中国生物制品学杂志

从半合成噬菌体抗体库筛选抗狂犬病毒人单链抗体

关键词: 狂犬病毒  人单链抗体  噬菌体抗体库  预防  免疫球蛋白  

目的 应用纯化的狂犬病毒抗原从半合成噬菌体抗体库中筛选针对狂犬病毒的人单链抗体(ScFv)。方法 用固相化的狂犬病毒抗原对半合成抗体库进行3轮“吸附．洗脱．扩增”的筛选，从第3轮洗脱下来的克隆中获得一株有可溶性表达且特异性结合狂犬病毒抗原的ScFv，并进行基因序列测定。结果 所获氨基酸序列经blast数据库搜索，与一种抗狂犬病毒免疫球蛋...

绿色荧光蛋白融合表达HBsAg基因载体的构建及其在COS-7细胞中的表达

关键词: 绿色荧光蛋白  融合表达  hbsag  基因  载体  定位  融合蛋白  

目的 构建绿色荧光蛋白融合表达HBsAg基因的载体，并检测其在COS-7细胞中的表达。方法 采用PCR获得HBsAg基因；利用该基因片段和质粒pEGFP 3．1的HindⅢ/KpnⅠ限制性酶切位点构建融合表达载体pGHBs 3．1；通过脂质体介导的方法将该载体转染到COS-7细胞中，用PCR法检测基因转染，ELISA检测HBsAg的瞬时表达，荧光显微镜检测绿色荧光蛋白表达。结果...

关于统计学符号规范化要求

幽门螺杆菌尿素通道蛋白基因（ureI）的克隆及其表达和纯化

关键词: 幽门螺杆菌  尿素通道蛋白  基因  克隆  表达  昆虫细胞  纯化  

目的 对幽门螺杆菌尿素通道蛋白基因ureI进行克隆、测序，并在昆虫细胞中表达及进行产物纯化。方法 克隆ureI基因，经测序正确后，酶切、连接到pFASTBACHb质粒上，与穿梭载体DH10BAC转座，获得Bacmid-ureI质粒，转染Sf9细胞，采用Ni^2+螯合琼脂糖亲和层析纯化，经SDS-PAGE和Western blot鉴定。结果 克隆了ureI基因，并在昆虫细胞Sf9中表达纯化，...

重组人白细胞介素-10融合表达载体的构建及其在BL21（DE3）pLysE细菌细胞中的表达

关键词: 融合表达  包涵体  大肠杆菌  

目的 构建重组人白细胞介素10(recombinant human interleukin 10，rhIL-10)融合蛋白的表达载体。并在大肠杆菌中表达。方法 应用RT-PCR方法扩增ID-10基因。克隆PCR产物。构建PCP^RT7／NT-TOPO^R-IL-10重组质粒。以Appicd Biosystems 3700 DNA分析仪进行分析。构建成功的重组质粒转化大肠杆菌BL21(DE3)pLysE细胞。经12％SDS-PAGE鉴定融合表达蛋...

凋亡相关蛋白Apr-2的融合表达及多克隆抗体的制备

关键词: 融合蛋白  原核表达  多克隆抗体  制备  凋亡  

目的 融合表达凋亡相关蛋白Apr-2，并用该融合蛋白制备多克隆抗体。方法 将凋亡相关蛋白Apr-2克隆入PGEX-4T-2原核表达载体，转化大肠杆菌，IPTG诱导重组蛋白GST-Apr-2表达，用该融合蛋白免疫家兔制备多克隆抗体，经ELISA及Western blot检测。结果 融合表达蛋白GST-Apr-2主要以包涵体的形式存在，表达的融合蛋白占菌体总蛋白质的40％以上。抗体...

重组人载脂蛋白A-I（米兰变体）的复性及纯化

关键词: 大肠杆菌  载脂蛋白  米兰变体  复性  纯化  包涵体  生物活性  

目的 从大肠杆菌中获得载脂蛋白A-I(米兰变体)的包涵体，对包涵体进行复性、纯化，最终获得具有生物活性的载脂蛋白A-I(米兰变体)。方法 包涵体以尿素溶解后，以疏水层析法复性重组蛋白；以离子交换层析对其进一步纯化，并对所得的蛋白进行生物活性分析。结果 经复性纯化的蛋白纯度达95％，体外生物活性检测显示其具有生物活性。结论 本法能快速...

鸡IL-18成熟蛋白基因的克隆及在大肠杆菌中的表达

关键词: 白细胞介素18  鸡  原核表达  序列分析  克隆  大肠杆菌  

目的 以鸡脾细胞mRNA为模板扩增编码鸡IL-18成熟蛋白的cDNA，并在大肠杆菌中进行表达。方法 用PHA和LPS激活的AA肉鸡脾细胞，提取mRNA，以RT-PCR法扩增出编码鸡IL-18成熟蛋白的cDNA并测序，与pET-28b载体构建重组质粒，并在大肠杆菌BL21(DE3)plysS中表达，用SDS-PAGE检测表达产物。结果 所克隆的核苷酸片段包含了鸡IL-18全部成熟蛋白编码基因，...

