关键词:白细胞介素18 鸡 原核表达 序列分析 克隆
摘要:目的 以鸡脾细胞mRNA为模板扩增编码鸡IL-18成熟蛋白的cDNA,并在大肠杆菌中进行表达。方法 用PHA和LPS激活的AA肉鸡脾细胞,提取mRNA,以RT-PCR法扩增出编码鸡IL-18成熟蛋白的cDNA并测序,与pET-28b载体构建重组质粒,并在大肠杆菌BL21(DE3)plysS中表达,用SDS-PAGE检测表达产物。结果 所克隆的核苷酸片段包含了鸡IL-18全部成熟蛋白编码基因,其大小为507个核苷酸,编码169个氨基酸;构建的重组表达载体在大肠杆菌BL21(DE3)plysS中表达出相对分子质量为19000的重组蛋白。结论 已成功克隆和表达了鸡IL-18成熟蛋白基因。
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