培养条件对体外诱导造血干/祖细胞向血小板定向增殖与分化的影响

张可莹 刘江 贾延军 单小燕 王东梅 王琳 王丽君 刘娜 赵波涛 张志欣 北京市红十字血液中心 北京100088

关键词:体外培养 血小板 增殖与分化 培养基 

摘要:目的观察3种不同培养基以及细胞接种密度对体外诱导造血干/祖细胞向血小板方向增殖和分化的影响。方法用添加干细胞因子(SCF)和促血小板生成素(TPO)等细胞因子的无血清培养基(StemSpan唧SFEM和X-VIV010)或IMDM/10%FBS来扩增脐血CD34+细胞向血小板定向分化,比较不同培养基的培养效果;CD34+细胞接种浓度为5×10^3/ml、10^3/ml和10^5/ml,比较不同接种浓度对扩增效果的.影响。结果培养d14、d24和d29时,StemSpan@SFEM培养基体系中细胞分别扩增了(11000±577.35)、(196666.67±14529.66)和(176666.67±8819.17)倍,显著高于X—VIV010和IMDM/10%FBS组,其中在d24和d29时,巨核系细胞所占比例分别是(54.57±2.32)%和(69.4±2.02)%,显著高于X—VIV010和IMDM/10%FBS组。培养14d后初始接种浓度为10^4/ml的CD34+细胞在StemSpanSFEM培养基体系中扩增(11000±577.35)倍,显著高于初始接种浓度为5×10^3/ml和10+/ml组。结论和X-VIV010和IMDM/10%FBS相比,StemSpan@SPEM培养基最有利于脐血CD34+细胞体外向血小板定向扩增和分化;10^4/ml的CD34+细胞接种密度最有利于细胞扩增和分化。

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