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中国生物制品学杂志

杂志介绍

中国生物制品学杂志是由国家卫生健康委员会主管,中华预防医学会;长春生物制品研究所主办的一本北大期刊。

中国生物制品学杂志创刊于1988,发行周期为月刊,杂志类别为医学类。

  • 抗转铁蛋白受体鼠源性单链抗体基因的构建、表达及初步鉴定

    关键词: 单链抗体基因  cd71  抗c  临床应用  小鼠  转铁蛋白受体  单克隆抗体  重叠pcr  诱导表达  表达载体  

    目的利用基因工程技术将鼠源性单克隆抗体WuT9改造成单链抗体.方法从分泌抗CD71单克隆抗体的杂交瘤细胞WuT9中提取总RNA,采用Oligod T为逆转录引物,逆转录合成eDNA第一链,然后分别采用VL和VH框架区的PCR引物,扩增VH(重链可变区)和VL(轻链可变区)DN段,利用事先合成的存在于VL下游引物和VH上游引物的部分人工连接子重叠互补序列,将VL和VH的PCR回收...

  • 人破骨细胞形成抑制因子活性域片段在大肠杆菌中的融合表达

    关键词: 破骨细胞  大肠杆菌  融合表达  阳性  抑制因子  活性结构  肝细胞系  片段  诱导表达  

    目的在大肠杆菌中高效融合表达人破骨细胞形成抑制因子(Osteoclastogenesis inhibitory factor,OCIF)活性域片段.方法从中国人正常肝细胞系LO2中提取总RNA,利用RT-PCR得到OCIF活性域编码基因cDNA,将其与pMD18-T连接,转化大肠杆菌K802,筛选得到阳性重组克隆载体pMD18-OCIFAD,经双酶切得到OCIF活性域编码片段,将其插入pMAL-c2载体中,转化大肠杆菌T...

  • 幽门螺杆菌粘附素基因hpaA的克隆、表达及鉴定

    关键词: 幽门螺杆菌  免疫原性  hpaa基因  et  粘附素  原核表达系统  融合蛋白  克隆  iptg  高效表达  

    目的克隆幽门螺杆菌粘附素基因hpaA,构建其原核表达系统并鉴定融合蛋白免疫原性.方法采用PCR技术从幽门螺杆菌总DNA中扩增hpaA基因,T-A克隆后测定核苷酸序列,构建pET30a的HpaA表达载体,在E.coliBL21DE3宿主菌中用IPTG诱导表达,Ni2+柱纯化后经Western blot鉴定其免疫原性.结果所克隆的hpaA基因与报道的相应核苷酸序列同源性为94.8%~97.3%,氨基酸...

  • 宫颈癌CTL表位疫苗TAT-HPV蛋白的构建与表达

    关键词: ctl表位  宫颈癌  高效表达  疫苗  tat  hpv  et  大肠杆菌  重组蛋白  亚克隆  

    目的构建宫颈癌的CTL表位疫苗,并在大肠杆菌中表达.方法应用PCR的方法合成编码CTL表位疫苗基因序列,将其亚克隆入pET28a-TAT表达载体中,并在大肠杆菌BL21(DE3)中表达重组蛋白,用Western blot对重组蛋白进行鉴定.结果通过4轮PCR获得疫苗的基因片段,构建的重组表达载体pET28a-TAT-HPV在大肠杆菌中得到高效表达,Westernblot检测显示特异性条带.结论...

  • 激活素受体相互作用蛋白在海马神经细胞中的表达及其作用

    关键词: 海马神经细胞  激活素  信号传导  相互作用蛋白  免疫组化染色  受体  表达载体  dna  融合蛋白  克隆  

    目的在发现和克隆新的激活素受体相互作用蛋白3(ActRIP3)基因的基础上,探讨ActRIP3在海马神经细胞介导激活素信号传导的作用.方法利用GST-ActRIP3融合蛋白免疫家兔制备抗ActRIP3抗体,采用RT-PCR及免疫组化染色分析ActRIP3在脑组织中的表达与分布,采用pcDNA-ActRIP3与CAGA-lux质粒共转染海马神经细胞,分析信号传导作用.结果RT-PCR及免疫组化染色...

