中国生物工程杂志

人中性粒细胞弹性蛋白酶诱导气道黏液高分泌细胞模型的建立及其机制的初步研究

关键词: 人中性粒细胞弹性蛋白酶  黏蛋白5ac  黏蛋白5b  表皮细胞生长因子受体  细胞模型  

目的：以人中性粒细胞弹性蛋白酶（HNE）为诱导因素，研究建立黏蛋白（MUC）5AC和5B高表达的细胞模型，同时对黏蛋白高表达机制进行初步研究。方法：培养人肺腺癌细胞A549，以HNE为刺激因素，EGFR中和抗体、表皮细胞生长因子受体（EGFR）磷酸化阻断剂AG1478为干预因素，分组培养。采用四甲基偶氮唑盐光吸收法（MTT法）检测HNE对细胞活性的影响；...

eIF-4E腺病毒载体构建及对乳腺癌MCF-7细胞转移能力的影响

关键词: 重组腺病毒  rna干扰  侵袭和运动  

目的：构建乳腺癌真核细胞起始因子—4E（eukaryotic initiation factor 4E，eIF-4E）基因重组腺病毒载体，并观察其对乳腺癌细胞MCF-7转移能力的影响。方法：应用基因重组技术将eIF-4E基因构建于腺病毒载体pAD-X，转染293包装细胞得到高滴度重组腺病毒，并用real-timePCR进行eIF-4E基因表达的验证。将重组腺病毒pAD-eIF-4E感染MCF-7细胞，应用s...

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柞蚕核型多角体病毒载体在培养细胞和休眠蛹中的基因表达效果

关键词: 核型多角体病毒  载体  柞蚕  基因表达  

柞蚕核型多角体病毒（AnpeNPV）作为基因表达载体在柞蚕培养细胞（AnPe细胞）和柞蚕蛹中已经成功地表达出了外来基因，并生产出了大量蛋白质。比较了AnpeNPV与苜蓿尺蠖核型多角体病毒（AcMNPV）、家蚕核型多角体病毒（BmNPV）和美国白蛾核型多角体病毒（HycuNPV）基因表达载体在培养细胞和昆虫活体组织内的β-半乳糖苷酶基因表达效果。结果显示，...

人白介素12亚基p40和p35基因串联在毕赤酵母中的表达及表达产物活性分析

关键词: 人白细胞介素12  毕赤酵母  分泌表达  活性分析  

利用毕赤酵母系统表达有活性的人单链白细胞介素12（hscIL-12），PCR法从质粒pBI121-IL-12中扩增hscIL-12基因，经酶切、连接构建重组表达载体pPIC9K—hscIL-12，SacI线性化后，PEG1000法转化毕赤酵母GS115，经G418筛选和菌落PCR鉴定，经甲醇诱导，hscIL-12在酵母中获得分泌表达，表达产物经Westernblot检测，显示该蛋白相对分子质量为70kDa，可...

转铜／锌超氧化物歧化酶和抗坏血酸过氧化物酶基因马铃薯的耐氧化和耐盐性研究

关键词: 抗氧化酶  氧化胁迫  盐胁迫  转基因马铃薯  

高盐等逆境可以加剧植物体内活性氧的产生，进而引起植物细胞死亡。为开发抗逆境作物，以置于氧化诱导型启动子下定位于叶绿体的转铜／锌超氧化物歧化酶（Cu／ZnSOD）和抗坏血酸过氧化物酶基因（APX）马铃薯为材料，研究了其对MV和NaCl所引起的氧化胁迫的耐受性。结果表明，MV胁迫下，转基因马铃薯叶片膜的相对电导率明显低于对照；NaCl胁迫下，...

抗菌肽CM4与人可溶性B淋巴细胞因子hsBAFF在大肠杆菌中的融合表达

关键词: 抗菌肽cm4  人可溶性b淋巴细胞因子  表达  纯化  

为进一步探讨抗菌肽CM4的原核表达及其生物学功能，研究了抗菌肽CM4与人可溶性B淋巴细胞刺激因子hsBAFF的融合表达及抗菌肽CM4的生物学活性。运用PCR把B淋巴细胞因子hsBAFF和家蚕抗菌肽cM4进行基因融合，构建了融合表达载体pET28a（＋）／CM4-hsBAFF，并在大肠杆菌中获得高可溶性表达的融合靶蛋白，且存在于超声破碎后的上清，经分子筛SephadexG...

