HPLC法测定云南红豆杉细胞悬浮培养中10-去乙酰基巴卡亭Ⅲ

郭玉婷 张臻 张经硕 王剑文 苏州大学药学院 江苏苏州215123 南京大学生命科学院 江苏南京210093

关键词:云南红豆杉 细胞培养 寡聚半乳糖醛酸 hplc 

摘要:目的测定经寡聚半乳糖醛酸(oligogalacturonic acid,OGA)诱导的云南红豆杉Taxus yunnanensis细胞悬浮培养物中10-去乙酰基巴卡亭Ⅲ(10—deacetyl baccatinⅢ,10-DABⅢ)的量。方法采用不同质量浓度的0GA处理云南红豆杉悬浮培养细胞,通过RP—HPLC法测定细胞和培养液中的10—DABⅢ的量,甲醇-乙腈-水(2:3:8)为流动相,检测波长为232nm。结果10—DABⅢ在0.05~2.06μg与峰面积线性关系良好,回归方程为Y=89.146X+27.067(R^2=0.9996),细胞内、外样品平均回收率分别为94.96%、100.72%,RSD分别为0.44%、0.81%。0GA(40μg/mL)可显著提高云南红豆杉细胞中10—DABⅢ的量。结论10—DABⅢ的RP—HPLC方法可靠简便、重现性好、灵敏度高,具有较高的实用价值,可用于对红豆杉细胞诱导培养研究中的分析,OGA是10—DABⅢ细胞生产的有效诱导子。

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