中国生物工程杂志

2007年全球转基因作物商业化发展态势——从1996年到2007年的第一个12年

关键词: 转基因作物  商业化发展  applications  转基因农作物  农业生物技术  service  农业发展  生物技术领域  

转基因农作物的种植是现代农业发展的重要手段和重要领域。在研究和保障生物安全的同时，加快转基因农作物的研究、开发和产业化已引起各国的高度关注，并成为国际农业生物技术领域竞争的焦点。 国际农业生物技术应用服务组织（International Service for the Acquisition of Agri—biotech Applications，ISAAA）是一个非盈利性的国际农业生物...

HIV-1 C／B’亚型多价重组MVA病毒疫苗免疫原性的研究

关键词: 多价重组mva病毒疫苗  免疫原性  

目的：检测人类免疫缺陷病毒1型（HIV-1）C／B’亚型与痘苗病毒安卡拉株（MVA）的多价重组疫苗的免疫原性，此疫苗中包含HIV-1C／B’CRF株的5个基因，分别是env，gag，pol，nef，tat。方法：设10^5pfu／ml，10^6 pfu／ml，10^7pfu／ml ADMVA3个剂量组，用ELISPOT方法检测细胞免疫反应。同时，以Gag蛋白作为包被抗原，使用间接ELISA的方法检测体...

二甲基亚砜作用下重组CHO细胞胞内乙型肝炎表面抗原的定位

关键词: 细胞培养  cho细胞  hbsag  电镜  

在培养环境中添加二甲基亚砜（DMSO）能分别提高重组CHO细胞乙型肝炎表面抗原（HBsAg）的产量和比生产速率70％和3．2倍以上，但同时发现胞内HBsAg的积累量是对照组的7．2倍。为了分析胞内HBsAg积累的区域，采用电镜技术分析后发现，经DMSO处理后的CHO细胞胞内出现了很多的扩张区域，这些扩张区域分布整个胞浆，有的扩张区域已经侵蚀到细胞核上...

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人sApo2L-Fc的分子构建及其在CHO细胞中的表达

关键词: sapo2l  fc融合蛋白  cho细胞  真核表达系统  

目的：构建人sApo2L—Fe分子，在中国仓鼠卵巢细胞（CHO）中表达有生物学活性的人Apo2L—Fe融合蛋白。方法：将sApo2L—Fe基因克隆入pcDNA3．1（＋）表达载体，重组质粒转化大肠杆菌DH50t。挑取阳性克隆扩大培养，提取质粒进行酶切鉴定；采用脂质体法将重组质粒转入CHO细胞，经（7418加压筛选、ELISA检测，挑选表达较高的阳性转化子扩大培养；表...

A组人轮状病毒全基因组克隆和基因型分析

关键词: a组人轮状病毒  全基因组  克隆  基因型分析  

运用基因克隆和重组技术，从一急性胃肠炎患儿样品中克隆到一株轮状病毒（RV）全基因组eDNA。核苷酸序列测定结果表明，该株RV基因组11条RNA共含有18613个核苷酸（3302bp～751bp），编码5791个氨基酸。全基因组研究结果表明，该株RV（TB—Chen）为A组，II亚组，基因型为G2P[4]／NSP4[A]。这是首个A组人RV全基因组研究结果的报道，对研究和开发RV...

美国Frost＆Sullivan授予赛默飞世尔科技年度杰出市场领袖奖

关键词: 科技创新能力  市场  领袖  美国  细胞筛选  客户需求  洞察力  

赛默飞世尔科技凭借其在美国高内涵筛选（Hish Content Screening）市场的杰出贡献，获得市场研究公司Frost ＆ Sullivan授予的2007年度市场领袖奖项。这一奖项表彰了赛默飞世尔科技的杰出专业经验，对客户需求的深刻洞察力，科技创新能力和先进的细胞筛选分析解决方案；

NK13中（S）-酮基布洛芬拆分用酯酶基因的克隆及表达

关键词: 不对称拆分  酯酶  克隆  表达  

以筛选出的一株具有不对称拆分消旋酮基布洛芬氯乙酯的菌株NK13为材料，经初步鉴定为巨大芽孢杆菌（Bacillus megaterium），通过构建其基因文库，从中筛选得到一阳性克隆重组子pUC—NK。测序分析表明，该重组子质粒中包含一长度为933bp的酯酶基因的完整开放阅读框，核苷酸同源性对比证明该酯酶基因属首次发现（GenBank登录号为DQl96347），将此...

