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细胞与分子免疫学杂志

杂志介绍

细胞与分子免疫学杂志是由中国免疫学会;第四军医大学主管,中国免疫学会;第四军医大学主办的一本北大期刊。

细胞与分子免疫学杂志创刊于1985,发行周期为月刊,杂志类别为医学类。

  • 人CD133基因转染细胞株的建立及其生物学功能的初步研究

    关键词: cd133  基因转染  肿瘤干细胞  t细胞  

    目的:构建人干细胞标记分子CD133-2转基因细胞并探讨CD133-2分子的生物学功能。方法:利用分段克隆和重叠PCR方法从人胎肝cDNA文库中克隆出人CD133-2全长基因,经双酶切后装入真核表达载体p IRES2-EGFP中,用脂质体法转染L929细胞,加入G418选择性培养基进行筛选。经RT-PCR、Western blot、流式细胞术(FCM)等方法鉴定转基因细胞;MTT法分析转基因...

  • 转录因子JunB在肝癌细胞中的表达、定位及其转录作用研究

    关键词: junb  转录调控  肝癌细胞  vegf  

    目的:构建表达转录因子JunB的真核表达质粒,观察外源JunB分子在细胞中的表达、亚细胞定位及其对下游分子的转录调控作用。方法:采用PCR方法从人源肝cDNA文库中扩增JunB基因片段,克隆入T载体进行测序鉴定。而后将测序正确的基因片段分别亚克隆入pcDNA3.1(-)和pEGFP-C3真核表达载体中,获得重组载体pcDNA-JunB和pEGFP-JunB。采用脂质体瞬时转染...

  • 诱导型一氧化氮合酶对大鼠胰岛细胞凋亡的影响

    关键词: 胰岛移植  凋亡  诱导型一氧化氮合酶  氨基胍  

    目的:探讨细胞因子和诱导型一氧化氮合酶(iN-OS)对体外培养的大鼠胰岛细胞凋亡和功能的影响及其机制。方法:大鼠胰岛细胞体外培养,随机分组,培养液中分别加入细胞因子IL-1β、TNF-α和/或iNOS抑制剂氨基胍,分为空白对照组、细胞因子组、氨基胍组、氨基胍+细胞因子组。检测指标包括:培养液NO水平和组织iNOS、结构型NOS活性,RT-PCR检测胰岛组...

  • 负向调节树突状细胞对心脏移植大鼠调节性T细胞的影响

    关键词: 树突状细胞  puva  心脏移植  调节性t细胞  大鼠  

    目的:探讨受者树突状细胞(DC)与体外光化学法(PUVA)处理的供者脾淋巴细胞共培养,对心脏移植受者CD4^+CD25^+调节性T细胞(Treg)及移植心存活时间的影响。方法:以DA大鼠为供者,Lewis大鼠为受者,SD大鼠为无关供者,建立大鼠腹部异位心脏移植模型。分离正常的供者脾淋巴细胞(SP),制备经PUVA处理的供者脾淋巴细胞(PU-VA-SP)。在体外将DA...

  • 9型重组腺相关病毒转染体外培养大鼠心肌细胞的影响

    关键词: 9型重组腺相关病毒  增强型绿色荧光蛋白  心肌细胞  转染  

    目的:研究含增强型绿色荧光蛋白(EGFP)基因的9型重组腺相关病毒(rAAV9)对大鼠心肌H9C2细胞的转染及对细胞生长的影响。方法:rAAV9-EGFP按转染复数(MOI)1×10^5、1×10^6、1×10^7转染H9C2细胞,转染后在倒置荧光显微镜下观察H9C2细胞中EGFP阳性表达情况,采用流式细胞仪检测rAAV9-EGFP对H9C2细胞的转染效率。观察转染后细胞生长形态,并用Alam...

  • 卵巢癌细胞IL-6、IL-8分泌与他莫西芬敏感性及MAPK、Akt活性和ER特异性位点磷酸化水平的关系

    关键词: 卵巢癌细胞  他莫西芬  mapk  akt  er  

    目的:分析比较4种常见的人上皮性卵巢癌细胞系(A2780、CAOV-3、SKOV-3和ES-2)IL-6、IL-8分泌与他莫西芬(TAM)敏感性及MAPK、Akt活性和雌激素受体(ER)特异性位点磷酸化水平的关系,探讨IL-6、IL-8诱导卵巢癌细胞对内分泌治疗产生耐药的机制。方法:RT-PCR及ELISA法检测IL-6、IL-8的表达,MTT法分析卵巢癌细胞对TAM的敏感性,免疫印迹法测定MA...

