中国生物制品学杂志

杨晓明:科技创新的探索者,疫苗行业的领路人

关键词: 学者型  时光流转  杨晓明  探索者  领路人  创新  

10月,我们讲述一个隐在时间长河深处激扬、温润、跌宕、饱满丰盈的故事,记录追寻无畏困难用汗水和坚持换来成功的先锋。时光流转30余载,初心和理想始终是他前行的动力。他是科技创新的探索者,疫苗行业的领路人,是学者型的企业家。他精准的洞见与前瞻的判断树立了行业的标尺,他的故事蕴藏着中国生物制品行业发展的一段历史和画面。

腮腺炎疫苗株Jeryl Lynn 1反向遗传系统的建立

关键词: 腮腺炎病毒  疫苗株  jl1  反向遗传系统  

目的建立腮腺炎疫苗株Jeryl Lynn 1(JL1)反向遗传系统,获得单一成分的拯救病毒JL1R。方法将JL1全长cDNA基因序列分为7个片段(F1~F7),在F7片段的3′端引入丁型肝炎病毒核酶序列(hepatitis D virus ribozyme,HdvRZ),分段合成后分别插入载体pT7-MCS3中,根据每段重叠区域的酶切位点拼接,构建全长表达质粒pT7-MCS3-MUVJL1(HdvRz);同时构建表达腮腺炎...

柯萨奇病毒A组16型抗原表位预测

关键词: 柯萨奇病毒a组16型  模拟表位  单克隆抗体  噬菌体展示  生物淘选  

目的应用模拟表位策略研究柯萨奇病毒A组16型(Coxsackievirus A16,CA16)抗原表位。方法分别以具有中和活性的抗CA16单克隆抗体2C6、4F9、1D8为靶分子,在噬菌体12肽库中淘选可与之特异性结合的阳性克隆,对淘选得到的阳性克隆进行序列测定和比对,并采用Phage ELISA法进行特异性鉴定。同时利用生物信息学方法对CA16衣壳蛋白理化性质进行分析,并与阳...

Ⅲ型登革病毒在C6/36及Vero细胞中复制对其毒力的影响

关键词: vero细胞  毒力  

目的探讨Ⅲ型登革病毒(dengue virus,DENV)在C6/36和Vero细胞中复制对其毒力的影响。方法将DV3-1及DV3-2两株Ⅲ型DENV在C6/36细胞上接种传代培养,待其毒力稳定再接种至Vero细胞连续传代培养。用Ⅲ型DENV标准质粒检测不同代次病毒拷贝数,PCR扩增获得传代毒种全长基因序列,并与原代病毒基因序列进行比对。结果DV3-1在C6/36细胞上传代至第17代次(P1...

cGAMP与幽门螺杆菌蛋白抗原肌肉注射诱导BALB/c小鼠免疫应答初步分析

关键词: 幽门螺杆菌  佐剂  疫苗  

人乳头瘤病毒31型L1病毒样颗粒在毕赤酵母中的表达及其免疫原性初步评价

关键词: 人乳头瘤病毒  病毒样颗粒  毕赤酵母  基因重组  蛋白表达  

目的在毕赤酵母中表达人乳头瘤病毒(human papillomavirus,HPV)31型L1病毒样颗粒(virus-like particles,VLP),并初步评价其免疫原性。方法构建HPV31 L1四拷贝重组表达质粒,电转化毕赤酵母KM71,甲醇诱导表达蛋白。将重组菌经30 L发酵罐发酵,产物分离纯化,用纯化样品免疫小鼠,采用半数有效剂量(median effective dose,ED50)初步评价表达产物的免疫...

GⅡ.21型诺如病毒衣壳蛋白VP1的表达、纯化及鉴定

关键词: vp1蛋白  毕赤酵母  

目的构建含有GⅡ.21型人诺如病毒(human norovirus,HuNoV)衣壳蛋白VP1基因的重组质粒,通过PichiaPink毕赤酵母表达VP1蛋白,并鉴定纯化产物。方法合成NoV GⅡ.21 VP1蛋白基因序列,将其连接至pPink-HC载体,构建重组质粒pPink-HC-GⅡ.21-VP1;经测序鉴定后,电转化毕赤酵母PichiaPink,甲醇诱导目的蛋白表达;采用AKTA pure M150型纯化仪纯化目的蛋白,W...

