中国兽医科学杂志

猪2型圆环病毒ORF1基因的克隆及表达

关键词: 猪2型圆环病毒  orf1基因  克隆  表达  蛋白  分子质量  

根据GenBank中猪圆环病毒2型(PCV-2)的ORF1基因序列,设计合成了1对引物,对PCV-2广东株(GD)ORF1基因进行PCR扩增,将扩增的ORF1基因克隆入pMD 18-T载体,获得的重组质粒命名为pMD-ORF1.将ORF1的KpnⅠ和XbaⅠ双酶切产物插入原核表达载体pBAD/gⅢ C得到重组子,命名为pBAD/gⅢ-ORF1.序列分析表明,克隆的ORF1与德国分离株AF201897核苷酸序列的同源性高...

口蹄疫病毒全长cDNA克隆的快速构建

关键词: 口蹄疫病毒  cdna  克隆  cdna末端快速扩增  race  全基因组  

利用RT-PCR和3′ cDNA末端快速扩增(RACE)技术分别扩增出包含口蹄疫病毒(FMDV)全基因组的2个重叠cDN段,将其分别插入到载体pcDNA3.1zeo(+)和pGEM-T-Easy中,然后利用片段本身单一酶切位点将FMDV全长cDNA克隆至pcDNA3.1zeo(+)载体,经PCR扩增、酶切鉴定和序列测定.结果表明,重组质粒(pcDNA3.1/FMDV)携带了FMDV OH/99基因组全长cDNA序列.

猪囊尾蚴cDNA质粒表达文库的构建

关键词: 猪囊尾蚴  cdna  质粒  表达文库  mrna  克隆  

从猪囊尾蚴中提取总RNA,并分离出mRNA,采用定向克隆方法,将猪囊尾蚴cDN段重组入质粒表达载体pSPORT-1的NotⅠ和SalⅠ双酶切位点之间,构建了猪囊尾蚴cDNA表达文库.通过库容量鉴定,所构建的表达文库的容量为2×106;经含有IPTG和X-gal的颜色选择平皿测定,其重组率为100%.

胸膜肺炎放线杆菌APXⅡA基因的克隆及序列测定

关键词: 胸膜肺炎放线杆菌  基因  克隆  序列测定  核苷酸序列  重组质粒  

用PCR法从胸膜肺炎放线杆菌(APP)7型的DNA提取物中扩增出大小为2 873 bp的APXⅡA基因片段;将PCR产物重组到质粒载体pMD 18-T中,并对重组质粒进行酶切分析及序列测定.结果表明,克隆片段为完整的目的基因,该片段的核苷酸序列与国外分离株M30602的同源性达99.7%.

扎鲁司特对低温诱发肺动脉高压肉鸡右心功能的影响

关键词: 扎鲁司特  肉鸡  肺动脉高压  右心月巴大  肉鸡腹水综合征  肉鸡肺动脉高压综合征  

禽流感重组禽痘病毒疫苗不同途径及剂量接种的免疫效力

关键词: 禽流感  重组禽痘病毒  疫苗  接种途径  剂量  免疫效力  

将表达禽流感病毒(AIV)H5 HA和N1 NA基因的重组禽痘病毒(rFPV-HA-NA)以不同剂量分别经翅下刺种、肌肉注射、皮下注射、点眼及滴鼻途径接种于4周龄SPF鸡.结果,该疫苗经翅下刺种、肌肉注射和皮下注射途径接种的SPF鸡,能够诱导其产生血凝抑制(HI)抗体;用100LD50的HPAIV A/Goose/Guangdong/1/96(H5N1)毒株攻击后,免疫鸡无一发病和死亡,免疫保护率为1...

