关键词：腺病毒载体 骨髓间充质干细胞 

摘要：目的构建表达mIL-18基因的腺病毒载体，并转染大鼠骨髓间充质干细胞（rBMSCs），观察其在rBMSCs中的表达，为脑胶质瘤的基因治疗实验研究奠定基础。方法mIL-18基因亚克隆于穿梭质粒pAdtrackCMV上，构建的pAdtrackCMV—mIL-18线性化后转化已含有腺病毒骨架质粒pAdEasy-1的大肠杆菌BJ5183感受态细胞，挑选同源重组质粒，线性化后HEK293细胞包装，CsCI纯化。体外分离培养大鼠骨髓间充质干细胞，流式细胞仪检测细胞免疫表型；然后转染rBMScs，通过荧光显微镜、RT—PCR、ELISA等方法检测mIL-18表达。结果成功构建了绿色荧光蛋白标记的腺病毒Ad—miL-18，并在rBMSCs中高效表达。结论pAdEasy-1是基因转染的高效系统，腺病毒Ad—mIL-18转染的rBMSCs可以作为脑肿瘤基因治疗研究的种子细胞。

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