中国生物工程杂志

FGF-1及其突变体的研究进展

关键词: 酸性成纤维细胞生长因子  增殖  突变  信号转导  突变体  生物学效应  血细胞生成  生物学功能  器官发育  血管发生  

酸性成纤维细胞生长因子(acid fibroblast growth factor,FGF-1)是成纤维细胞生长因子家族重要的成员之一.来源于三个胚层的细胞都能够表达FGF-1,其生物学效应非常广泛,在组织和器官发育、血管发生、血细胞生成、肿瘤发生和伤口愈合等方面发挥着重要作用.FGF-1不但可以在细胞外通过胞内信号通路而且也可以进入细胞内部发挥生物学功能.主要综述FG...

间充质干细胞诱导分化为胰岛β细胞的研究进展

关键词: 胰岛移植  间充质干细胞  分化  诱导分化  多向分化潜能  成体干细胞  生物学性状  中胚层  排斥反应  

间充质干细胞是一类具有多向分化潜能的成体干细胞,在体内外不仅可以被诱导分化为中胚层细胞,而且可以分化为内胚层和神经外胚层细胞.间充质干细胞易分离,体外可大量扩增,异体移植不引起免疫排斥反应,在细胞治疗和组织工程中具有广阔的应用前景.经过适当诱导,间充质干细胞可能成为胰岛β细胞的来源之一.就间充质干细胞的生物学性状和优势,以及诱...

新型疫苗佐剂的研究进展

关键词: 疫苗  新型佐剂  临床试验  疫苗佐剂  细胞免疫应答  免疫佐剂  dna疫苗  免疫原性  多肽组成  化学合成  

与传统的灭活或活体疫苗相比,由基因工程重组抗原或化学合成多肽组成的现代疫苗往往存在免疫原性弱等问题,需要新型的免疫佐剂来增强其作用.尽管传统的铝盐佐剂是目前唯一全球公认的人用佐剂,但存在激发细胞免疫应答能力差等不足,因此,需要研发更为安全有效的人用新型佐剂,尤其是安全无毒、能够刺激较强细胞免疫应答的佐剂,以及适合粘膜疫苗、DN...

转基因动物应用的研究现状与发展前景

关键词: 转基因动物  生物医药  农业  生物材料  环保  发展前景  现状  应用  产业化  

转基因动物的迅速发展使医药、农业、环保、生物材料等领域发生了巨大变革.综述了国际和国内转基因动物在这些领域中的研究历史、现状和产业化进展,同时也预测了转基因动物应用的发展前景以及给社会带来的深远影响.

植物耐盐相关基因克隆与转化研究进展

关键词: 盐害  耐盐机理  基因克隆  转基因  基因植物  转化  耐盐相关基因  农作物产量  耐盐性状  复杂性  

土地盐渍化是农作物产量降低的一个重要因素.从盐分对植物的伤害、植物耐盐的机理、耐盐相关基因的克隆及转耐盐基因植物等方面论述了植物的耐盐机理及转耐盐基因植物的研究现状,分析了耐盐性状的复杂性,并对前景进行了展望.

芸薹属植物基因组学研究进展

关键词: 芸薹属  拟南芥  基因组学  表达序列标签  植物基因组学  芸薹属作物  十字花科植物  功能基因组学  全基因组测序  比较基因组学  

芸薹属是十字花科植物300多个属中最为重要的一个属,是我国栽培面积最大的蔬菜作物.拟南芥和芸薹属在十字花科中两者的亲缘关系最近,通过它们之间的比较作图,两者之间的共线性被大量发现.模式植物拟南芥全基因组测序已经完成,这为芸薹属作物的基因组研究提供了便利条件.芸薹属作物的功能基因组学能够进一步明确不同发育时期基因的功能,为解释芸...