治疗用卡介苗在膀胱癌预防及治疗中的作用

关键词: 治疗用卡介苗  mb49细胞  膀胱癌  细胞毒性  免疫应答  

抗树鼩CD4单克隆抗体的制备及其生物学特性的鉴定

关键词: 树鼩  cd4  单克隆抗体  生物学特性  

目的制备鼠抗树鼩CD4单克隆抗体,并对其生物学特性进行鉴定。方法将重组质粒pGEX-5X-1-CD4和pET30a(+)-CD4分别转化感受态E.coli BL21和BL21(DE3),经IPTG诱导表达,并通过Glutathione Sepharose 4 Fast Flow亲和层析柱纯化重组蛋白GST-CD4和His-CD4。以His-CD4蛋白为免疫原免疫BALB/c小鼠,经杂交瘤技术筛选出能分泌抗树鼩CD4的杂交瘤细胞株,制备...

2017年兰州市5岁以下儿童病毒性腹泻分子流行病学分析

关键词: 病毒性腹泻  儿童  流行病学  基因型  

目的分析2017年兰州市5岁以下儿童病毒性腹泻病原体及其流行特点,为病毒性腹泻的防控提供科学依据。方法收集2017年就诊于兰州大学第一医院儿科的5岁以下急性腹泻患儿粪便样本219份,采用双抗体夹心ELISA法检测A组轮状病毒(rotavirus A,RVA),阳性样本采用RT-PCR法进行G/P分型;同时采用RT-PCR法鉴定人杯状病毒(human calicivirus,HuCV)、人星状病...

Y 群脑膜炎球菌结合物制备过程中荚膜多糖水解条件的优化

关键词: y群脑膜炎球菌  荚膜多糖  水解  冰醋酸  

目的对Y群脑膜炎球菌结合物制备过程中荚膜多糖水解条件进行优化,确定水解反应参数,以适用于后续结合物制备。方法分别使用双氧水(H2O2)和冰醋酸2种水解反应试剂,在不同浓度(H2O2分别至终浓度1%和2%,冰醋酸分别至终浓度0.05和0.1 mol/L)、不同温度(37和50℃)下反应不同时间,比较水解物的分子大小;采用确定的工艺参数连续制备3批多糖水解物,检测...

静注人免疫球蛋白生产工艺对凝血因子Ⅺ的去除效果

关键词: 静注人免疫球蛋白  低温乙醇工艺  压滤工艺  

目的评价低温乙醇及压滤生产工艺对静注人免疫球蛋白(intravenous immunoglobulin,IVIG)中凝血因子Ⅺ(FⅪ)的去除效果。方法取9批次低温乙醇工艺不同阶段分离的血浆蛋白及3批次FⅡ沉淀精制和制剂阶段的样品,采用部分凝血酶时间(nonactivated partial thromboplastin time,NAPTT)试验检测样品中FⅪ的含量。结果FⅠ+Ⅱ+Ⅲ分离对FⅪ的去除效率约为6...

人源细胞间黏附分子-1基因SYBR GreenⅠ实时荧光定量PCR检测方法的建立、验证及应用

关键词: sybr  人源细胞  

两种重组人乳头瘤病毒52型免疫原性检测方法相关性的比较

关键词: 人乳头瘤病毒  免疫原性  中和抗体滴度  

牛对氧磷酶-1蛋白多克隆抗体的制备及其双抗夹心ELISA检测方法的建立

关键词: 牛  多克隆抗体  双抗夹心elisa法  

发色底物检测法用于人纤维蛋白溶酶原纯化工艺的可行性分析

关键词: 人纤维蛋白溶酶原  发色底物法  效价  验证  

目的分析发光底物检测法用于人纤维蛋白溶酶原(plasminogen,Pg)纯化工艺的可行性。方法采用纤溶酶原测定试剂盒对ACL7000血凝仪运行发色底物法的性能进行确认;并对该方法的线性范围、准确度、精密度、选择性进行验证;应用Softmax及Statistic软件分析定标血浆及Pg纯化样品检测结果的平行性;采用验证的方法检测Pg全层析工艺样品的效价及目标样品存...

超快速液相色谱法测定大鼠肝细胞中腺苷酸含量

关键词: 超快速液相色谱法  腺苷酸  肝细胞  大鼠  

目的建立大鼠肝细胞中3种腺苷酸[三磷酸腺苷(ATP)、二磷酸腺苷(ADP)和一磷酸腺苷(AMP)]的超快速液相色谱测定法。方法制备3种腺苷酸混合标准工作液,同时将BRL大鼠肝细胞样品经超声波破碎仪处理提取目标化合物。液相色谱条件:色谱柱为Poroshell 120 SB-AQ C18(100 mm×3.0 mm,2.7μm),流动相为20 mmol/L磷酸氢二钠+20 mmol/L磷酸二氢钠缓冲溶液,流...