载基因壳聚糖纳米粒的制备及免疫增强作用的初步研究

关键词: 壳聚糖  纳米粒  转染  免疫原性  

目的：制备壳聚糖载基因纳米粒，并对其体外转染效率及其在小鼠体内的免疫增强效果进行初步研究。方法：以构建的口蹄疫DNA疫苗为模型药物，采用复凝聚法制备纳米粒；用透射电镜观察形态；用纳米粒度分析仪测定粒径、多分散度和zeta电位；凝胶阻滞分析测定基因在纳米粒中的位置；用体外基因转染实验评价纳米粒的转染活性。用载基因壳聚糖纳米粒...

猪繁殖与呼吸综合征病毒非结构蛋白NSP2的原核表达及其单克隆抗体的制备

关键词: 猪繁殖与呼吸综合征病毒  单克隆抗体  原核表达  

将猪繁殖与呼吸综合征病毒（PRRSV）S1株截短修饰的NSP2蛋白基因（tNSP2），克隆于pGEX-6P-1载体中，转化大肠杆菌后用IPTG诱导表达。Western blot结果表明，融合表达的GsT—tNSP2蛋白能被PRRSV阳性血清特异性识别，大小约50kDa。经GsT柱提取纯化蛋白GST—tNSP2，免疫Balb／c小鼠，取脾细胞与SP2／0骨髓瘤细胞进行融合，获得2株能稳定分泌抗NSP2...

致谢

中国明对虾过氧化物还原酶基因在大肠杆菌中的重组表达、产物纯化及活性测定

关键词: 中国明对虾  过氧化物还原酶  重组表达  纯化  活性  

采用RT-PCR扩增编码中国明对虾Prx成熟肽的基因，并克隆到大肠杆菌表达载体pCR 17／NT TOPO TA中进行体外重组表达。重组质粒转化大肠杆菌BL21（DE3）pLysS后，经IPTG诱导表达产生包涵体形式的目的蛋白。对重组蛋白进行LC—ESI—MS分析，结果表明融合蛋白的4个肽段与中国明对虾Prx相应肽段完全一致。将重组蛋白通过金属螯合柱进行纯化，进而透析...

紫杉烷13α-羟基化酶基因的克隆及其转化烟草的研究

关键词: 紫杉烷  全长  cdna  烟草  转化  

利用东北红豆杉（Taxus cuspidata）cDNA文库作为模版，通过PCR技术扩增得到我国东北红豆杉紫杉烷13α-羟基化酶（Taxane 13α-hydroxylase，简称130H）的全长cDNA，将PCR产物克隆到pGM-T载体后测序结果表明该序列长度为1458bp。同源性比较分析结果表明：其碱基序列与已经报道的东北红豆杉（Taxus cuspidata）的130H基因的一致性为99．38％，其氨...

生防枯草芽孢杆菌B29菌株抗菌物质的初步研究

关键词: 生物防治  枯草芽孢杆菌  抑菌作用  抗菌物质  

通过检测生防枯草芽孢杆菌除菌上清液对黄瓜枯萎病菌Fusarium oxysporium f．cumerinum菌丝生长和分生孢子萌发的抑制作用，初步研究了生防枯草芽孢杆菌B29菌株抗菌物质的活性。结果表明，枯草芽孢杆菌B29菌株分泌的抗菌物质不仅抑制病原菌的生长；并可抑制尖孢镰刀菌孢子的萌发，使分生孢子萌发畸形。研究确定了该菌株抗菌物质产生的最佳条件：...

科学出版社新书

木质素降解菌的筛选及混合菌发酵降解秸秆的研究

关键词: 秸秆降解  混合发酵  白腐真菌  木质素  纤维素  

农作物秸秆是农业生产的副产品，也是一项重要的生物资源。其成分结构的特殊性所导致的难降解问题，一直是转化利用秸秆的难题。利用混合菌将秸秆纤维素转化为蛋白质、乙醇、乙酸、乳酸等研究是目前热点。通过马铃薯琼脂平板培养、马铃薯液体摇瓶培养和稻草秸秆固态发酵，从6株常见的食用白腐菌中筛选出了生长优势较强、产漆酶酶活高的平菇HF。...