鸭源H9N2亚型流感病毒NS基因的克隆及表达

关键词: 鸭  h9n2亚型  流感病毒  ns基因  克隆  表达  质粒  

根据GenBank中收录的H9N2亚型流感病毒的NS基因序列设计合成了1对引物NSU/NSL,利用RT-PCR扩增出了H9N2株NS基因;将该基因片段克隆到pMD 18-T载体上,并对所得到的重组质粒进行酶切分析及序列测定.结果,获得了NS基因片段的阳性重组子,扩增的NS基因包含NS1基因完整的阅读框架和部分NS2基因,其序列与GenBank中收录的其他分离株NS基因比较,同源性达96...

犊牛前脂肪细胞的培养及其增殖与分化模型的建立

关键词: 犊牛  前脂肪细胞  细胞培养  脂肪组织  增殖  分化  

选择犊牛小肠网膜、附睾脂肪垫、腹部皮下脂肪组织材料,应用原代消化细胞培养法培养细胞.结果,由小肠网膜培养出了成分均一、增殖旺盛、分化率高的梭形细胞.经形态学动态变化观察、生长曲线测定、油红O脂肪染色及对胰岛素反应的测定,证明为功能活跃的前脂肪细胞,并在体外重现了其增殖、肥大的全过程.结果显示,小肠网膜脂肪组织存在着功能活跃的...

牛羊流行性口膜炎的治疗

关键词: 牛  羊  流行性口膜炎  治疗  甘肃  临床症状  

2003年6～8月,甘肃省渭源县从外地引进数批小尾寒羊,在一些羊群中开始流行口膜炎,以后五竹、路园、锹峪、莲峰等乡的役牛相继发生类似疫病,经甘肃省兽医技术推广总站系统检查,确诊为口膜炎.

《牛羊病诊治彩色图谱》出版

广西家犬狂犬病病毒的感染状况调查

关键词: 广西  家犬  狂犬病  病毒  感染  弹状病毒科  

为了解广西家犬狂犬病病毒的感染状况,采用RT-PCR方法对广西13个市、地区的家犬携带狂犬病病毒情况进行了检测,结果阳性检出率达6.69%(19/284),证明广西家犬存在一定程度的带毒.

小热休克蛋白家族的研究进展

关键词: 基因  转录活性  热休克蛋白  hsp  结构  作用机理  生物学功能  

1962年Ritossa等发现果蝇唾液腺多线染色体在环境温度升高时,某些特定部位在1min 内就出现'蓬松'现象,当温度恢复到正常时,其他部位才会出现类似的蓬松.

动物RNA病毒全长感染性cDNA的研究进展

关键词: 动物  rna病毒  cdna  致病性  传染病  逆向遗传学  

动物致病性RNA病毒,如登革热病毒(DEN)、猪瘟病毒(CSFV)、牛病毒性腹泻病毒(BVDV)、口蹄疫病毒(FMDV)和风疹病毒(RUBV)等,可诱发人或动物产生严重的传染病.这些传染病在世界各地的间歇性暴发,给人类健康造成了严重影响,给畜牧业发展造成了巨大的损失.逆向遗传学的发展有力地推动了动物RNA病毒的研究,它的基本内容包括通过RT-PCR获得RNA病毒的全...

大肠埃希氏菌F18ab菌毛F亚单位基因的克隆与鉴定

关键词: 大肠埃希氏菌  f18ab  菌毛  f亚单位  基因  克隆  仔猪水肿病  

根据已发表的大肠埃希氏菌F18ab菌毛F亚单位(FedF/ab)的基因(fedF/ab)序列,设计了1对引物,利用PCR技术从大肠埃希氏菌F107/86、YCED1、YCED2、C、D和12F株中分别扩增获得了一段序列,并克隆至pGEM-T载体,获得了重组质粒TF107F、TYCED1F、TYCED2F、TCF、TDF、T12FF.经琼脂糖凝胶电泳、序列测定及分析,6个重组质粒的大小均为903 bp,与fedF/ab 基因...

