关键词：周期性张应变 高血压 生理性 mirna 外泌体 

摘要：目的血管平滑肌细胞(VSMCs)被证明可以产生外泌体,参与VSMCs之间以及与其他细胞之间的对话。周期性张应变在调控VSMCs的生物学行为方面具有重要意义,但周期性张应变对VSMCs产生外泌体的影响尚不清楚。方法利用Flexcell FX-4000TM Tension系统对大鼠胸主动脉平滑肌细胞施加生理性的周期性张应变(10%,1 Hz)以及模拟高血压的周期性张应变(20%,1 Hz)24 h,收集VSMCs的培养基。低温差速离心法及聚乙二醇沉淀法获取VSMCs源性外泌体。通过透射电镜(TEM)观察外泌体形态及大小,小RNA测序法检测VSMCs在不同的周期性张应变下产生的外泌体携带的miRNAs差异。通过脂质体转染法将miR-155-5p mimics转染到体外培养的大鼠胸主动脉内皮细胞(ECs)。采用硝酸还原酶法检测ECs培养基中的内皮源性一氧化氮(NO)含量。结果 TEM检测VSMCs可产生大量直径40~100 nm的外泌体。VSMCs在模拟高血压的周期性张应变下产生的外泌体和生理性周期性张应变下产生的外泌体具有不同的miRNA表达谱。其中,miR-155-5p在模拟高血压的周期性张应变下产生的VSMCs源性外泌体中高表达。将miR-155-5p mimics转染ECs后NO合成减少。结论内皮源性一氧化氮合酶(eNOS)被报道是miR-155-5p在ECs中的靶标。高血压环境下VSMCs通过外泌体携带miR-155-5p作用于ECs并引起NO合成减少,反过来影响VSMCs的舒张功能,这可能是高血压时内皮依赖性血管舒张受损的重要原因。

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