关键词：慢性乙型肝炎病毒感染 树突状细胞 

摘要：目的探讨重组人乙型肝炎病毒核心抗原（rhHBcAg）诱导髓源性树突状细胞（mDC）分泌白细胞介素15（IL-15）的机制。方法采用人单核细胞磁珠负分选试剂盒分选外周血单核细胞,采用粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子（GM-CSF）、IL-4和肿瘤坏死因子α（TNF-α）诱导分化为mDC,10μg/m L rhHBcAg刺激mDC 1-6 d;分别用25μmol/L磷脂酰肌醇3激酶/蛋白激酶B（PI3K/Akt）信号通路抑制剂LY294002、1μmol/L p38丝裂原激活蛋白激酶（p38MAPK）信号通路抑制剂SB203580、100 nmol/L c-Jun N末端激酶（JNK）信号通路抑制剂SP600125和150 nmol/L胞外信号调节激酶（ERK）信号通路抑制剂U0126预处理1 h,再给予10μg/m L rhHBcAg刺激48 h。之后收集细胞和细胞培养上清,实时定量PCR检测IL-15 mRNA水平,ELISA检测IL-15蛋白水平,Western blot法检测PI3K/Akt和MAPK信号通路分子磷酸化水平。结果与rhHBcAg未刺激组比较,rhHBcAg刺激组IL-15 mRNA和蛋白水平显著升高;与rhHBcAg刺激组比较,p38抑制剂预处理组IL-15水平明显降低,但PI3K/Akt、JNK和ERK抑制剂预处理组IL-15水平未见显著性改变。结论 rhHBcAg通过p38MAPK信号通路上调外周血mDC IL-15的分泌。

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