微生物产生的土腥味化合物及其清除方法

关键词: 土腥味化合物  放线菌  蓝细菌  藻类  净化方法  清除方法  化合物  微生物  腥味  生物合成途径  

自然界中存在许多具有土腥味的化合物,以Geosmin和MIB为代表,它们的嗅阈值极低,即便含量极微,也能嗅到浓烈的土腥味、土臭味、泥土味和霉味.这些土腥味挥发性物质主要是放线菌和藻类的次生代谢产物,不同生物具有不同的合成途径.它们极易影响饮用水的品质,也给渔业和食品业带来极大危害.通过物理、化学和生物处理等方法,可以控制或清除土腥味化合...

人apoA-I分泌型表达调控细胞模型构建

关键词: 增强型绿色荧光蛋白  人肝癌细胞hepg2  稳定转染克隆  hepg2细胞  表达调控  分泌型  模型构建  表达质粒  

分别从pMD18-T质粒和人基因组DNA扩增出人apoA-I CDS区序列和apoA-I启动子(702bp片段),与pEGFP-N1重组,构成受apoA-I启动子调控的pEGFP-N1质粒和融合蛋白表达质粒,分别转染人肝癌HepG2细胞,以绿色荧光为标志筛选稳定转染系列克隆.用RT-PCR、荧光显微镜、免疫荧光术等鉴定其中一个克隆融合蛋白的表达;分别以胰岛素和葡萄糖刺激物鉴定该克隆的外源...

利用Red系统快速改构含鼠β-酪蛋白基因的细菌人工染色体

关键词: 细菌人工染色体  red重组系统  flp  southern  同源重组  bac克隆  鼠  同源序列  

采用Red系统介导的同源重组方法对含有鼠β-酪蛋白基因的RPCI23-440C1 BAC进行快速改构.首先通过PCR方法,获得两端带有鼠β-酪蛋白基因同源序列的tPAm-Zeo同源重组片段,然后将此同源重组片段电击转化至已含有编码Red重组酶质粒的RPCI23-440C1 BAC菌中,在λRed重组系统的帮助下,通过同源重组片段两端与RPCI23-440C1中β-酪蛋白同源的序列在菌体内与β-...

科学出版社新书推介

转基因枸杞表达HIV-1壳体蛋白病毒样颗粒疫苗表达载体的构建

关键词: 病毒样颗粒  分泌型表达载体  转基因  蛋白质  构建  人免疫缺陷病毒  核苷酸序列  

利用PCR技术扩增出人免疫缺陷病毒HIV-1 MA4-CA融合基因,将其克隆到pGEM-T载体中,测定其核苷酸序列,并推导其氨基酸序列.该基因全长为450bp,与已发表的HIV-1的全序列基因(AF324493)完全同源,编码一个含150个氨基酸残基的蛋白质.将该基因与分泌型表达载体pCAMBIA1305.2连接,同时将水稻中富含甘氨酸蛋白的信号肽序列(GRP)引入MA4-CA融合基因,构建...

重组人FS315 C末端蛋白表达及其抗体制备

关键词: fs315  gst融合蛋白  抗体  抗体制备  蛋白表达  重组人  免疫组化染色  western  原核表达载体  

构建FS315C末端肽原核表达载体pGEX-FS315C,表达重组人卵泡抑素315(FS315)C末端肽,制备抗FS315C末端抗体.实验结果显示,重组pGEX-FS315C表达质粒在E.coli BL21中高表达GST-FS315C融合蛋白,采用亲和层析与电泳纯化GST-FS315C免疫家兔,获得抗FS315C末端抗体,Westerr blot检测显示该抗体只与FS315结合,而与FS288无交叉反应.ELISA检测显示抗FS315C末...

化学工业出版社新书推介

高GC含量的鳜鱼rRNA基因家族的克隆

关键词: rrna基因  基因克隆  高gc含量  重复序列  鳜鱼  rrna基因序列  gc含量  克隆  基因家族  dna聚合酶  

动物rRNA基因是一种GC含量较高、结构复杂的重复序列.该研究结合亲缘生物法生物信息学技术,经反复摸索后选用LA PCR法即LA PCR Taq酶结合GC缓冲液来扩增鳜鱼复杂的rRNA基因重复序列,经测序鉴定最终克隆了鳜鱼的3个rRNA基因及其2个间隔序列.分析了鳜鱼与相关动物的rRNA基因序列的同源性和进化关系.探索了克隆复杂DNA序列时引物设计的特别规则、反...

