关键词:重组突变体 分离纯化 血糖 胰岛素
摘要:对基因工程构建的含人胰高血糖素样肽-1(hGLP-1)突变体的工程菌株进行诱导表达,分离纯化N末端第二位突变的2Gly-hGLP-1突变体.IPTG诱导4 h,收获的菌体经超声破碎后,裂解液用Glutathione-Sepharose 4B亲和层析纯化GST-2Gly-hGLP-1融合蛋白,经CNBr裂解、Sephadex G-25柱脱盐、QAE-Sepharose F F阴离子交换柱层析和RP-C18柱脱盐,得到纯度大于98%的重组2Gly-hGLP-1.Western印迹分析证实,该突变体可被特异性hGLP-1抗体所识别.生物学活性分析表明,2Gly-hGLP-1具有明显的降血糖活性和促胰岛素分泌活性(P<0.001).
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