致谢

根癌农杆菌介导的哈茨木霉菌遗传转化的研究

关键词: 根癌农杆菌  哈茨木霉  遗传转化  

利用根癌农杆菌EHAl05进行了哈茨木霉Th-33的转化，在优化的转化条件下，EHA105对木霉菌的转化效率约45-100个转化子／10^6个孢子。利用该方法已建立了含4000多个转化子的木霉T-DNA插入突变体库。随机挑选24个转化子进行遗传稳定性分析，结果显示转化子经过5代无选择压力连续转接后都能在选择平板上正常生长；潮霉素抗性基因的PCR扩增和Southern...

一种新的检测黄曲霉毒素B1的酶生物传感器的制作

关键词: 黄曲霉毒素b1  酶电极  多壁碳纳米管  

报道了一种新的检测黄曲霉毒素B1的生物传感器，该传感器以开管的多壁纳米碳管固定化黄曲霉毒素氧化还原酶制作传感电极检测黄曲霉毒素B1，其线性范围达到0．16μM-3．2μM，当把特异性的黄曲霉毒素B1抗体与黄曲霉毒素氧化还原酶通过多壁纳米碳管共固定化制作修饰电极，传感器的检测限提高到16nM，灵敏度提高了10倍。用这种方法制作黄曲霉毒素酶生...

乳糖诱导甜蛋白Monellin在大肠杆菌中的表达

关键词: 甜蛋白monellin  乳糖  诱导表达  优化  

根据已报道的单链Monellin甜蛋白的氨基酸序列，按大肠杆菌基因偏爱密码子，设计和人工合成了单链monellin基因。将单链monellin基因克隆到大肠杆菌表达载体pET-28a中，构建了重组表达载体pET28a—mon，转化大肠杆菌B121（DE3），得到表达Monellin的大肠杆菌工程菌株。借助SDS—PAGE分析方法，研究了乳糖代替IPTG诱导大肠杆菌表达甜蛋白Monellin...

AZ31B镁合金植入小鼠的生物相容性考察

关键词: 镁合金  羟基磷灰石涂层  生物安全性  

目的：评价羟基磷灰石（hydroxyapatite，HAP）涂层的AZ31B镁合金（HAP／AZ31B）作为植入材料的生物安全性。方法：采用恒电压阴极电沉积法制备表面HAP涂层的HAP／AZ31B材料；判定生物材料的致突变及毒性作用；检测材料表面的腐蚀状况并进行能谱分析。结果：HAP／AZ31B材料无致突变作用，对动物组织未产生严重的炎症反应；经HAP涂层后的AZ31B材...

赛默飞世尔科技PITTCON2008展示新产品

关键词: 科技  产品  pittcon  新奥尔良  色谱质谱  展会  匹兹堡  

近日，赛默飞世尔科技公司在北京举行了新闻会，并介绍了一系列其在2008年匹兹堡国际仪器行业展会（PITTCON2008）上重点介绍的新产品，该展会于3月3日至6日在美国路易斯安娜州的新奥尔良举行。此次赛默飞世尔的新品主要集中在分子光谱系列和色谱质谱两大领域。此次PITTCON展会上，赛默飞世尔科技分子光谱系列旨在：

废啤酒酵母吸附水溶液中Cu^2＋的性能及机理研究

关键词: 生物吸附  废啤酒酵母  官能团  

用废啤酒酵母吸附水溶液中Cu^2＋，考察了溶液pH值、Cu^2＋浓度和吸附时间对Cu^2＋吸附的影响。结果表明：废啤酒酵母吸附Cu^2＋在4～6h内达到吸附平衡，酸性条件利于吸附，以pH为5时最佳，吸附等温曲线符合Langmuir模式。用电位滴定及FTIR分析的方法确定生物吸附剂主要含有磺酸基、羧基及氨基等功能团。生物吸附剂对Cu^2＋的吸附以单分子层的化...

重庆科润生物医药研发有限公司对外技术服务招商

关键词: 技术服务  生物医药  研发  重庆  招商  药物开发  重组蛋白  中试车间  

重庆科润生物医药研发有限公司是一家具有10多年从事生物制品、重组蛋白药物开发的经验的专业技术公司。公司具备重组蛋白药物开发的全套技术和设备，拥有按GLP要求设计的中试车间和实验区，设备完善，工艺先进，包括工程菌构建、中试发酵工艺、蛋白纯化、样品质控检测标准建立、制剂工艺等。

一种快速提取基因组DNA的方法

关键词: 氧化硅超顺磁性纳米磁珠  基因组dna  全血  培养细胞  

采用氧化硅超顺磁性纳米磁珠和自己设计的试剂体系及提取流程，建立了一种基因组DNA的快速提取方法，该方法以氧化硅磁珠为固相吸附载体，盐酸胍、β-巯基乙醇和SDS为主要裂解吸附试剂。以全血或培养细胞为实验材料进行基因组DNA的提取结果显示建立的方法提取100μl小鼠抗凝血，可得2～3μg基因组DNA，OD260／OD280为1．8±0．05，其纯度可满足后续...

