关键词:猪带绦虫 10 ku蛋白基因 表达 初步应用
摘要:将猪带绦虫六钩蚴10ku蛋白(TS010)和囊尾蚴10ku蛋白(CE10)的基因克隆到表达载体中,构建重组表达载体pGEX-4T—TS010和pGEX-4T—CE10,经测序证明基因序列完全正确。重组表达载体转化大肠杆菌后诱导表达,用SDS-PAGE、Western—blot和薄层扫描检测表达产物。表达的目的蛋白纯化后用于血清样品ELISA检测。SDS-PAGE、Western—blot和薄层扫描检测结果表明,六钩蚴和囊尾蚴10ku蛋白基因均能在大肠杆菌中成功表达,表达的融合蛋白的相对分子质量约为35ku,并能被囊虫病人阳性血清所识别,具有反应原性,表达量分别占菌体蛋白总量的25%和30%。ELISA检测结果显示,10ku蛋白可用于囊虫病的诊断。
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