  • 结核杆菌Ag85A蛋白与日本血吸虫谷胱甘肽硫转移酶的融合表达与纯化

    关键词: 结核杆菌  ag85a  日本血吸虫  重组质粒  编码区  基因  谷胱甘肽硫转移酶  a抗原  原基  iptg  

    目的对结核杆菌Ag85A抗原基因进行克隆、表达与纯化,为研制新型结核杆菌血清学诊断试剂奠定基础.方法以结核杆菌H37Rv株基因组DNA为模板,经PCR扩增Ag85A抗原基因成熟肽编码区,定向克隆入原核表达载体pGEX1-λT中日本血吸虫谷胱苷肽硫转移酶(GST)编码区下游构建重组质粒,经DNA测序鉴定后,转化大肠杆菌JM109株,IPTG诱导表达,采用GST蛋白纯化试剂盒...

  • 重组人成骨蛋白-1基因在大肠杆菌中的克隆和非诱导表达

    关键词: op  成熟肽基因  成骨  克隆  扩增  大肠杆菌  正常胎儿  诱导表达  骨蛋白  高效表达  

    目的研究重组人成骨蛋白-1(rhOP-1)在大肠杆菌中的克隆和非诱导表达.方法利用RT-PCR技术,从正常胎儿肾组织总cDNA中扩增得到rhOP-1成熟肽基因片段,再将rhOP-1成熟肽基因克隆于原核融合表达载体pGEX-4T-2中,构建表达质粒pCCBC/OP-1,并转化到大肠杆菌JM109(DE3)中,在发酵过程中不添加任何诱导剂.表达产物经SDS-PAGE分析.结果扩增的目的基因序列与...

  • 优化密码子提高EGF-PE35KDEL表达量

    关键词: begf  pe  et  表达质粒  表达量  密码子  诱导  定向克隆  方法设计  融合蛋白  

    目的提高EGF-PE35KDEL融合蛋白的表达量.方法设计合成含优化密码子的EGF序列,定向克隆于pET28a-EGF-PE35KDEL的Nco Ⅰ和Nde Ⅰ位点,构建表达质粒pET28a-pBEGF-PE35KDEL.将两种表达质粒转化至BL21中,经IPTG诱导,比较表达量.结果优化密码子的EGF-PE35KDEL表达量要高于未优化的EGF-PE35KDEL.结论优化密码子能促进EGF-PE35KDEL的表达.

  • 人食管癌及宫颈癌组织中HSP70基因的表达

    关键词: 宫颈癌组织  hsp70基因  人食管癌  癌组织中  表达  正常组织  癌变过程  杂交信号  探针  rna  

    目的了解HSP70基因在不同癌组织中的表达情况.方法采用人的HSP70基因探针P17与从人食管癌及宫颈癌组织中提取的RNA进行Northern blot.结果食管癌和宫颈癌组织中出现的杂交信号均比正常组织强.结论HSP70基因在癌组织中有高表达.HSP70可能在癌变过程中起着重要的作用.

  • 胸腺素α1串联体的表达、纯化及生物学活性检测

    关键词: 生物学活性  串联表达  纯化  蛋白  基因  et  偏爱密码子  iptg  诱导表达  

    目的表达胸腺素α1(Thymosin alpha1,Tα1)三串体,并进行纯化及生物学活性鉴定.方法使用大肠杆菌偏爱密码子,人工合成Tα1三串体(Tα1③)基因,在表达载体pET-22b(+)中克隆,转化大肠杆菌BL21(DE3),IPTG诱导表达,经DEAE-Sepharose FF阴离子柱纯化Tα1③蛋白,采用Western blot鉴定表达产物,MIT法检测其生物学活性.结果获得了纯化的Tα1③蛋白,相对分子质...