细菌胞外多糖提取优化及毒性试验研究

关键词: 胞外多糖  响应面法  提取  急性毒性  蓄积毒性  

优化了提取Rhizobium sp．N613胞外多糖（REPS）的工艺条件，以发酵液pH值、乙醇浓度以及醇沉时间为因子，采用响应面法试验获得了REPS的最佳提取条件，即pH5．9，乙醇浓度74％，醇沉时间16．5h。在该条件下，胞外多糖提取率为9．28±0．06g／L，其纯度达97％，收率达93．6％。此外，还进行了REPS的特性粘度、急性毒性测试和蓄积毒性实验，结果表...

固体平板磁泳分离细菌新方法

关键词: 氧化亚铁硫杆菌  固体平板磁泳  细菌分离  磁小体  

氧化亚铁硫杆菌（Acidithiobacillus ferrooxidans）能够在胞内形成电子致密的磁性颗粒，它的这种特性使利用氧化亚铁硫杆菌合成生物纳米磁性材料有可能实现。为了筛选出合成磁性颗粒能力强的菌株，对原有的液体磁泳进行了改进，采用了新的固体平板磁泳方法来筛选纯化目的菌株。经过磁泳分离后，细菌中含磁性颗粒的细胞比例由原始菌群的30％上升...

重组OSX腺病毒载体的构建及其调控成骨细胞增殖与分化的作用

关键词: osx  成骨细胞  分化  增殖  腺病毒  

构建表达成骨相关转录因子Osx的腺病毒，观察Osx对原代培养的小鼠成骨细胞增殖与分化的调控作用。将Osx编码基因克隆入腺病毒载体pAdEasy中，经293A包装后得到重组腺病毒，感染原代培养的小鼠颅骨细胞，茜素红染色观察矿化程度，实时定量RT-PCR检测成骨相关标志基因的转录水平，流式细胞检测细胞周期的改变。结果发现，（1）得到的病毒滴度为2×1...

赛默飞世尔科技任命中国区新总裁

关键词: 中国  科技  总裁  美国通用电气公司  制造工程师  制药公司  产品管理  增长速度  

赛默飞世尔科技公司近日宣布蒋文康先生（Syed Jafry）担任其中国区总裁，并将常驻上海负责赛默飞世尔科技在中国的所有商业和制造业务。蒋文康先生1985年在英国伦敦的Glaxo制药公司任制造工程师，后进入美国通用电气公司工作，在美国、伦敦、瑞士和中国历任销售、市场、产品管理、以及业务领导等工作。蒋文康先生表示，“中国是赛默飞世尔科技...

蚯蚓体内一组脱氧核糖核酸酶的酶学性质研究

关键词: 蚯蚓脱氧核糖核酸酶  分子量  酶学性质  

目的：研究一组新型蚯蚓脱氧核糖核酸酶（earthworm desoxyribonucleases，EWDs）的主要生化性质。方法：采用SDS—PAGE、MALDI—TOF、紫外分光光度方法。结果：确定了EWD1，EWD2、EWD3（总称为：EWDs）的分子量分别为157．2kDa，69．1kDa和63．5kDa。37℃，pH4．6以小牛胸腺DNA为底物时，EWDs的Km值分别为1．58mg／ml，3．95mg／ml，1．52mg／m...

科学出版社新书

三相鼓泡塔生物反应器培养云芝菌合成漆酶

关键词: 三相鼓泡塔生物反应器  云芝菌  漆酶  靛蓝  染整废水  脱色  

为了提高云芝菌发酵生产漆酶的效率，提出了一种利用自絮凝菌丝球在三相鼓泡塔生物反应器中重复分批发酵产漆酶的新方法。在优化后的产酶条件下，考察维生素C的添加浓度对漆酶活力的影响，并通过在培养基中添加维生素C进行漆酶多批次培养。研究结果表明，维生素C的添加浓度为1．50mmol／L时，可使漆酶活力提高2．6倍。连续进行了10批培养，每批...