  • p57与细胞膜上胆固醇的相关性分析

    关键词: p57  胆固醇  脂筏  

    目的:检测生理状况下p57蛋白与细胞膜上的胆固醇之间的相关性。方法:使用不同工作浓度的mβCD抽提U937细胞膜上的胆固醇,再利用超速离心分离细胞膜组分,并利用Western blot技术检测细胞膜上p57蛋白含量的变化。利用非连续蔗糖密度梯度离心制备脂筏,并利用Western blot技术检测脂筏上的p57蛋白含量。结果:在mβCD降低细胞膜上胆固醇含量之后,p57...

  • HBV截短core基因融合preS1基因在BCG中的表达及其免疫应答

    关键词: 乙型肝炎病毒  细胞毒性t细胞  bcg  抗体  

    目的:探讨HBV相关抗原在卡介苗(BCG)中的有效表达及其刺激产生的体液和细胞免疫应答效果。方法:将带有HBV截短C基因和preS1基因片段的穿梭载体转化BCG菌株,筛选重组菌,SDS-PAGE和Western blot实验分析其抗原表达特性;分别以生理盐水、BCG、BCG-pDE22、BCG-pDE22-CS1皮下注射BALB/c小鼠,进行连续抗体测定和细胞毒性T细胞杀伤实验。结果:与对...

  • 转录因子T-bet和Eomes对不同亚类人T细胞产生IFN-γ的调控作用

    关键词: sirna  淋巴细胞  

    目的:探讨转录因子T-bet和Eomes对不同亚类人T细胞产生IFN-γ的调控作用。方法:化学合成针对人T-bet和Eomes基因的小干扰RNA(siRNA),转染体外培养的CD3单克隆抗体(mAb)活化的αβT细胞和Mtb-Ag活化的γδT细胞,利用流式细胞仪分选纯化CD4^+、CD8^+T细胞和γδT细胞,半定量RT-PCR检测CD4^+、CD8^+T淋巴细胞中T-bet和EomesmRNA的表达变化,流式...

  • N-乙酰半胱氨酸抑制IL-18在血管平滑肌细胞中诱导TNF-α和IL-6表达

    关键词: 白细胞介素6  白细胞介素18  血管平滑肌细胞  

    目的:研究N-乙酰半胱氨酸(NAC)对白细胞介素18(IL-18)诱导血管平滑肌细胞(VSMC)中肿瘤坏死因子α(TNF-α)及白细胞介素6(IL-6)表达的影响。方法:培养的VSMC细胞,加入或不加入NAC(5mmol/L)处理1h后,再以不同浓度的IL-18刺激不同时间,通过ELISA测定培养上清IL-6及TNF-α蛋白质水平,加入IL-18(100μg/L)6h后RT-PCR分析细胞中相应的mRNA...

  • 人乳头瘤病毒重组蛋白疫苗的计算机辅助设计及真核表达

    关键词: 人乳头瘤病毒  重组蛋白疫苗  计算机辅助设计  真核表达  

    目的:设计并表达预防16型人乳头瘤病毒感染的重组蛋白疫苗。方法:选取HPV16型病毒L1蛋白上的B表位和T表位,将其连接组合成多种方式,利用计算机预测蛋白质的三维结构,选取其中最优的结构进行基因克隆构建,并利用杆状昆虫系统进行表达。结果:利用计算机设计出了一种重组蛋白,成功构建了该重组蛋白的结构基因,并在杆状昆虫表达系统中得到表达。...

  • 人细胞角蛋白8(CK8)基因的克隆及其在大肠杆菌中的表达

    关键词: 人细胞角蛋白8ck8  基因克隆  原核表达  

    目的:克隆人细胞角蛋白8(CK8)基因cDNA并在大肠杆菌中表达CK8蛋白产物。方法:运用DNA重组技术,设计CK8基因特异引物,采用反转录聚合酶链反应(RT-PCR)技术从人肝细胞癌7721细胞中扩增CK8编码区cDNA,将其插入克隆载体pMD18-T simple vector中,获得重组质粒pMD18-CK8,转化感受态大肠杆菌DH5α。继而采用PCR技术从重组质粒pMD18-CK8中扩增出约1...