  • 人TRAIL细胞外段基因在大肠杆菌中的表达及其包涵体的复性

    关键词: trail  包涵体  复性  高效表达  细胞外  目的基因  大肠杆菌  诱导表达  纯化  离子交换层析  

    目的在大肠杆菌中表达人肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体细胞外段(sTRAIL)基因,并研究其包涵体的复性.方法应用RT-PCR法从正常人外周血单核细胞中获得sTRAIL的编码基因,将其克隆到原核表达载体pBV220,于大肠杆菌DH5α中通过温控诱导表达;将包涵体进行变性和复性处理后,采用离子交换层析纯化表达产物,并经Dot blot及MIT试验鉴定.结果通过温度诱导,目...

  • 重组人乳铁蛋白基因克隆及表达

    关键词: 分泌表达  外周血白细胞  人乳铁蛋白  菌株  克隆  抗体反应  毕赤酵母  诱导表达  电转化  

    目的构建重组人乳铁蛋白(HLF)的毕赤酵母分泌表达菌株,并对表达产物进行评价.方法由外周血白细胞总RNA经RT-PCR克隆获得HLF基因结构cDNA,测序后克隆人酵母表达载体获得质粒pPIC9K-HLF,线性化后电转化入毕赤酵母,经G418-YPD筛选多拷贝后进行甲醇诱导表达.结果获得基因与GenBank中的人HLF01基因基本相符.2株多拷贝菌株诱导表达产物均能与人HLF抗体...

  • Sabin 1型脊髓灰质炎病毒在人二倍体细胞适应过程中5′端非编码区序列变异与滴度的关系

    关键词: 滴度  二倍体细胞  脊髓灰质炎病毒  人胚  序列变异  感染性  代次  传代  位点  

    目的探索Sabin 1型脊髓灰质炎病毒在人胚肺二倍体细胞适应过程中5'端非编码区序列变异及其与病毒感染性滴度的关系.方法将Sabin 1型脊髓灰质炎病毒疫苗株在人胚肺二倍体细胞KMB17中连续传11代,检测连续传代后感染性滴度,并检测11个代次5'端非编码区序列.结果随着传代次数的增加,感染性滴度逐渐升高,在第7代达到最高,为8.125LgTCID50/ml.在传代过...

  • 密码替换后人促红素基因在大肠杆菌中的高效表达及工程菌的发酵

    关键词: epo  基因  大肠杆菌  促红素  改变  表达产物  高效表达  工程菌  表达载体  

    目的研究人工合成的hEPO基因在大肠杆菌中高效表达及工程菌高密度发酵条件.方法将hEPO基因中大部分大肠杆菌稀有密码子替换成使用频率较高的密码子,人工合成hEPO全基因,然后将其插入表达载体PBV220中,转化大肠杆菌DH5α,挑选构建正确的PBV220-hEPO/DH5α菌落,经升温诱导,SDS-PAGE和Western blot鉴定表达产物;观察改变培养基、培养时间、pH及溶氧量...

  • 治疗性HIV-1重组DNA疫苗的构建与免疫效果评价

    关键词: 核酸疫苗质粒  治疗性  特异性抗体  meg  恒河猴  多表位抗原  原基  免疫效果  elisa试剂盒  

    目的构建编码HIV-1多表位抗原基因(MEG)与p24基因嵌合的核酸疫苗,并评价其免疫效果.方法将编码HIV-1多表位抗原基因(MEG)与p24基因插入到真核表达载体pVAXI中,构建HIV-1治疗性重组核酸疫苗质粒.通过ELISA试剂盒检测免疫恒河猴血清中HIV-1特异性抗体,并通过淋巴细胞转化实验检测HIV-1特异性T淋巴细胞增殖反应.结果构建的重组核酸疫苗质粒pVAXI-ME...

  • 家兔肋软骨生长板软骨细胞增殖特点的研究

    关键词: 肋软骨  软骨细胞增殖  骨生长  肥大  治疗  家兔  静止期  消化  切取  比例  

    目的研究家兔肋软骨生长板软骨细胞增殖的特点,为软骨性疾病提供治疗措施.方法取家兔肋软骨,分别切取静止期和肥大期软骨组织,经消化制成细胞悬液,采用流式细胞仪检测软骨细胞的增殖特点.结果静止带软骨细胞中G0/G1期细胞占比例最大,而肥大带软骨细胞中S期细胞数明显高于静止带软骨细胞,且不同的区带内的软骨细胞都有凋亡的存在.结论此结果有助...

