。采用丙酮-甲醇有机溶剂法和KOH甲醇皂化法对产氢红杆菌（Rhodobacter sp．）R7菌株类胡萝卜素进行了提取纯化，并进一步采用硅胶G薄板层析法对提取的类胡萝卜素进行了分离，并结合光谱法对分离的类胡萝卜素进行了定性和定量分析。结果表明，丙酮-甲醇（7：2，V／V）提取3次可将色素提取完全；最佳...

中国科学院微生物研究所期刊广告部成立

新疆胀果甘草内生菌的分离和鉴定

关键词: 内生菌  胀果甘草  健康甘草组织  

对采自新疆的健康野生胀果甘草不同组织中的内生菌进行分离，确立了分离的条件为5％NaClO4浸5min，分离纯化得到149株细菌和2种真菌。通过形态学观察和革兰氏染色，细菌中芽孢杆菌为93株，杆状菌56株，使用法国梅里埃细菌自动鉴定仪对其进行鉴定，得到鉴定结果的细菌属于13个属，真菌显微形态鉴定属于Penicillium青霉菌属和Fusarium镰刀菌属。

《微生物学通报》编辑部公告

重组胰高血糖素样肽-1与人血清白蛋白融合蛋白的纯化及活性研究

关键词: 人血清白蛋白  融合表达  纯化  

利用构建的重组菌株Pichia pastoris GS115／GLP-1／HSA，在10L发酵罐中表达了胰高血糖素样肽-1与人血清白蛋白融合蛋白（GLP-1／HSA），表达量为63．6mg／L。发酵液经中空纤维柱浓缩、疏水层析、阴离子交换层析和凝胶过滤分离纯化，获得了较高纯度的GLP-1／HSA，经HPLC分析纯度达95．8％。进一步的体内活性分析结果表明，GLP-1／HSA不仅具有天...

红树林内生海洋细菌CⅢ-1菌株胞外代谢产物GC／MS分析

关键词: 海洋细菌  胞外代谢产物  分析  

红树林内生海洋细菌CⅢ-1菌株胞外代谢产物的二氯甲烷萃取物GC／MS分析结果表明，该菌株胞外代谢产物的二氯甲烷萃取物的主要化学成分及相对含量为：花生酸（10．12％）、角鲨烯（7．33％）、12-二十三酮（7．07％）、2-（2-羟基乙氧基）乙基硬脂酸酯（6．21％）、四甲基环氧乙烷（4．67％）、吡咯-2-乙酸，4-（1-氯-1-癸烯基）-3，5-二甲基乙基...

征稿简则

银耳二型态细胞差异性的初步研究

关键词: 银耳  二型态  显微观察  总蛋白  同工酶  

以银耳的担孢子、节孢子和菌丝体为材料，通过显微观察和电泳分析揭示银耳二型态细胞间的差异性。显微形态及核相观察表明：节孢子直径略大于担孢子，担孢子为单核细胞，节孢子绝大多数为单核细胞，少数为双核细胞，菌丝体为双核细胞并具有典型的锁状联合结构。总蛋白及同工酶电泳分析表明：菌丝相总蛋白谱带多于酵母相，过氧化物及酯酶与酵母相...

抗感青枯病番茄的内生细菌数量动态分析及其对青枯病的生物防治

关键词: 番茄  内生细菌  青枯病  生物防治  

对番茄内生细菌数量动态及其对青枯病的生物防治研究结果表明：番茄内生细菌可来源于种子内部。番茄不同生育期，内生细菌数量最多在成株期，其中抗病品种根、茎分别为24．3×10^4CFU／g鲜重和22．9×10^4CFU／g鲜重，感病品种根、茎分别为9．8×10^4CFU／g鲜重和13．4×10^4CFU／g鲜重。抗病品种中具有拮抗青枯菌的内生细菌菌株为17个，感病品种中7...

禽流感病毒NP蛋白与T4噬菌体SOC蛋白的融合表达

关键词: 禽流感病毒  核蛋白  t4噬菌体  融合表达  

利用PCR技术扩增禽流感病毒（avianin fluenza virus，AIV）NP基因。将NP基因克隆至T4噬菌体表达质粒pSOC的SOC基因（T4噬菌体表面非结构蛋白基因）下游，构建成T4噬菌体SOC位点表达NP的表达载体pSOC—NP。将其转化至大肠杆菌BL21（DE3），经IPTG诱导后表达的目的蛋白SOC—NP进行SDS—PAGE与Western—blot方法检测。结果表明，表达的SOC—NP蛋白...