生物素标记UTP及温度值对HCV细胞外聚合酶分子复制模型的影响

关键词: 丙型肝炎病毒  聚合酶  融合蛋白  原核表达  复制  hcv  生物素标记  

目的 研究建立细胞外丙型肝炎病毒聚合酶复制模型使用的生物素标记UTP浓度及温度值，为筛选药物创造条件。方法 使用高保真PfuDNA聚合酶进行反转录及套式PCR，从我国HCV RNA阳性病人血清中扩增出HCV NS5b RNA聚合酶全长基因序列，构建原核表达载体pET-30a-NS5b。在多个载体中选取pET-30a作为表达载体，选择诱导表达条件。利用Ni^2+金属离子螯和...

豚鼠致死性球虫性肠炎病理学观察

关键词: 豚鼠  致死性球虫性肠炎  病理学  艾美尔球虫  致死性感染  结肠粘膜  

目的 了解豚鼠致死性艾美尔球虫性肠炎的病理形态学特征。方法 剖检卡介苗安全试验中发病及死亡豚鼠11只，并进行肠内容物细菌分离鉴定、寄生虫形态学检查以及病理组织学观察。结果 主要病变在盲肠和结肠，尤以结肠为重。表现肠壁增厚、肠粘膜上皮与腺上皮细胞广泛地被不同发育阶段的球虫侵害，致使上皮变性、肿胀、坏死或脱落，形成表浅溃疡，...

成年SPF鸡胃肠道中芽胞杆菌的分离与部分生物学特性鉴定

关键词: spf鸡  胃肠道  芽胞杆菌  分离  生物学特性  菌株  抗药性  

目的 鉴定从SPF鸡分离出的芽胞杆菌的生物学特性。方法 从成年SPF鸡胃肠道的不同部位选择性分离13株芽胞杆菌，并进行生物学特性检测。结果 (1)所有菌株均能在含5％、10％和15％NaCl的LB平板上生长，其中11株能在含6％NaCl的LB平板上生长，7株能在含7％NaCl的LB平板上生长。(2)2株能在pH4．0的LB平板上生长，8株菌能在pH5．0生长；所有菌株均能...

全国中西医结合肿瘤研讨班征文通知

转换酶抑制剂和长效钙拮抗剂对动脉硬化相关因子TNF、IL-6的影响

关键词: 动脉粥样硬化  转换酶抑制剂  长效钙拮抗剂  tnf  卡托普利  氨氯地平  白介素  

目的 探讨卡托普利和氨氯地平对动脉粥样硬化相关因子TNF、IL-6的影响。方法 动态观察各模型组动物血浆中TNF、IL-6水平。结果 卡托普利、硒维尔+VE和氨每地平均对TNF和IL-6有抑制作用，但对TNF卡托普利作用较强。结论 两种药皆可抑制动脉粥样硬化的发生发展，但在动脉斑块的稳定方面转换酶抑制作用较强。

甲型肝炎病毒恒河猴模型的评估

关键词: 甲型肝炎病毒  恒河猴  动物模型  hav  甲肝减毒活疫苗株  毒力  

目的 对国产恒河猴作为甲型肝炎病毒(HAV)的动物模型做出全面评估。方法 用HAV野型株和H2株减毒HAV感染恒河猴，检测分析猴体的各种反应。结果 14只恒河猴经4株野型病毒感染后，全部血清抗体阳转，效价为1：2～1：1280，13只猴(92．9％)的血清酶异常升高和粪便排毒，2只猴(14．3％)有肝脏组织病理学极轻度改变；352只恒河猴分组接种68批H2株及其...

应用凝胶过滤筛选纯化甲型肝炎病毒介质

关键词: 凝胶过滤  纯化  yn5株  甲型肝炎病毒  灭活疫苗  

目的 筛选适合甲肝病毒疫苗大规模纯化凝胶过滤层析的介质。方法 采用柱层析法，分别以Scphamse 4FF，Scphamse 6FF及Scphacryl S-500 HR三种不同的凝胶过滤介质对经过阴离子交换层析纯化的甲肝病毒样品进行纯化。结果 三种凝胶介质分离甲肝病毒的图谱不相同，其中以Sepharose 4FF纯化甲肝病毒，抗原回收率达69％，纯化倍数为4．4倍。结论 Sepha...

