MALDI和ESI质谱鉴定肿瘤相关糖蛋白的N-糖链结构

白雪 管玉东 李菲 迟连利 山东大学国家糖工程技术研究中心 济南250100

关键词:分析化学 人绒毛膜促性腺激素 基质辅助激光解吸电离 电喷雾电离 质谱 

摘要:N-糖基化是一种与疾病密切相关的蛋白翻译后修饰.为了建立糖蛋白的N-糖链结构分析方法,以唾液酸糖肽(SGP)为模式分子进行方法优化,再以人绒毛膜促性腺激素(hCG)为对象,经变性处理后用PNGase F酶解释放N-糖链,将酶解液用多孔石墨化碳小柱进行固相萃取,经纯化富集得到N-糖链后,再分别采用基质辅助激光解吸电离(matrix-assisted laser description ionization,MALDI)和电喷雾电离(electrospray ionization,ESI)两种方式对hCG的N-糖链进行结构分析.结果表明,经过质谱分析共鉴定到17种N-糖链,其中二天线的7种,三天线的5种,四天线的5种.在众多糖型中二天线糖链含量最多.MALDIMS主要得到单电荷峰,ESI-MS以带2个电荷的为主.利用MALDI-MS和ESI-MS技术可快速分析蛋白的N-糖链的结构,为进一步寻找肿瘤糖链标志物及肿瘤的早期预防诊断提供技术支持.

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