植物内生真菌生产紫杉醇大有希望

关键词: 微生物发酵生产  紫杉醇  植物内生真菌  微生物方法  第四军医大学  现代生物技术  传统方法  组织培养  

索取紫杉醇（taxol）的传统方法需要砍伐大量紫杉树木，取其树皮以提取紫杉醇，其代价很高。采用细胞-组织培养索取紫杉醇的方法正在积极实验研究之中。我国第四军医大学曾采用非生物方法即手性催化技术合成紫杉醇及多烯紫杉醇取得成功。目前，国内外采用微生物方法生产紫杉醇已经取得重要进展。从其生产途径找“窍门”，采用微生物发酵生产紫杉...

农药对生防菌厚孢普可尼亚菌ZK7生长发育的影响

关键词: 生防菌  厚孢普可尼亚菌zk7  农药  孢子萌发  菌丝生长  

以PDA平板和PDB摇瓶培养法测定了6种常用化学农药对烟草根结线虫生防菌厚孢普可尼亚菌ZK7菌株孢子萌发率、平板抑制作用和液体培养生物量的影响。结果表明，生防菌ZK7菌株对低浓度的6种药剂均存在一定抗性，对不同药剂的抗性表现出差异。其中多菌灵和甲基托布津对生防菌ZK7菌株的抑制作用最大，其次是辛硫磷和雷多米尔，克百威和涕灭威抑制作用...

MGB（Minor Groove Binder）复合探针二重实时定量PCR检测大肠杆菌O157

关键词: 大肠杆菌o157  荧光定量pcr  mgb探针  rfbe  stx2  

以大肠杆菌O157 rfbE和stx2为待检靶基因，设计两对引物和两条MGB探针，rfbE和stx2探针5’端分别用FAM和VIC基团标记，3’端均用Taqman—MGB标记。建立并优化了检测大肠杆菌O157的二重荧光定量PCR方法，可检测的最低DNA浓度是10拷贝／μL；实验中O157菌株检测结果均为rfbE阳性，而非O157菌株检测结果均为阴性；重复性实验中，批间差异小于80％，...

整细胞酶促合成抗HIV新药D-D4FC

关键词: 整细胞  酶促  抗hiv  合成  

D—D4FC（β—D-2’，3＇-双脱氢双脱氧-5-氟胞嘧啶核苷）是-种新型抗HIV病毒的核苷类药物，目前正在美国、法国和德国进行Ⅱ期临床。利用乳酸杆菌提取的粗制N-脱氧核糖转移酶实现了由D4T（β—D-2’，3＇-双脱氢双脱氧-胸苷，司他夫定）和5-FC（5-氟胞嘧啶）合成D—D4FC，转化率达到25％。现在，发现利用乳酸杆菌整细胞也可实现此反应，其转化率...

链孢粘帚霉几丁质酶的诱导及其抗真菌活性研究

关键词: 链孢粘帚霉  几丁质酶  诱导  抗菌作用  

链孢粘帚霉HL-1—1菌株在不同培养条件下产几丁质酶活性不同，核盘菌菌核对其几丁质酶的诱导作用高于几丁质；首次用菌核配制培养基成功诱导了几丁质酶的产生，其产酶的最适初始pH值为4．5，最适培养时间为6d。几丁质酶对10种病原菌都有不同的抑制作用，对小麦雪腐病、葡萄白腐病、玉米黄斑病及斑点落叶病等病原菌的孢子萌发具有明显的抑制作用...

根瘤菌N613胞外多糖发酵条件及抗肿瘤作用研究

关键词: 根瘤菌  胞外多糖  优化  发酵  抗肿瘤  

用摇瓶正交试验研究了根瘤菌Rhizobium sp．N613合成根瘤菌胞外多糖（rhizobium exopolysaccharide，REPS）的最佳培养基配方和最适培养条件。采用10L自动控制罐进行了分批发酵试验，获得了合成REPS的发酵动力学参数。经40h的补料分批发酵与代谢调控，REPS产量达到11．31g／L。此外，抗肿瘤实验表明，当REPS剂量为5mg／kg时，其抑瘤率可达53．40...

李斯特菌侵染宿主细胞过程中磷脂酶D活性变化的初步研究

关键词: 李斯特菌  磷脂酶d  侵染  

磷脂酶D（phospholipase，PLD）在感染和炎症反应中发挥重要作用，然而其在单核增生李斯特菌（简称李斯特菌）侵染非洲绿猴肾细胞（Vero）中是否被激活尚未见报道。对李斯特菌刺激下的Vero细胞内PLD的活性变化进行了初步研究。以李斯特菌、佛波醇PMA分别刺激正常细胞及高效表达PLD2-K758R功能缺陷蛋白腺病毒预感染的Vero细胞，研究Vero细胞内PLD...

