溶瘤腺病毒介导的IL-18在黑素瘤A375细胞中的表达

杨春华 刘彦群 魏志平 毛立军 裴东生 史震 郑骏年 徐州医学院附属医院皮肤性病科 江苏徐州221000 徐州医学院附属医院肿瘤学重点实验室 江苏徐州221000

关键词:溶瘤腺病毒 黑素瘤 

摘要:目的构建携带人IL-18基因的溶瘤腺病毒,观察在A375细胞中IL-18基因的表达情况。方法将pZD55-IL-18与含有腺病毒右臂的质粒pBHGE3共转染293细胞获得重组腺病毒。PCR鉴定条件增殖腺病毒ZD55-IL-18。以ZD55-IL-18感染人黑素瘤A375细胞系,通过逆转录-聚合酶链反应(RT—PCR)检测IL-18基因mRNA的表达;Westernblot法检测腺病毒E1A的表达情况;结晶紫染色法检测细胞杀伤作用;MTT法检测细胞存活情况。结果PCR鉴定表明ZD55-IL-18构建成功;RT—PCR和Westernblot结果表明,ZD55-IL-18能高效介导IL-18基因在A375细胞中的表达,并在肿瘤细胞内表达E1A;结晶紫染色和MTT结果表明,ZD55-IL-18对A375细胞有明显的杀伤作用。结论构建成功的溶瘤腺病毒ZD55-IL-18,可在A375细胞中高效表达IL-18基因,并能抑制黑素瘤细胞生长。

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