用抑制性差减杂交构建新疆Kaposi肉瘤差异表达基因文库

关键词: kaposi肉瘤  抑制性差减杂交  差异基因  基因克隆  差异表达基因  基因文库  肉瘤  构建  皮肤组织  pcr扩增  

目的:分离卡波氏肉瘤(Kaposi's sarcoma,KS)差异表达基因,并建立相应的cDNA文库,为从分子水平揭示KS发病机制打下良好基础.方法:采集KS肉瘤及来源于同一患者的正常皮肤组织,抽提总RNA,逆转录酶合成dscDNA,经Rsa I酶切,与2种不同的接头衔接,分别以正常组织和肿瘤组织作为tester和driver,进行双向抑制性差减杂交(suppression subtractive hybridiz...

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产腈水合酶重组大肠杆菌的质粒稳定性研究

关键词: 腈水合酶  重组大肠杆茵  质粒稳定性  分离不稳定性  质粒拷贝数  重组大肠杆菌  稳定性研究  琼脂糖凝胶电泳  重组菌株  

成功构建了腈水合酶(nitrile hydratase,NHase)高表达的重组大肠杆菌E.coli BL21(DE3)/pETNHM(Kanr),研究了重组质粒pETNHM在重组菌株中的质粒稳定性.结果表明,pETNHM具有较好的结构稳定性,连续传代60代后质粒的基因序列没有明显缺失,且能够正常表达腈水合酶.pETNHM具有分离不稳定性,在无抗生素选择压力下,连续传代48代后质粒丢失的无质粒细胞开...

微生物絮凝剂产生菌的筛选、鉴定及其培养条件的优化研究

关键词: 微生物絮凝剂  絮凝微生物  16srdna序列  培养条件  正交试验  微生物絮凝剂产生菌  比较鉴定  优化研究  pseudomonas  筛选  

采用常规细菌分离方法从土壤中筛选出一株高效絮凝剂产生菌,编号为B6.经过形态学特征、生理生化反应及16S rDNA序列(GenBank accession No.DQ115363)同源性比较鉴定该菌株为恶臭假单胞菌,命名为Pseudomonas putida B6.对其培养基进行研究,确定其最佳的碳源和氮源,并通过正交试验确定其最佳的培养基成分配比(ρ/gL-1)为葡萄糖15、果糖3、KH2PO4 1....

人基质金属蛋白酶-2 C端片段PEX的高效表达及活性研究

关键词: pex  补料分批培养  包涵体  活性研究  高效表达  c端片段  包涵体蛋白  s180肉瘤  血管生成  

将人的PEX基因克隆到表达载体pET-15b上,构建重组工程菌BL21(DE3)/pETPEX.采用5L发酵罐补料分批培养,当菌体密度增长到OD600为35时,用IPTG诱导,PEX蛋白形成包涵体,最终OD600达到90,PEX的表达水平达2.2 g/L.包涵体蛋白经过纯化、复性后,获得生物活性.PEX能够有效抑制HUVECs的增殖,加药96h后,20nmol/L PEX对HUVECs生长有77.9%的抑制率;PEX能阻断bF...