冠突散囊菌黑茶发酵液对消化酶活性影响的研究

关键词: 冠突散囊菌  黑茶发酵液  淀粉酶  蛋白酶  脂肪酶  酶活  

在模拟人体胃肠环境中研究不同发酵时期的冠突散囊菌黑茶发酵液对淀粉酶、脂肪酶和蛋白酶活性的影响。结果表明冠突散囊菌黑茶发酵液能显著提高α-淀粉酶、蛋白酶活力，并有效抑制脂肪酶活力。冠突散囊菌发酵液利于淀粉、蛋白质消化吸收，抑制脂肪分解吸收，为解释茯砖茶的保健功能提供了理论依据。

论文中计量单位的表示方法

一株分离于酸性矿坑水的异养菌的特性与分子鉴定

关键词: 嗜酸  耐碱  金属抗性  序列分析  

采用平板划线分离法，从江西某铜矿酸性矿坑水中分离出一株极端嗜酸、又能耐受中度碱性条件的异养微生物，命名为HJM菌株。该菌株能在pH1．5～10．0的范围内生长。形态学以及18SrDNA和26SrDNAD1／D2区序列分析表明，HJM菌株属于P．guilliermondii这个种。金属抗性试验表明，该菌株对重金属铜离子的抗性可高达45mmol／L，因此，它的分离为研究极...

精编细胞生物学实验指南

便于抗性基因分离和分子重组的系列质粒的构建

关键词: 选择性标记  抗性基因  分离  

在分子克隆实验中，选择性标记特别是抗生素抗性标记是最常用和不可或缺的分子材料。为便于实验室获得和使用携带有不同末端序列的选择性标记，以质粒pBlueScrlpt SK（-）为基础，构建了分别携带有卡那霉素、博莱霉素、红霉素、潮霉素和庆大霉素等抗性基因的系列质粒pSKsymKm、pSKsymBle、pSKsymEry、pSKsymHyg和pSKsymGm。通过限制性酶切和胶回...

L-乳酸发酵的代谢调控育种及发酵影响因素的研究

关键词: 育种  优化  温度控制策略  

以嗜热乳杆菌（Lactobacillus Thermophilus ATCC8317）为出发菌，采用乙酸-乙酸钠平板为初筛方法，通过复合诱变乳酸产量提高到原来的3．1倍。培养基碳源为玉米粉糖化液，混合氮源为麦芽粉30g／L、蛋白胨5g／L。根据不同温度下细胞比生长速率及产物比生成速率的变化，确定了分阶段控制温度的策略：即在发酵前16h控制温度48qc、后44h控制温度54...

论文中阿拉伯数字的使用

合成乙醇重组乳杆菌的研究

关键词: 乳杆菌  乙醇  

将含有Zymomonas mobilis乙醇合成途径的关键酶基因的片段Ptac-pdc和Ptac-adhB，分别，同时接入pHY300PLK以及pBBR1MCS-5载体中，得到了pHY—PA、pBBR—PA等重组质粒，分别转化入几株乳杆菌。在42℃下进行乙醇发酵试验，结果表明：在Lactobacillus plantanum CICIMB0080中同时引入基因pdc、adhB有效地将碳代谢流导向了产乙醇方向，重组菌B0080（...

精编蛋白质科学实验指南

应用16S rDNA克隆文库法分析有机物料腐熟菌剂细菌组成

关键词: 有机物料腐熟菌剂  16s  rdna克隆文库法  细菌组成  

应用16S rDNA克隆文库法对有机物料腐熟菌剂A和B样品中的细菌组成进行分析研究。结果表明，样品A有14个OTU，主要是融合乳杆菌（Weissella confusa）、枯草芽孢杆菌（Bacillus subtilis）和短小芽孢杆菌（Bacillus pumilus），其比例分别占总克隆文库的28．6％、30．4％和23．2％；样品B有43个OTU，主要是布氏乳杆菌（Lactobacillus buchneri）...

转基因棉花根际土壤DNA的提取方法研究

关键词: 转基因棉花  根际土壤微生物  rflp  

采用直接裂解方式，通过玻璃珠、溶菌酶和SDS共同作用直接从转基因棉花SGK321和中棉所41的根际土壤中提取微生物DNA。结果表明，该方法能从两种转基因棉花根际土壤中提取到20kb大小的完整的DN段。所得DNA完全适用于PCR扩增和酶切的要求。

鸭跖草叶点霉粗毒素的提取方法和产毒条件的研究

关键词: 鸭跖草叶点霉  毒素  提取  产毒条件  

以石油醚、乙酸乙酯、四氯化碳三种极性不同的溶剂对鸭跖草叶点霉病原菌的菌丝和培养液进行萃取，获取粗毒素。结果表明，叶点霉菌产生的毒素既有胞外毒素，又有胞内毒素，且用极性中等的乙酸乙酯萃取效果最好。大豆培养基和PSK分别是适合菌株生长和毒素分泌的固体培养基和液体培养基。确定有利于叶点霉产毒的温度为32℃、培养时间为14d、培养方...