猪带绦虫10ku蛋白基因在大肠杆菌中的表达及其初步应用

吴国华 郑亚东 贾万忠 张少华 景志忠 才学鹏 中国农业科学院兰州兽医研究所家畜疫病病原生物学国家重点实验室甘肃省动物寄生虫病重点实验室农业部兽医公共卫生重点开放实验室 兰州730046

关键词:猪带绦虫 10 ku蛋白基因 表达 初步应用 

摘要:将猪带绦虫六钩蚴10ku蛋白(TS010)和囊尾蚴10ku蛋白(CE10)的基因克隆到表达载体中,构建重组表达载体pGEX-4T—TS010和pGEX-4T—CE10,经测序证明基因序列完全正确。重组表达载体转化大肠杆菌后诱导表达,用SDS-PAGE、Western—blot和薄层扫描检测表达产物。表达的目的蛋白纯化后用于血清样品ELISA检测。SDS-PAGE、Western—blot和薄层扫描检测结果表明,六钩蚴和囊尾蚴10ku蛋白基因均能在大肠杆菌中成功表达,表达的融合蛋白的相对分子质量约为35ku,并能被囊虫病人阳性血清所识别,具有反应原性,表达量分别占菌体蛋白总量的25%和30%。ELISA检测结果显示,10ku蛋白可用于囊虫病的诊断。

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