成纤维细胞激活蛋白α与肿瘤的靶向治疗

关键词: 肿瘤相关成纤维细胞  肽链内切酶  靶向治疗  

成纤维细胞激活蛋白α（FAPα）是肿瘤相关成纤维细胞特异性表达的一种表面抗原，具有二肽基肽酶和胶原酶活性，在肿瘤的生长、浸润、转移中发挥重要作用。故以FAPα作为肿瘤基质标志物的病理诊断、肿瘤基因治疗或免疫治疗将成为可能。就近年来对FAPα结构特点、活性作用及在肿瘤诊治中的研究进展进行综述。

降血压肽基因工程菌的构建及高效表达策略

关键词: 降血压肽  基因工程  构建  表达  

降血压肽具有很好的降血压效果而且天然无毒副作用，是目前基因工程研究的热点之一。阐述了降血压肽基因工程菌构建的重要性，综述了国内外关于降血压肽及各种小肽表达方面的研究进展。探讨了降血压肽基因工程菌在构建过程中目的片段的选择、串联连接的方式、串联体的获得及表达载体的选择等方面采用的策略和依据，重点介绍了各种不同表达类型载...

代谢关键酶基因作为转基因植物选择标记的研究进展

关键词: 转基因植物  生物安全  代谢途径  绿色选择标记  

在植物基因工程中，需要用到选择标记基因以便筛选转化子。随着转基因植物的商品化，人们越来越关注其安全性问题，其中主要涉及选择标记的安全性。为了提高转基因植物的安全性，生物学家们开始寻找生物安全的选择标记。分别从糖代谢、氨基酸代谢、激素代谢、核苷酸代谢、蛋白质代谢等方面综述了当前以代谢关键酶基因作为转基因植物选择标记的研...

超嗜热羧酸酯酶的性质和应用研究

关键词: 超嗜热菌  羧酸酯酶  结构特征  热稳定性  应用  

来源于超嗜热菌的超嗜热羧酸酯酶，结构上与激素敏感性脂肪酶（HSL）家族近似，属于α/β-水解酶，但是其空间结构比HSL更加紧密而有韧性，具有很强的热稳定性。性质研究表明，温度和有机溶剂对超嗜热羧酸酯酶的活性和对映选择性影响显著；其最适底物一般是对硝基苯酯，部分酯酶的基因含有GGGX基序，能够水解叔醇酯结构。由于超嗜热羧酸酯酶的独特...

深切怀念我的老师吴瑞教授

关键词: 老师  分子生物学  分子遗传学  

我敬爱的老师，美国康乃尔大学生化分子生物学系分子生物学及分子遗传学教授吴瑞博士，于2008年2月10日与世长辞。听到这个不幸消息的时候，我无论如何不肯相信这会是真的。然而事实是无情而残酷的。一个多月的时间已经过去，我的心情仍旧难以平静。绵绵的往事，回忆起来宛如一梦。虽说时光不会倒流，但吴老师的音容笑貌却历历在目，他依然活在...

全球转基因作物批准情况

项目推介

关键词: 单克隆抗体  芯片系统  透皮给药  靶向制剂  乙肝病毒  注射液  菌多糖  

重组人复合干扰素α（优福金）;透皮给药微针阵列药物芯片系统项目;抗乙肝病毒人单克隆抗体靶向制剂项目;分枝杆菌多糖注射液

我国培育世界首例冷冻胚胎克隆水牛

关键词: 胚胎冷冻技术  胚胎克隆  水牛犊  世界  培育  冷冻胚胎移植  体细胞克隆  

近日，广西水牛研究所利用克隆胚胎冷冻技术，使一头杂交母水牛顺利产下一头冷冻胚胎移植的体细胞克隆雌性水牛犊。冷冻胚胎克隆水牛犊在世界尚属首例，这是继1月1日广西水牛研究所利用国外优质种牛和本地水牛成功克隆出世界首例亚种问水牛之后的又一重大研究成果。该项目为农业部“948”项目。

首张非洲人全基因组图谱问世

关键词: 基因组图谱  非洲  全基因组测序  生物技术公司  佛罗里达州  美国加州  尼日利亚  男性  

美国加州Illumina生物技术公司近日宣布，他们首次对一位非洲男子进行了完整的基因组测序，该男子为匿名的尼日利亚约鲁巴人男性。此前，科学家已经对两位白人男性（James Watson和Craig Venter）和一位中国男性进行了全基因组测序。Illumina公司在宣布这一消息两天后，就在佛罗里达州的一次会议上公开了他们的数据。从理论上而言，如果能够对这...