  • 冻干风疹减毒活疫苗免疫动力学模型的建立和抗体持久性的预测

    关键词: 冻干风疹减毒活疫苗  hi抗体  初免  免疫持久性  国产  追踪观察  队列研究  月龄  免疫程序  利用  

    目的建立国产冻干风疹减毒活疫苗的免疫动力学模型,并对其免疫持久性进行预测.方法采用队列研究的方法,对国产冻干风疹减毒活疫苗接种者的血凝抑制抗体(HI)滴度进行5年的追踪观察,利用观察数据建立免疫动力学模型,并利用该模型对其免疫持久性进行预测.结果接种国产冻干风疹减毒活疫苗5年后,HI抗体的几何平均滴度(GMT)由接种后第1月的157.6下降到...

  • 表达人肝细胞生长因子突变体——NK4工程菌的发酵工艺研究

    关键词: nk  肝细胞生长因子  表达  融合基因  总蛋白  收获量  左右  发酵罐  发酵工艺  工程菌  

    目的建立重组NK4融合基因工程菌的发酵工艺.方法采用锥形瓶、发酵罐发酵,对工程菌生长和表达条件如pH、诱导时间及诱导剂浓度等方面进行优化.确定其最佳诱导表达条件,在15 L自控发酵罐中进行分批补料培养.结果在15 L发酵罐进行工程菌发酵,菌体收获量湿重可达24.6g/L±0.98g/L,目的蛋白的表达量保持在菌体总蛋白的50%左右,发酵时间为11 h.结论建立...

  • MUC1核心肽多克隆抗体的制备及鉴定

    关键词: muc1  多克隆抗体  靶向  肿瘤  效价  抗体特异性  特异性抗体  试验鉴定  家兔  诱导免疫  

    目的制备MUC1核心肽多克隆抗体,用于靶向MUC1肿瘤治疗的研究.方法以8R-MUC1核心肽6重复序列重组蛋白(8R-MUCPT)为抗原免疫家兔,以ELISA法确定抗MUC1多克隆抗体效价,以Western blot和ELISA阻断试验鉴定抗体特异性.结果MUC1核心肽多克隆抗体效价为1:256 000,能与MUC1核心肽特异性结合.结论利用原核表达的8R-MUCPT蛋白,可有效地诱导免疫动物产生MUC...

  • 聚乙二醇化重组人生长激素的性质及活性

    关键词: gh  重组人生长激素  聚乙二醇化  体外  pec  放射受体分析法  体内生物活性  二级结构  等电点  分子构象  

    目的研究聚乙二醇化重组人生长激素的性质及活性.方法通过分子筛高效液Size exclusion HPLC)、毛舷细管等电聚焦(cIEF)、圆二色谱(cD)以及荧光光谱等方法检测单聚PEG-GH的纯度、等电点、二级结构以及分子构象;采用妊娠兔肝细胞放射受体分析法(RRA)检测单聚PEG-GH的体外受体亲和力,采用未成年去垂体大鼠体重增加法检测体内生物活性.结果分子筛高...

  • 干扰素脂质体的制备及理化性质分析

    关键词: 脂质体  包封率  酶联免疫分析法  观察  制备条件  理化性质  平均粒径  粒径大小  正交试验  

    目的制备干扰素α2b脂质体,分析其理化性质.方法采用旋转逆相蒸发法制备干扰素α2b脂质体,通过正交试验进行制备条件的优选,电镜观察其粒径大小,酶联免疫分析法测定包封率,并观察脂质体的稳定性.结果干扰素α2b脂质体平均粒径为98.6nm,最高包封率为78.23%,脂质体存放于4℃及-20℃稳定性良好.结论本试验方法制备的脂质体包封率高,理化性质较稳定.