  • HIV-1 Nef通过Erk/Mapk途径调节内皮细胞黏附分子ICAM-1的表达

    关键词: nef  血管内皮细胞  信号转导  

    目的:研究HIV-1Nef基因对内皮细胞ECV304细胞ICAM-1表达的影响及其信号途径。方法:选用Nef基因稳定表达细胞株ECV304-Nef和对照细胞株ECV304pcDNA3.1(+),应用Westernblot分析ECV304-Nef细胞ERK的磷酸化水平,利用ERK磷酸化抑制剂通过Westernblot、流式细胞术分析ECV304-Nef细胞ICAM-1的表达水平与信号分子ERK磷酸化的相关性。结果:Westernb...

  • 介导可溶性MHCⅠ产生的去整合素金属蛋白酶初步筛选研究

    关键词: 主要组织相容性复合体  去整合素金属蛋白酶  

    目的:以HEK293细胞为研究模型,筛选介导可溶性MHCⅠ产生的去整合素金属蛋白酶。方法:将ADAM8、ADAM10、ADAM15和ADAM17cDNA分别克隆入pcDNA3.1/V5载体,并用TransIT-LT1转染试剂将构建好的载体转染入HEK293细胞,用潮霉素B筛选ADAMs蛋白稳定表达克隆;用SDS-PAGE、免疫印迹结合化学发光法检测ADAMs在HEK293细胞中的表达;用细胞表面生物素标记、免...

  • 抗AGR2单克隆抗体的制备、鉴定及初步应用

    关键词: agr2  单克隆抗体  肿瘤诊断  治疗性抗体  

    目的:制备鼠抗AGR2单克隆抗体(mAb)并对其特性进行鉴定及其初步应用研究。方法:以AGR2-MBP融合蛋白免疫BALB/c小鼠,采用杂交瘤技术制备鼠抗AGR2的mAb,并用Protein-G亲和层析法纯化mAb。用间接ELISA法测定mAb的效价,以Western blot鉴定mAb的特异性。用免疫荧光、免疫沉淀和MTT法对mAb进行初步应用研究。结果:获得1株可持续、稳定分泌抗AGR2...

  • 脑钠肽单克隆抗体的制备及临床应用研究

    关键词: 脑钠肽  单克隆抗体  心衰  elisa  

    目的:制备抗脑钠肽(BNP32)单克隆抗体(mAb),并利用双抗体夹心ELISA法建立BNP抗原检测技术,应用于临床心脏患者脑钠肽水平的检测。方法:以基因工程原核重组表达BNP抗原免疫BALB/c小鼠,利用常规杂交瘤技术制备mAb,mAb经纯化和HRP标记后,利用双抗体夹心ELISA法筛选检测BNP32蛋白的最佳配对mAb,以其建立BNP32抗原检测技术,并与临床BNP检测的标...

  • 人细胞核诱导凋亡因子1在大肠杆菌中的表达、纯化及多克隆抗体制备

    关键词: naif1  原核表达  蛋白纯化  多克隆抗体  

    目的:构建人核凋亡诱导因子1(NAIF1)原核表达质粒,在大肠杆菌中表达及纯化NAIF1融合蛋白,制备兔抗NAIF1多克隆抗体,并对其特性进行初步鉴定。方法:PCR法获得人NAIF1序列并将其克隆到原核表达载体pET-32a中,重组表达质粒在大肠杆菌BL21(DE3)中诱导表达蛋白,经变性、Ni+柱亲和纯化、复性后得到纯化的重组人NAIF1蛋白,免疫大耳白兔,制备兔抗...

  • 类风湿关节炎患者血清单核细胞趋化蛋白-1水平及与间质性肺疾病的关系

    关键词: 类风湿关节炎  间质性肺疾病  

    目的:研究单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)在类风湿关节炎(RA)发病中的作用,探讨其与RA继发间质性肺疾病(ILD)的关系及其可能的临床价值。方法:选择RA患者60例,按是否存在ILD,分为单纯RA组30例和RA继发ILD组30例,正常对照组20例,应用ELISA测定各组血清MCP-1水平,比较各组MCP-1水平的差异,同时比较各组中实验室指标IgG、IgA、IgM、α2-球蛋白、...

  • 巨噬细胞衍生趋化因子在MRL/lpr小鼠肾组织中的异常表达

    关键词: 巨噬细胞衍生趋化因子  红斑狼疮  系统性  狼疮性肾炎  

    目的:研究巨噬细胞衍生趋化因子(MDC)在红斑狼疮小鼠狼疮肾炎中的作用。方法:比较MRL/lpr狼疮小鼠和BALB/c小鼠24h尿蛋白,并用逆转录-聚合酶链反应技术(RT-PCR)和免疫组织化学方法检测两组小鼠肾组织MDCmRNA及蛋白表达情况。结果:MRL/lpr小鼠24h尿蛋白高于BALB/c小鼠(P〈0.05);MRL/lpr小鼠肾组织MDCmRNA表达较BALB/c小鼠明显升高(P〈0...