重金属汞螯合物人工抗原的合成与鉴定

关键词: 汞  双功能螯合剂  抗原  合成鉴定  

以异硫氰酸苄基乙二胺四乙酸为双功能螯合剂，合成了半抗原，并将半抗原与钥孔戚血蓝素或牛血清白蛋白偶联制备抗原。用二喹啉甲酸（BCA）法测抗原浓度，对半抗原、抗原、KLH和BSA分别进行紫外分光光度计扫描，利用SDS．PAGE电泳进行定性鉴定，用三硝基苯磺酸法间接测偶联率，用石墨炉原子分光吸收法检测抗原中Hg^2＋的含量。研究结果表明抗原合...

RNA干扰技术对PCI2细胞CaMKIIβ基因表达的影响

关键词: rna干扰  短发夹rna  基因表达  camkii  

观察RNA干扰表达载体对PCI2细胞中CaMKIIβ基因的抑制作用。构建针对CaMKIIβ基因的RNAi质粒表达载体，脂质体法转染大鼠肾上腺嗜铬细胞瘤PCI2细胞株，应用逆转录-聚合酶链反应（RT—PCR）、Western blot检测其对CaMKIIβ mRNA及蛋白质水平的影响。构建的质粒表达载体在PCI2细胞中抑制了CaMKIIβ mRNA及蛋白质的表达。与阴性对照组相比，表达质粒产...

双向凝胶电泳-飞行时间质谱技术鉴定食管上皮细胞癌变时14-3-3 protein ε、S100A9的表达

关键词: 食管鳞癌  蛋白质组  激光捕获显微切割  

目的：分析食管鳞癌和正常食管上皮细胞蛋白质的表达差异，获取鉴别两者的分子标志物。方法：通过激光捕获显微切割技术分离ESCC肿瘤细胞和癌旁上皮细胞，通过双向电泳和质谱技术鉴定表达异常的蛋白，并通过蛋白免疫印记证实部分差异蛋白的表达。结果：建立了食管癌组织和正常食管上皮蛋白的双向凝胶电泳图谱，通过质谱技术鉴定出14—3—3protei...

定量测定重组人睫状神经营养因子活性的新方法

关键词: 睫状神经营养因子  酸性磷酸酶  神经细胞  生物学活性  

目的：建立一种能定量测定重组人睫状神经营养因子（ciliary neurotrophic factor，CNTF）生物学活性的新方法。方法：从鸡胚中分离出背根神经节并制成神经细胞，将重组人睫状神经营养因子加入到细胞中继续培养64h后，用酸性磷酸酶法检测活细胞内酸性磷酸酶的活性，从而定量测定重组人睫状神经营养因子的生物活性。结果：重组人睫状神经营养因子...

八氢番茄红素合酶基因对人参的遗传转化

关键词: 农杆菌法  psy基因  人参愈伤组织  遗传转化  

八氢番茄红素合酶（phytoene synthase，PSY）是类胡萝卜素生物合成的限速酶，通过建立psy基因的人参转化体系，可促进相应类胡萝卜素的合成，从而提高人参的营养价值。以人参愈伤组织为受体，以psy为目的基因，应用根癌农杆菌介导法进行遗传转化。以抗性筛选人参受体转染效率为指标，从菌液浓度、侵染胞龄、侵染时间、共培养时间四方面优化了转...

侵染落葵的黄瓜花叶病毒分离物CP基因序列分析

关键词: 落葵  黄瓜花叶病毒  cp基因  序列分析  

通过间接酶联免疫法（ID-ELISA）检测到染病落葵病样中存在黄瓜花叶病毒（cucumber mosaic virus，CMV）。从病叶中提取总RNA，用RT-PCR方法扩增得到657bp的CMVCP基因片段，将扩增产物与T载体连接并进行测序。用DNAMAN将得到的CP基因序列与GenBank收录的黄瓜花叶病毒两亚组部分株系或分离物的CP基因序列进行比较，结果表明该CP基因与CMV亚组I、...