  • HBV壳聚糖微球疫苗鼻腔免疫的初步研究

    关键词: 鼻腔免疫  hbv表面抗原  dna疫苗  免疫组  微球疫苗  腹腔  血清  肉免  免疫途径  肌肉  

    目的研究HBV表面抗原亚单位微球疫苗及DNA微球疫苗鼻腔免疫的效果,为新型鼻腔疫苗的研制提供实验基础.方法选取HBV表面抗原亚单位疫苗及HBV DNA疫苗作为模型,以壳聚糖作为载体,通过沉淀/凝聚法制备壳聚糖微球疫苗,分别通过鼻腔、腹腔及肌肉免疫小鼠,在不同时间点收集小鼠血清,用ELISA检测血清中抗HBV IgG,分析不同免疫途径的免疫效果.结果在HBV...

  • 重组羧肽酶原B的复性及纯化

    关键词: 复性效率  纯化方法  羧肽酶b  包涵体  凝胶过滤  活性  稀释复性  阴离子交换层析  变性  

    目的建立重组羧肽酶原B复性方法及活性羧肽酶B的纯化方法.方法重组大肠杆菌发酵后,表达的羧肽酶原B包涵体经洗涤、变性,采用凝胶过滤的方法对其进行复性及纯化.所得的复性液经Trypsin酶解后,采用DEAE-FF阴离子交换层析进行羧肽酶B的分离纯化,并采用SDS-PAGE检测纯度.结果经凝胶过滤后得到了复性和纯化的羧肽酶原B包涵体,在蛋白终浓度相同的情况...

  • 木瓜凝乳蛋白酶的分离纯化及性质研究

    关键词: 木瓜凝乳蛋白酶  葡萄糖  分离纯化  抑制作用  激活作用  因素研究  离子交换层析  盐酸胍  酶学性质  性质研究  

    目的建立简单有效的木瓜凝乳蛋白酶分离纯化方法,并研究其酶学性质.方法采用离子交换层析直接将木瓜凝乳蛋白酶分离纯化,通过温度、葡萄糖、盐酸胍及其他因素研究酶学性质.结果木瓜凝乳蛋白酶有较高的热稳定性,盐酸胍对其有抑制作用,葡萄糖对其有激活作用.结论离子交换层析是简单有效的分离纯化木瓜凝乳蛋白酶的方法,木瓜凝乳蛋白酶值得进一步开...

  • 不同培养基对肠毒素大肠杆菌疫苗株产生菌毛的影响

    关键词: 疫苗株  肠毒素大肠杆菌  表达  影响  抗原  观察  菌毛  培养基  生长规律  培养物  

    目的通过比较不同培养基对疫苗株产生菌毛的影响,获得一种有利于细菌生长和菌毛产生,而且费用低廉的培养基。方法通过测定培养物的密度,观察疫苗菌株的生长规律,用斑点ELISA和全菌ELISA检测菌毛抗原的表达情况。结果LB培养基既有利于疫苗株的生长,又有利于细菌菌毛的表达。结论LB培养基可以用于疫苗株中试和大规模培养。

  • 蛇毒中趋化活性成分的筛选

    关键词: 蛇毒  趋化活性  筛选  短肽  细胞毒作用  活性成分  生理  长白  生物药剂  利用  

    目的从由蛇毒提取的短肽中筛选趋化活性成分.方法利用趋化小室和细胞微生理检测仪,从国内外12种蛇毒中筛选具有趋化活性的成分.结果从蝰蛇蛇毒中筛选出Knis2-2、Knis3-5、Knis5-3和Knis3-6;从长白黑眉蛇蛇毒中选出Chsv7-8.经进一步检测去除了活性弱的Chsv7-8和具有细胞毒作用的Knis5-3,得到Knis2-2、Knis3-5和Knis3-6三个活性成分.结论为进一步...