基因编辑与诱导多能干细胞的联合应用

关键词: 诱导多能干细胞  基因编辑  细胞治疗  

基于干细胞的细胞疗法是目前最有潜力和创新性的方法,诱导多能干细胞(induced pluripotent stem cells,iPSC)结合成体干细胞和胚胎干细胞(embryonic stem cell,ESC)的优点和特征,在重编辑技术方面取得了重大进展。本文介绍了iPSC技术和位点特异性核酸酶(site specific nucleotide,SSN)介导的基因编辑工具的发展,以及这两种新技术在生物医学研究...

基于轮状病毒VP6蛋白新型候选疫苗的研发进展

关键词: 轮状病毒  vp6蛋白  非复制型疫苗  

轮状病毒(rotavirus,RV)是一种人畜共患病原体,给畜牧业和人类健康带来巨大威胁。对RV感染的治疗,目前尚无有效药物,接种疫苗是有效防控RV性胃肠炎暴发的重要措施。目前人商品化RV疫苗均为口服减毒活疫苗,存在散毒风险及潜在安全性等问题,且该疫苗在不发达国家的免疫效力较低,因此,非复制型疫苗很可能成为主要的候选疫苗。本文以RV结构蛋白VP6为...

整合素相关蛋白-受体信号调节蛋白α通路在肿瘤治疗及异种器官移植中的研究进展

关键词: 整合素相关蛋白  肿瘤  抗体  异种器官移植  

目的肿瘤的产生和发展是多项因素共同作用的结果,其中,免疫系统起着至关重要的作用。整合素相关蛋白(cluster of differentiation 47,CD47)是一种广泛表达于多种细胞表面的跨膜蛋白。CD47高表达于众多肿瘤细胞表面,其受体信号调节蛋白α(signal regulatory proteinα,SIRPα)主要表达在巨噬细胞表面,使癌细胞免于被巨噬细胞杀伤,造成免疫逃逸。另外...

我国预防性疫苗效价检测方法的现状和思考

关键词: 疫苗  效价  体内效力  体外效力  相对效力  

《中国药典》三部(2015版)中效价(效力)的定义为用适当的定量生物测定法确定的生物活性的量度[1]。疫苗效价与其活性及预期保护效果直接相关,是疫苗有效性和生产一致性的关键指标,一般包括体内效力ED50、病毒滴度、活菌数、抗原含量等项目。疫苗效价检测方法的选择主要取决于不同品种疫苗的自身特性,包括制备方法、组成成分以及对疫苗免疫机制的...

人用狂犬病疫苗(Vero细胞)DNA残留控制的相关探讨

关键词: 人用狂犬病疫苗  vero细胞  dna残留  dna检测  质量标准  

人用狂犬病疫苗生产经历了神经组织、禽胚及细胞培养3个发展阶段[1-2]。随着生物技术发展,不同时期生产企业采用不同细胞、工艺进行生产,制品的质量不断提升。目前,国内已上市人用狂犬病疫苗生产用细胞基质主要包括原代细胞系(primary cell lines,PCLs)、传代细胞系(continuous cell lines,CCLs)及二倍体细胞系(diploid cell lines,DCLs),代表性...

膜生物反应器工艺在生物制药废水处理系统改造中的应用

关键词: 膜生物反应器  生物制药  废水处理  

疫苗类制药废水属高浓度有机废水,含脂肪、蛋白质、氨氮等物质,难降解物多,废水水质及水量均存在较大波动,不易处理。膜生物反应器(membrane bioreactor,MBR)是一种将高效膜分离技术与传统活性污泥法相结合的新型高效废水处理工艺,采用具有独特结构的浸没式膜组件,将其置于曝气池中,经好氧曝气和生物处理后的废水,由泵通过滤膜过滤后抽出[1]。

疫苗运输稳定性的研究进展

关键词: 疫苗  温度偏移  配送风险  运输稳定性  

疫苗的稳定性对全球免疫规划的成功具有重大影响。国际人用药品注册技术要求国际协调会(International Conference on Harmonisation,ICH)的《稳定性指导原则》[1]主要阐述的是在实时储存条件下进行疫苗稳定性研究,WHO的《疫苗稳定性研究指导原则》[2]也明确要求在推荐的实时储存条件下进行稳定性和温度高于推荐储存温度下的稳定性研究(加速稳定...