狂犬病的分子生物学诊断

关键词: 狂犬病  分子生物学  诊断  狂犬病病毒  人畜共患  急性传染病  

从攻击咬伤人并致其死亡的犬脑组织中提取总RNA,用特异性引物通过反转录聚合酶链反应(RT-PCR)获得了长度约为1 423 bp的核酸片段,与预期的片段大小相符;将扩增产物连接到pMD 18-T 载体中,转化大肠埃希氏菌JM109,筛选氨苄青霉素抗性菌落,提取质粒,经酶切鉴定、PCR分析及测序,证明所克隆的1 423 bp片段含有完整的狂犬病病毒N基因,与国外参考毒株的...

猪流行性腹泻病毒Vero细胞微载体培养条件的优化试验

关键词: 猪流行性腹泻病毒  vero细胞  微载体  生物反应器  疫苗  细胞培养  猪流行性腹泻  

通过研究搅拌速度、pH值、血清浓度等环境条件对细胞贴壁的影响以及细胞接种密度、微载体浓度与细胞生长的关系,对应用微载体技术和生物反应器系统生产猪流行性腹泻病毒(PEDV)的可行性进行了探讨.结果表明,搅拌转速、pH值、血清浓度均对Vero(PEDV)细胞在CT-3微载体上的贴壁率和均匀分布有影响;当接种密度为15.0×104 /mL时,即每1 mg微载体接种5.0...

L—PGDS基因在大鼠睾丸与附睾中的表达

关键词: 大鼠  睾丸  附睾  lipocalin型前列腺素d合成酶基因  精子  

选用2月龄SD大鼠睾丸与附睾总RNA为模板,运用RT-PCR和蛋白质印迹技术探讨了Lipocalin型前列腺素D合成酶(L-PGDS)基因在大鼠睾丸与附睾头、附睾体和附睾尾中的表达及其差异.结果表明,L-PGDS基因在大鼠睾丸中没有表达,在附睾中有较强表达,附睾头表达量最高,附睾体次之,附睾尾最低,表达量存在差异.提示,L-PGDS在精子成熟过程中起着一定的作用.

牛产气荚膜梭菌的分离与鉴定

关键词: 牛  产气荚膜梭菌  分离  鉴定  猝死  培养基  

针对海南牛猝死的现象,采集23头病牛的病料进行细菌分离培养.从菌落、菌体的形态、细菌生化特征、动物试验、细菌动力学试验等方面对病原菌进行了鉴定.结果表明,病原菌为革兰氏阳性粗短杆菌,严格厌氧,β-溶血,能发酵葡萄糖、麦芽糖、蔗糖和含铁牛乳;厌气肉肝汤培养物滤液0.1～0.2 mL皮下注射可致死小白鼠.根据试验结果鉴定其为产气荚膜梭菌.

黄芪提取物对鸡生长发育及免疫功能的影响

关键词: 黄芪提取物  鸡  生长发育  免疫功能  免疫增强剂  抗菌活性  

蛋鸡血清与卵黄中禽流感病毒抗体的相关性

关键词: 蛋鸡  血清  卵黄  禽流感病毒  抗体  相关性  疫情监测  ai  

用禽流感(AI)H9N2油乳剂灭活疫苗免疫非免疫蛋鸡,并于免疫后第0、3、5、7、9、11、13、15、17、19、21、30 d分别测定血清及卵黄中的AI血凝抑制试验(HI)及琼脂扩散凝集试验(AGP)抗体.结果显示,免疫后第7 d卵黄中即可检出HI及AGP抗体,以后逐渐上升,在免疫后第19～21 d达高峰值,与血清的HI抗体水平接近,差异不显著(P>0.05).表明通过对鸡蛋卵黄AIV...

中药治疗犬出血性肠炎

关键词: 中药  治疗  犬  出血性肠炎  临床症状  

犬出血性肠炎是犬的多发病,多因食入腐败变质或有毒的饲料而发病.该病发病快,病程短,死亡率高,用抗菌消炎等药物治疗一般难以奏效.笔者多年来采用中药治疗犬出血性肠炎36例,治愈34例,好转2例,治愈率在94%以上.