藤黄酸聚乳酸纳米粒的研制

关键词: 藤黄酸  聚乳酸  纳米粒  质量评价  毒性  

以新型材料聚乳酸（PIJA）为载体，研制出质量稳定的藤黄酸聚乳酸纳米粒（GA-PIJA-NPs）乳液制剂，并对其安全性进行评价。采用改良的溶剂蒸发法制备藤黄酸聚乳酸纳米粒（GA-PIJA-NPs）；用透射电子显微镜（TEM）观察纳米粒的形态；用激光粒度分析仪测定其平均粒径大小和分布；经超速离心后用紫外分光光度计测定纳米粒的包封率与载药量；考察藤...

特异性miRNA调节机理研究进展

关键词: mirna  特异性  调节机理  

MicroRNA（miRNA）是一类新鉴定的非蛋白质编码小RNA，它们在多种生物学过程中发挥重要作用。最新研究表明许多miRNA表达受RNA编辑、差别加工和组织特异性增强子调节而呈现时间和空间特异性，而且基于miRNA调节设计分子药物的前景很好。深入理解miRNA调节的机理有助于揭示一些疾病的发病机理，发现干预治疗的新分子靶标，以及最终建立有效的基因...

氨基酸生物合成抑制剂类除草剂作用机理及耐除草剂转基因植物研究进展

关键词: 氨基酸生物合成抑制剂  除草剂  转基因植物  

氨基酸是植物体内必不可少的物质，在植物的生长代谢中发挥着重要作用。与动物不同，植物的氨基酸供给全部靠自身来合成，一旦植物的氨基酸合成受阻，植物便难以继续生存。因此，植物氨基酸合成中的关键酶一直是新型除草剂研发中重要的靶标酶。在目前已经商品化的除草剂中，通过抑制植物氨基酸生物合成中的关键酶活性而发生作用的除草剂占很大比...

脂肪酶催化合成生物柴油的瓶颈问题及其对策

关键词: 生物柴油  脂肪酶  酶催化法  瓶颈  

生物柴油，一种新型的清洁能源燃料，具有可再生、可生物降解、环境友好等优良的品性，可部分或全部替代石化柴油。碱催化法、脂肪酶催化法及超临界法是合成生物柴油的主要工艺，其中脂肪酶催化法是一种节能型、环保型工艺，在节能和环保方面，有着碱催化法无可比拟的优越性，具有良好的工业应用前景。但目前在实现产业化的进程中仍存在如酶成本...

项目推介

关键词: 投资项目  重组水蛭素  止血材料  核酸疫苗  可吸收  治疗性  新药  

重组水蛭素；新型可吸收止血材料及创伤急救绷带；乙肝治疗性核酸疫苗；国家一类抗癌新药UTD1；兰馨亚洲投资集团寻求投资项目；西安新药评价研究中心项目;

研发动态

关键词: 研发  基因组计划  美国能源部  第四军医大学  胆固醇含量  基因图谱  生物能源  胃癌  

中英美宣布启动国际“千人基因组计划”;第四军医大学研发新型胃癌靶向纳米疫苗;美国绘出世界上首个合成生命基因图谱;美国能源部大豆基因组促进全球生物能源研究;美国确认影响血液胆固醇含量的基因;

产业动向

关键词: 产业化  生物柴油  重大项目  自主创新  能源林  天津市  

广西生物柴油能源林将年产柴油逾16万吨；天津市确定实施20项自主创新产业化重大项目；

会议报道

关键词: 会议报道  重大项目  组织工程  产业投资  干细胞  

“十一五”863“干细胞与组织工程”重大项目研讨会在京召开；第26届JPMorgan健康产业投资会议在美国召开;

中关村生物医药园

关键词: 中关村科技园区  生物医药  设备仪器  配套设施  服务体系  交通便利  研究机构  创业企业  

中关村生物医药园是目前国内专业设备仪器先进、配套设施完备、服务体系完善的生物医药专业孵化器，位于中关村科技园区的核心区，这里交通便利、环境优雅、人才密集、研究机构密集，是生物医药创业企业的优选之地。