关键词:白念珠菌 集落计数 微生物 体外研究 培养基
摘要:目的通过对比观察白色念珠菌(白念珠菌)在LB营养琼脂培养平板上不同浓度的生长情况,探讨白念珠菌平板稀释法计数的适宜观察浓度。方法将白念珠菌原液稀释至约1.5×10^9 cfu/m L,编号为A。然后取7个20 m L的无菌试管,每个试管加入9 m L无菌生理盐水,分别编号为B-H。从A试管中吸取1 m L菌液至B管,混匀后再吸取1 m L至C管,如此连续倍比稀释至H管。用移液枪吸取100μL不同浓度的白念珠菌悬液到对应编号的一次性琼脂培养平板,用接种环涂抹均匀,置于37℃孵箱内培养。结果培养48 h后,浓度数量级为104的白念珠菌较浓度数量级为102、103菌体密集且体积小,而105较104更密集、体积更小,呈针尖状,肉眼不易观察具体形态。白念珠菌浓度数量级为102、103时,真菌数量为20-300个,可以计数,而浓度数量级达104及以上时,则不能计数。分别培养24、48、72 h后取出琼脂培养平板观察,培养24 h后肉眼可观察到菌落,但具体形态不明显;培养48 h后较24 h时体积大,大致形态可看出,呈乳白色圆形或卵圆形,表面光滑湿润,有光泽,直径为1.0-2.0 mm;培养72 h后较培养48 h后体积稍大,但呈现黄色。结论菌液浓度为1.5×10^2cfu/m L时可以作为平板稀释法的适宜计数浓度,培养48 h后为菌落形态观察的最佳时机。
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