细菌多糖疫苗苯酚污染的分析及其检测方法

关键词: 细菌多糖  疫苗  苯酚  污染  检测方法  质量控制  

核素治疗骨转移瘤患者免疫学指标与预后的关系

关键词: 骨转移瘤  免疫学指标  预后  放射性核素  免疫功能  

凋亡抑制因子survivin在喉鳞癌中表达及其临床意义

关键词: 凋亡抑制因子  survivin  喉鳞癌  表达  临床分期  组织学分级  淋巴结转移  

前带现象导致Rh抗-D菠萝酶试验阴性反应一例

关键词: 血型  抗体  前带现象  输血反应  血清学检测  

目的 通过对输血反应病例的分析，探讨如何防止免疫性输血反应的发生。方法 对输血反应患者输血前后血标本进行血型血清学检测。结果 患者输血前抗体处在低水平，输血后经相应抗原再刺激，抗体水平迅速提升。高浓度抗-D抗体在菠萝酶法中出现前带现象，而在抗球蛋白法和聚凝胺法中不表现。结论 为确保输血安全，输血前检查应严格按卫生部2000年制...

双价肾综合征出血热纯化疫苗（Vero细胞）的纯化工艺

关键词: 肾综合征出血热病毒  纯化  疫苗  vero细胞  工艺  繁殖  

目的 研究肾综合征出血热抗原的纯化工艺。方法 用Vero细胞繁殖肾综合征出血热病毒，经过灭活、浓缩，Sepharose 4FF凝胶过滤纯化。结果 用Sepharose 4FF柱层析纯化时，280nm监测收集到3个吸收峰，其中第1峰为抗原峰，将第1峰稀释配制后进行动物实验，表明按照该工艺制备的Vero细胞纯化疫苗安全有效。结论 本研究为肾综合征出血热纯化疫苗的研制...

两种甲型肝炎病毒培养法和病毒滴定法的比较

关键词: 甲型肝炎病毒  减毒活疫苗  elisa法  间接免疫荧光法  培养法  

目的 比较不同细胞培养方法和不同滴定方法的甲型肝炎病毒的滴度。方法 采用小方瓶细胞培养法和24孔板培养法培养单层细胞，待细胞病毒培养至高峰期，用胰酶消化收集细胞病毒，再用细胞裂解液裂解细胞释放病毒，用ELISA法和间接免疫荧光法检测病毒滴度。结果 用两种检测方法检测同一样品，结果差异无显著意义。用两种细胞培养方法，用相同检测方...

免疫毒素研究及临床应用进展（二）临床研究

关键词: 免疫毒素  临床应用  肿瘤细胞表面靶抗原  嵌合毒素  疾病  

按肿瘤细胞表面靶抗原分类的不同予以排列，正在临床试验中的免疫毒素/嵌合毒素，见表1。

新型促红细胞生成素研究现状

关键词: 促红细胞生成素  epo  糖蛋白类激素  骨髓  基因工程  

促红细胞生成素(EPO)是一种刺激骨髓造血的糖蛋白类激素．用基因工程方法生产的重组人红细胞生成素在治疗肾性贫血及其他类型的贫血等方面有很好的疗效。本文综述了近年来各种新型促红细胞生成素的研究现状及市场前景。

高致病性禽流感及其公共卫生学

关键词: 高致病性禽流感  公共卫生学  分子生物学  人  感染  流行病学  

禽流感的暴发和流行主要是由高致病性的H5和H7亚型AIV引起的。近年来高致病性禽流感的先后暴发和流行，特别是出现有人因感染而死亡的病例，更突出地显示了禽流感特别是高致病性禽流感的公共卫生学意义。对高致病性禽流感的流行病学、分子生物学等的研究为其预防和控制奠定了坚实的基础。

关于疫苗临床研究中的伦理学要求和考虑

关键词: 接种  疫苗  伦理学  临床研究  疾病  

接种疫苗是预防控制疾病的发生和流行的重要措施。近年来，随着生命科学的飞速发展，新型疫苗不断出现，疫苗的应用范围不断扩大，疫苗临床研究的工作显著增多。随着社会伦理学的不断发展和人类自我保护意识的不断增强，对在临床研究中受试者的保护越来越受到重视。

我国重组（CHO细胞）乙肝疫苗免疫预防效果已达世界先进水平

关键词: 乙肝疫苗  免疫预防效果  中国  克隆  重组  cho细胞  

中国肝炎防治基金会、中国疾病预防控制中心最近在石家庄市召开了我国重组(CHO细胞)乙肝疫苗免疫效果应用研讨会。我国自20世纪90年代开始应用重组(CHO细胞)乙肝疫苗以来，无论新生儿、婴幼儿和成年人，接种疫苗后不但获得了良好的血清抗体阳转率及抗体滴度，而且免疫力维持时间久，保护效果可靠，单阳性或双阳性母亲的新生儿乙肝传播阻断率高。