  • sCD38在类风湿关节炎和系统性红斑狼疮患者外周血中的变化及意义

    关键词: 类风湿关节炎  系统性红斑狼疮  cd38  破骨细胞  

    目的:探讨类风湿关节炎(RA)和系统性红斑狼疮(SLE)患者外周血血清中sCD38水平的变化及其在该类疾病发病中的作用。方法:采用ELISA法检测48例RA患者,19例SLE患者和20例正常对照者外周血血清中sCD38水平。结果:RA患者外周血sCD38水平为(163.05±13.97)mg/L,明显高于正常对照组水平(80.59±5.58)mg/L,统计学分析有差异(P〈0.05)。特别是...

  • 化疗加手术对非小细胞肺癌患者的疗效及血清内皮抑素水平的影响

    关键词: 非小细胞肺癌  化疗  手术  疗效  内皮抑制素  

    目的:探讨化疗与手术对非小细胞肺癌患者的疗效及血清内皮抑素水平的影响。方法:选择2008-03/09我院收治的非小细胞肺癌患者92例,随机将患者分为治疗组和对照组,每组46例。治疗组采用长春地辛-异环磷酰胺-顺铂(VIP)方案化疗配合手术进行治疗,对照组则只单纯进行手术治疗。结果:与对照组相比,治疗组的完全缓解和有效比率显著升高,肿瘤进展的...

  • 稳定表达水通道蛋白-4 HEK293细胞株的建立及应用

    关键词: aqp4  hek293细胞  间接免疫荧光法  视神经脊髓炎  

    目的:建立稳定表达水通道蛋白-4(AQP4)的HEK293细胞株,并以其检测12例视神经脊髓炎患者血清中是否存在AQP4抗体。方法:从颞叶癫痫患者脑组织提取总RNA,RT-PCR扩增AQP4的cDNA,构建AQP4-绿色荧光蛋白(GFP)融合表达重组体pEGFP-N1-AQP4,转染HEK293细胞,抗生素筛选联合流式细胞仪分选筛选稳定表达细胞株,RT-PCR和间接免疫荧光法鉴定AQP4的表达...

  • MMP-9、VEGF、P16与垂体瘤侵袭性的相关性研究

    关键词: 侵袭性垂体腺瘤  血管内皮生长因子  多肿瘤抑制基因1  

    目的:检测MMP-9、VEGF和P16在侵袭性和非侵袭性垂体腺瘤中的表达变化,探讨它们与垂体瘤侵袭性相关性。方法:选用垂体瘤54例,分为侵袭组(n=30)和非侵袭组(n=24),应用免疫组化法检测标本中MMP-9、P16基因与VEGF的表达,分析它们与侵袭性和非侵袭性垂体瘤的相关性。结果:MMP-9、VEGF标记指数在侵袭性垂体瘤组的分别为(39.44±5.61),(24.28±...

  • 改变PTEN基因表达影响支气管平滑肌细胞增殖

    关键词: 腺病毒载体  rna干扰  pten  支气管平滑肌细胞  细胞增殖  akt  

    目的:通过基因过表达和RNA干扰(RNAi)技术改变PTEN基因的表达并观察其对人支气管平滑肌细胞(BSMC)增殖和相关信号通路的影响。方法:利用携带野生型PTEN基因的重组腺病毒(Ad-GFP-PTEN)和针对PTEN基因的腺病毒短发夹状RNA(shRNA)载体(Ad-GFP-shRNA-PTEN),转染BSMC细胞,建立PTEN基因过表达细胞模型Ad-GFP-PTEN-BSMC和PTEN基因沉默细胞...

  • 大鼠面神经完全切断后面神经核内OMgp的表达

    关键词: 面神经  神经损伤  omgp  神经再生  

    目的:通过建立大鼠面神经完全切断损伤模型,观察面神经损伤后脑干内OMgp表达的变化。方法:对36只大鼠分别行左侧面神经茎乳孔切断术,于术后1、3、5、7、14、21d取大鼠脑干含面神经核团部分,应用免疫组织化学方法检测面神经核中OMgp的变化及其对面神经元凋亡的影响。结果:OMgp分布于正常SD大鼠面神经各亚核,面神经损伤后OMgp与假手术对照侧相...