一起羊快疫疫情的诊断与防制

关键词: 羊快疫  疫情  诊断  临床症状  病理变化  防治  

2003年9月中旬,合水县太白乡的羊大量发病死亡.接到疫情报告后,笔者即前往发病村户调查疫情、现场剖检病死羊,并将所采集的病料带回本站实验室进一步检验,确诊为羊快疫.经采取综合防制措施,20d后基本控制了疫情.

不同时间投服阿维菌素防治绵羊寄生虫病的效果

关键词: 阿维菌素  防治  绵羊  寄生虫病  驱虫药物  

为了探索应用方便,防治效果好、安全而且经济效益显著的驱杀内外寄生虫的方法,笔者在青海省果洛州玛沁、达日两县进行了不同时间使用阿维菌素防治绵羊内外寄生虫病的试验.

中草药狼毒对山羊疥螨病的治疗试验

关键词: 中草药  狼毒  山羊  疥螨病  治疗  寄生性皮肤病  

山羊疥螨病是由疥螨寄生于山羊表皮内引起的慢性、消耗性、寄生性皮肤病,具有高度的传染性,短期内即可导致羊群的严重感染.患病山羊剧痒,脱毛,全身衰竭,流产甚至死亡.多年来山羊疥螨病一直影响着山西省养羊业的发展.传统杀螨药中,有机磷杀虫药与菊酯类杀虫药对山羊疥螨病有一定疗效,但毒副作用较大.因此,中药杀螨剂的开发研究与利用倍受关注.研...

波尔山羊痘的诊断与防制

关键词: 波尔山羊  山羊痘病毒  诊断  防制  临床症状  剖检  实验室检验  

山羊痘是由山羊痘病毒引起的一种急性、热性、接触性传染病,呈流行性发生.该病主要发生在冬、春季节,气候严寒,气温多变,雨雪、霜冻、枯草季节,饲养管理不善等因素都可促使发病和加重病情.本病的特征是在山羊的皮肤和黏膜上出现特异性的痘疹,羔羊较老龄羊敏感,死亡率亦高.前不久,笔者曾遇到一起波尔山羊痘,经采取有效的治疗措施,使疫情很快得到...

寡糖益生素在罗曼蛋鸡生产中的应用效果

关键词: 寡糖益生素  罗曼  蛋鸡  生产  日粮  饲喂效果  

寡糖益生素是由有益微生物与寡糖类物质有机结合而成,具有促进动物生长,调理肠道内环境,维持畜禽体内正常有益菌群平衡,增强机体免疫力,提高饲料利用率及畜禽生产性能,改善动物产品质量,消除粪便异味等多种功能.本试验旨在进一步验证寡糖益生素在蛋鸡生产中的应用效果.

鸡球虫病暴发的流行病学因素

关键词: 鸡  球虫病  流行病学  球虫卵囊  生物学特性  感染途径  

多数学者认为,在养鸡场中球虫的存在似乎是不可避免的,即使是卫生条件较好的鸡场,仍不可能彻底消除球虫感染的隐患.值得提出的是,养鸡场球虫的"寄生"和球虫病的"暴发"是2个不同的概念.寄生仅指球虫的存在,并未引起发病;而暴发则是指在鸡群中有一定数量的鸡发病或一定比例的病鸡死亡,经济损失也较大[1].寄生虫病的发生与流行均应同时具备3个基本...

猪霉形体病的监控与预警预报

关键词: 猪  霉形体病  肺炎霉形体  病原学  形态特征  分子生物学  诊断  

猪霉形体病(Mycoplasmal pneumonia of swine, MPS)是由猪肺炎霉形体(Mycoplasma hyopneumoniae)引起的慢性接触性呼吸道传染病[1],对养猪业危害极大.笔者试图从病原学、流行病学、临床症状、病理变化等方面对该病的监控和预警预报作一概述.

2004中国畜牧业交易会筹备工作全面启动

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