美国绘出玉米基因组草图

关键词: 基因组草图  玉米  美国  基因组测序  华盛顿大学  项目负责人  农作物  威尔逊  

美国圣路易斯华盛顿大学基因组测序中心近日宣布，他们成功测序得出了玉米基因组草图，这是人类成功测序的第二种农作物基因组，第一种被测序的农作物是水稻。测序项目负责人理查德·威尔逊在“玉米遗传学会议”第50次年会上公布了玉米基因组草图。

美国构建可快速确认基因功能的基因网络模型

关键词: 网络模型  基因功能  美国  研究人员  致病基因  相关基因  功能失调  人类疾病  

美国德州大学奥斯汀分校研究人员开发出一种新基因网络模型，可更加容易和快速地确认出控制线虫寿命及其肿瘤发展的致病基因。研究人员期望通过扩展此项技术，可鉴别出造成人类疾病与其他身体功能失调症状的相关基因。

日本发现8种与染色体数目异常相关的基因

关键词: 染色体数目异常  日本大阪大学  基因合成  面包酵母  唐氏综合征  研究人员  蛋白质  复合体  

日本大阪大学蛋白质研究所教授绦原彰等研究人员近日在面包酵母体内发现了8种与染色体数目异常相关的基因，它们如果出现异常，会提高酵母染色体基因不能重组的概率，另外这8个基因合成的蛋白质会结合成一个复合体，不能形成复合体的酵母染色体数目也会发生偏差。由于人体内也存在类似基因，这项成果可能有助于研究染色体数目异常引起的流产和唐...

日本用鼠肝胃细胞培养出多功能干细胞

关键词: 日本京都大学  干细胞  多功能  实验鼠  细胞培养  胃  肝  

近日，日本京都大学教授山中伸弥等人利用成体实验鼠的肝和胃细胞培育出诱导多功能干细胞（iPS），相关在《科学》杂志网络版上。

美国新批准一种乳腺癌药物

关键词: 美国食品  乳腺癌  药物  血管内皮生长因子  抗血管生成  基因技术  血液供应  管理局  

美国食品和药物管理局日前新闻公报，批准一种由美国基因技术研究公司生产的名为“阿瓦斯汀”（AVASTIN）的药物用于治疗乳腺癌。该药是一种抗血管生成的药物，它通过抑制血管内皮生长因子发挥作用来阻断对肿瘤的血液供应，使肿瘤无法在体内扩散，并能使化疗有效发挥作用。此前，这种药物已被美国药管局批准用于治疗肺癌、结肠癌和直肠癌，并在...

澳大利亚开发无危害研究H5N1病毒技术

关键词: h5n1病毒  病毒技术  澳大利亚  合作开发  禽流感病毒  危害  香港大学  表面蛋白质  

澳大利亚昆士兰格里菲思大学糖体学研究所的马克·冯伊兹泰恩教授和香港大学马里克·培瑞斯教授领导的国际项目研究小组，合作开发出一种解开致命性禽流感病毒H5N1编码的技术。该技术将帮助病毒专家和药物研究人员在研究H5N1病毒某个重要表面蛋白质时，免受被病毒感染的危险。此外，新技术还能帮助人们快速验证禽流感和其他流感病毒。

全球农作物种子库将正式启用

关键词: 种子库  农作物  启用  未来气候变化  国际合作计划  永久冻土带  粮食安全  北冰洋  

建于北冰洋斯瓦尔巴群岛上的全球农作物种子库将正式启用，种子库建造目的是使地球的农作物在面临气候变化和病虫害的威胁时，甚至遭遇彗星撞击或核战争后，其基因仍然能够得到有效地保护，这是保障世界粮食安全的一项重要的国际合作计划。种子库的设计充分考虑了未来气候变化的影响，位于高海拔的永久冻土带。

“Sigma—Aldrich特约之2007生命科学十大新闻及科技风云人物评选”结果揭晓

关键词: sigma  生命科学  新闻  评选  人物  科技  胚胎干细胞  mirna  

由“生物通”网站组织的“Sigma—Aldrich特约之2007生命科学十大新闻及科技风云人物评选”活动于近日揭晓结果，入选新闻包括：1．美日科学家分别利用人体皮肤细胞创造出类胚胎干细胞；2．2007诺贝尔生理／医学奖成颁给基因敲除技术发明者；3．首次“基因组移植”获成功；4．破译miRNA调控活动过程；5．发现一种全新的细胞死亡过程；6．世界首...