  • CD59配体肽真核表达系统的构建及对PC-3细胞活性的作用研究

    关键词: cd59  配体肽  补体  

    目的:构建CD59分子配体肽sp22基因重组真核表达系统,探讨sp22基因对CD59分子的影响。方法:构建含特异性sp22基因的真核重组表达载体sp-pIRES,脂质体法转染人前列腺癌PC-3细胞,G418筛选建立稳定转染细胞系,RT-PCR检测转染细胞中sp22基因mRNA的表达筛选阳性细胞克隆,Western blot、ELISA竞争抑制试验检测转染细胞CD59蛋白的表达;台盼蓝染色实验...

  • Ana-1巨噬细胞分泌exosomes的提取及免疫鉴定

    关键词: 小囊泡  免疫胶体金  免疫印迹  

    目的:为了证实Ana-1巨噬细胞是否分泌exo-somes。方法:采用分级离心的方法,从Ana-1巨噬细胞培养的上清液提取exosomes。样品用醋酸双氧铀负染,在透射电镜下观察其形态、大小;并分别用Flotillin多克隆抗体、Tsg101单克隆抗体(mAb)、Hsp70mAb和calnexin多克隆抗体,通过免疫印迹法和免疫金标记法进行免疫鉴定。结果:电镜下可以观察到提取的exo...

  • Jagged-1对淋巴细胞生成细胞因子的影响

    关键词: 细胞因子  淋巴细胞  

    目的:探讨可溶性Jagged-1/Fc嵌合蛋白对小鼠淋巴细胞产生细胞因子的影响。方法:不同时间和不同浓度Jagged-1/Fc处理小鼠淋巴细胞,ELISA检测其培养上清中细胞因子的水平,并用Westernblot分析相关蛋白NICD和Del-tex的表达。结果:低浓度Jagged-1/Fc对淋巴细胞生成IL-17无明显影响,但高浓度Jagged-1/Fc(500μg/L)组IL-17的表达量是对照组的64.75...

  • Th22型细胞与炎症性疾病的关系

    关键词: th22型细胞  炎症性疾病  

    Th22型细胞是一种最新发现的辅助性T细胞亚群,表型为CCR6^+CCR4^+CCR10^+,关键转录因子是芳香烃受体(AHR),主要分泌IL-22,通过活化信号传导及转录激活因子3(STAT3)而发挥作用。在类风湿性关节炎、银屑病、异位性皮炎以及Crohn’s病等患者中IL-22均表达升高,而在IL-22^-/-小鼠,胶原诱导的关节炎(CIA)的发病率及发病严重程度均显著下降;...

  • 巨核系造血发育和调控

    关键词: 巨核系造血  巨核细胞  细胞外基质  抑制性受体  

    血小板是血液系统重要的组成部分,机体通过巨核系造血维持血小板数量。血小板在止血、血栓形成、创伤修复、固有免疫应答以及肿瘤转移等过程中发挥重要作用。巨核系造血受造血微环境中的细胞因子、黏附分子和细胞外基质(ECM)等多种因素的复杂调控,这些调控机制的异常可导致多种巨核/血小板谱系相关疾病的发生。近年来巨核系造血研究进展迅速,...

  • miRNA在免疫系统中的研究进展

    关键词: mirna  核苷酸  免疫系统  

    微小RNA(microRNA,miRNA)是一类内源性的长度约22个核苷酸的非编码小分子RNA,能够在转录后水平调节mRNA表达。miRNA在线虫、果蝇、植物、哺乳动物,甚至病毒中广泛存在。miRNA基因以单拷贝、多拷贝或基因簇等多种形式存在于基因组中,而且绝大部分定位于基因间隔区,其转录独立于其他基因。这类小RNA在表达上具有组织和时间的特异性,是调节...

  • 病原菌与宿主细胞中的微丝装配

    关键词: 病原菌  微丝  肌动蛋白  宿主细胞  

    细胞骨架是分布于真核细胞中的由蛋白质纤维组成的网络系统,在细胞内细胞器和生物大分子的运输、细胞的运动和细胞分裂分化都发挥重要的作用。病原菌通常将细胞骨架作为主要的攻击目标,尤其利用微丝做为跳板入侵宿主细胞并进行扩散和繁殖。探索病原菌对微丝的作用有利于深入了解病原菌的致病机制,同时也为研究微丝的组装提供一个理想的模型。

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