关键词：中东呼吸综合征冠状病毒 实时荧光定量pcr taqman探针 检测方法 

摘要：目的建立一种快速、敏感、特异的实时荧光定量PCR（Real-time PCR）方法,用于中东呼吸综合征冠状病毒（MERS-CoV）的检测。方法根据中东呼吸综合征冠状病毒S蛋白基因的保守序列设计并合成一对引物及一条特异性TaqMan探针。通过条件优化,以10倍系列稀释重组质粒为标准品,进行Real-time PCR扩增,绘制标准曲线,并进行重复性、准确性、特异性及敏感性检测。结果建立的Real-time PCR方法检测中东呼吸综合征冠状病毒所绘制标准曲线的相关系数〉0.99,灵敏度为1.00×101拷贝,高于常规PCR方法（1.00×102拷贝）;用该方法检测中东呼吸综合征冠状病毒基因为阳性,其他6种对照呼吸道病原体及冠状病毒基因检测均呈阴性;批内、批间重复试验的变异系数均〈1%。结论建立的中东呼吸综合征冠状病毒Real-time PCR检测方法灵敏、特异、重复性好,可用于中东呼吸综合征冠状病毒感染的快速诊断和流行病学调查。

中国病原生物学杂志要求:

{1}作者的真实姓名、工作地址、学术简历和联系方式。

{2}文章请勿一稿多投，审稿周期为一个月，自收到来稿一个月内邮件回复作者，如果一个月内未收到邮件回复，作者可自行处理稿件。

{3}图、表和公式应通篇顺序编号，图题、表题应有中英文对照。表格应采用三线表形式，内容以中文表述。具体要求请在本刊网站下载《撰文书写要求》。

{4}稿件注释一律采用 “脚注”。注释规则请参下附《注释规范》，请投稿者严格遵循。

{5}前言：主要概述本文的立题依据、研究思路、实验基础及国内外现状，并应明确说明本文研究目的、创新性或特点等。

注：因版权方要求，不能公开全文，如需全文，请咨询杂志社