  • HIV抗体酶联免疫诊断试剂批内和批间精确性分析

    关键词: hiv抗体  酶联免疫试剂  批间变异  诊断试剂  精确性  变异系数  cv  批次  样品  显示  

    目的了解HIV抗体酶联免疫试剂批内和批间的精确性.方法用同一批试剂多次检测同一样品和不同批次试剂分别检测同一样品,分别计算其批内和批间的变异系数(CV),分析试剂的批内和批间的精确性.结果用1份样品对12家试剂的批内精确性分析结果显示,所有试剂的批内变异系数均在15%以内,符合要求,但不同试剂的变异系数不同,且有统计学差异.用5份样品对12...

  • 酶标法相对定量检测Vero细胞疫苗中宿主细胞蛋白

    关键词: vero细胞  定量检测  宿主细胞  酶标法  蛋白  乙脑疫苗  含量  收获  保护剂  样品  

    目的建立定量检测Vero细胞疫苗中宿主细胞蛋白(host cell protein,HCP)的方法,并用该方法检测Vero细胞乙脑疫苗中HCP含量.方法模拟Vero细胞疫苗生产工艺,制备Vero细胞HCP及其免疫血清,经过DEAE Protein A SepharoseCL-4B亲和层析,制备纯化的抗Vero细胞HCP IgG.通过对检测条件的优化,确立了酶标法相对定量检测Vero细胞疫苗中宿主细胞蛋白的方法,...

  • 热力灭菌效果的验证

    关键词: 热力灭菌  灭菌设备  灭菌工艺  验证方法  热分布  热穿透  制药工艺  

    目的探讨对不同种灭菌设备及灭菌工艺进行验证的方法.方法采用多种温度检测记录仪进行检测,并对记录结果进行比较分析.结果不同种灭菌设备及灭菌工艺,验证要点不同,验证结果差异较大.结论热力灭菌效果应依据验证要点不同,采取相应的验证方法.

  • 二次曲线拟合在比色分析中的应用

    关键词: 比色分析  处理  微量蛋白  生化分析  初步探讨  生物制品  实验结果  确定标准  发生  拟合  

    用分光光度计进行比色分析中,常用直线拟合确定标准曲线的方程参数,但在生物制品的生化分析中常有偏离直线的情况发生,如用二次曲线拟合则可方便地进行数据处理,实际上也扩展了相应分析方法的测量范围.本文重点介绍了如何用二次曲线拟合处理微量蛋白测定的实验结果,并初步探讨了相关的理论基础.

  • 反向疫苗学及其应用前景

    关键词: 反向疫苗学  疫苗研究  研究进展  传统方法  综述  优点  引发  病原  应用前景  

    反向疫苗学是近年来新兴的一门交叉学科,该学科的诞生引发了疫苗研究领域的一场革命.与传统疫苗学相比,它具有省时、省力、经济而有效的优点.对于那些不能应用传统方法研制疫苗的病原尤为适用.本文即对近年来反向疫苗学的研究进展情况及其应用前景作一综述.

  • 动脉粥样硬化疫苗的研究进展

    关键词: 疫苗  动脉粥样硬化  ldl  胆固醇酯转运蛋白  cetp  有效治疗  暂时  危害  发生  疾病  

    动脉粥样硬化(Atherosclerosis,AS)是一种血管疾病,它以血管平滑肌细胞增生和血脂在粥样硬化斑块沉积为特征.粥样斑块的形成与脂代谢紊乱、低密度脂蛋白(LDL)、胆固醇酯转运蛋白(CETP)、CD40-CD40配体及肺炎衣原体(Cpn)感染等多种因素有关.目前,有些药物虽有一定疗效,但仅仅是暂时抑制AS病情的发展,不能有效治疗AS,所以研制LDL疫苗、CETP疫苗、C...

  • 乳铁转运蛋白的研究进展

    关键词: 研究进展  粘膜  抗病毒作用  lf  抑菌  铁转运蛋白  抗菌活性  乳铁蛋白  表面  

    乳铁转运蛋白(Lactoferrin,LF)是一种具有抑菌、杀菌及抗病毒作用的蛋白,广泛存在于各种粘膜表面.乳铁蛋白除了具有抗菌活性以外,其他功能及其保健作用也引起多方关注.本文就近年来对LF的研究进展作一综述.

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