用去掉免疫球蛋白IgG的腹水提高体外培养的单克隆抗体产量

关键词: 腹水  细胞培养  单克隆抗体生产  无血清培养基  单克隆抗体  免疫球蛋白  产量高  igg  体外培养  水提  

发展了一种在实验室大幅度提高抗体产量的方法,即采用添加2%的去免疫球蛋白IgG的腹水于无血清培养基中的方法,培养杂交瘤细胞,获得了高达3.55×10 6/ml的细胞密度,纯化后获得了135μg/ml的单克隆抗体产量,比通常的用无血清培养的单位体积培养液抗体产量高4倍.对于体外生产单克隆抗体而言,这种方法经济并且易于推广,它的成功是抗体产量提高的一个巨...

gAd重组质粒的构建及其在大肠杆菌中的表达

关键词: 脂联素球状结构域  包涵体  基因工程  大肠杆菌  重组质粒  gad  基因组dna  聚丙烯酰胺凝胶  构建  

为了建立人脂联素球状结构域(gAd)原核高效表达体系,分离纯化gAd并检测其生物活性,从淋巴细胞中提取人基因组DNA,PCR扩增出含有脂联素编码序列的片段,通过T-A克隆的方法克隆入pMD18-T载体中,然后设计适当的引物引入起始密码、终止密码以及相应的酶切位点,把脂联素球状结构域(gAd)基因亚克隆到表达载体pBV220,将序列鉴定正确的重组质粒转化入大肠...

突变人CD59分子真核表达体系的构建和功能的初步研究

关键词: 人cd59  基因定点突变  cho细胞  真核表达  真核表达体系  cd59  突变基因  分子量  构建  中国仓鼠卵巢细胞  

构建突变人CD59分子(HMCD59)真核表达体系,探讨HMCD59糖基化前后抗补体活性的变化.采用重组PCR定点诱变技术在CD59易于糖基化的位点构建CD59突变基因,克隆入真核表达质粒pALTER-MAX.利用阳离子脂质体将重组质粒和pcDNA3共转染中国仓鼠卵巢细胞(CHO).G418压力筛选稳定转染细胞克隆,检测筛选HMCD59蛋白高表达株.免疫印迹技术(Western blot)检测出H...

代谢工程酵母菌合成紫杉烯的研究

关键词: 酿酒酵母  羟甲基戊二酰coa还原酶  ggdp合酶  紫杉烯合酶  紫杉烯  生物合成  代谢工程  紫杉醇  酵母菌  融合表达载体  

紫杉烯是紫杉醇生物合成的重要中间体,为在酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)中建立一个生物合成紫杉烯的代谢途径,克隆了酵母的羟甲基戊二酰CoA(3-hydroxy-3-methylglutaryl coenzyme A,HMG-CoA)还原酶基因和牻牛儿基牻牛儿基二磷酸(geranylgeranyl diphosphate,GGDP)合酶基因,并构建了其融合表达载体pGBT9/HG;同时构建了包含紫杉烯合酶基因...

外酶C3转移酶转基因表达对小梁细胞的影响

关键词: 外酶c3转移酶  转基因  地塞米松  小梁细胞  转基因表达  转移酶  c3  外酶  networks  

目的:探讨腺病毒载体介导的外酶C3转移酶(exoenzyme C3 transferase,C3)表达对体外培养的正常或地塞米松处理的人类小梁细胞的作用.方法:构建C3和绿色荧光蛋白(GFP)的腺病毒表达载体(AdC3GFP).用AdC3GFP转导人类正常或经地塞米松处理的小梁细胞.观察(1)小梁细胞肌动蛋白、粘着斑蛋白(vinculin)、β-链蛋白(β-catenin)的变化;(2)地塞米松能否诱导...

更正启事

动态

关键词: 生物安全实验室  人类白细胞抗原  工业生物技术  学术交流会  技术展览会  转基因水稻  dna转染  蛋白质组学  武汉大学  

第五届中国国际生物技术展览会及学术交流会在北京举行；第三届国际艾滋病学会大会在巴西开幕；武汉大学获得我国首个生物安全实验室国家认证；天津市转基因水稻率先走出实验室；野生小麦基因简便导入普通小麦；人用SARS疫苗开始临床试验；上海创建大规模细胞DNA转染技术平台；北京血液中心发现两个人类白细胞抗原新等位基因；韩国成功获得克隆...